ELISA實(shi)驗(yan)中(zhong)常(chang)見(jian)的(de)誤差來源(yuan)有(you)哪些(xie)?

　　ELISA實(shi)驗(yan)中(zhong)常(chang)見(jian)的(de)誤差來源(yuan)可(ke)分為(wei)以下幾(ji)類，結(jie)合(he)最新(xin)研究(jiu)與實(shi)踐總(zong)結如下：

　　壹(yi)、樣(yang)本(ben)相(xiang)關(guan)因(yin)素(su)

　　內源(yuan)性(xing)幹(gan)擾(rao)物(wu)質‌：類風(feng)濕(shi)因(yin)子(RF)、補體(ti)、嗜異(yi)性抗(kang)體(ti)等(deng)可與抗(kang)體(ti)非(fei)特異(yi)性結(jie)合(he)，導致假陽(yang)性‌。

　　外(wai)源(yuan)性(xing)幹(gan)擾(rao)‌：溶(rong)血樣(yang)本(ben)中(zhong)的(de)血紅(hong)蛋(dan)白具有(you)過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)活性，可能引(yin)發(fa)非(fei)特異(yi)性顯(xian)色(se);細菌汙(wu)染或(huo)樣(yang)本(ben)反(fan)復(fu)凍(dong)融也會(hui)影(ying)響結果(guo)準確(que)性(xing)‌。

　　抗(kang)凝劑影(ying)響‌：EDTA、肝素(su)等(deng)可能(neng)幹(gan)擾(rao)酶(mei)反(fan)應(ying)或抗(kang)原抗(kang)體(ti)結合(he)‌。

　　二(er)、操作與試劑因(yin)素(su)

　　加樣(yang)誤差‌：移(yi)液器(qi)未校準、吸(xi)頭松(song)動(dong)或(huo)加樣(yang)速(su)度不均導致孔間差(cha)異(yi)‌。

　　孵育(yu)條件(jian)‌：溫(wen)度不均(如邊(bian)緣(yuan)效應(ying))、時(shi)間(jian)控(kong)制(zhi)不當影(ying)響反應(ying)壹致性(xing)‌。

　　洗(xi)滌(di)問(wen)題(ti)‌：沖洗(xi)不(bu)凈(jing)(殘留(liu)未結(jie)合(he)物質)或過(guo)度沖洗(xi)(洗(xi)脫結合(he)復(fu)合(he)物)‌。

　　試劑質量‌：抗(kang)體(ti)純(chun)度低、顯色液變質或稀(xi)釋不(bu)均直(zhi)接(jie)影(ying)響信號穩定性(xing)‌。

　　三、設備與環(huan)境因素(su)

　　酶標(biao)板問(wen)題(ti)‌：孔底劃(hua)痕或邊(bian)緣(yuan)效應(ying)導致吸(xi)光(guang)度偏差(cha)‌。

　　儀(yi)器(qi)校準‌：酶(mei)標(biao)儀(yi)濾(lv)光片設置錯(cuo)誤或波(bo)長選(xuan)擇不當影(ying)響讀數‌。

　　交(jiao)叉(cha)汙(wu)染‌：重(zhong)復(fu)使用(yong)封板(ban)膜(mo)或吸(xi)頭導致孔間汙(wu)染‌。

　　四、系(xi)統(tong)誤差與人為(wei)因(yin)素(su)

　　方法(fa)局(ju)限(xian)性(xing)‌：鉤狀效應(ying)(高濃度抗(kang)原假陰性)或(huo)抗(kang)體(ti)交(jiao)叉(cha)反應(ying)‌。

　　操作差(cha)異(yi)‌：不同(tong)工(gong)作人員(yuan)的(de)手法(fa)(拍幹(gan)力度、孵育(yu)時(shi)間(jian)控(kong)制(zhi))引(yin)入批(pi)間(jian)變異(yi)‌。

　　優(you)化(hua)建(jian)議(yi)

　　標(biao)準化(hua)操作‌：使用(yong)多(duo)通道(dao)移(yi)液器(qi)、嚴格(ge)控(kong)溫(wen)(37℃±1℃)、增加洗(xi)滌(di)次數‌。

　　質量控(kong)制‌：設立空白對照、定期(qi)校準儀(yi)器(qi)、避(bi)免(mian)溶血樣(yang)本(ben)‌。

　　通(tong)過(guo)針(zhen)對性(xing)控(kong)制(zhi)上(shang)述(shu)因素(su)，可顯(xian)著(zhu)提升(sheng)ELISA結果(guo)的(de)重(zhong)復(fu)性(xing)和準確(que)性(xing)‌。

　　註：以上(shang)僅供(gong)參(can)考(kao)，不(bu)作為(wei)實(shi)際(ji)數據，實(shi)驗(yan)需(xu)嚴格(ge)遵循(xun)說(shuo)明或(huo)咨詢技(ji)術老師。 Elisa試劑盒(he)

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