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如(ru)何(he)判斷標(biao)準(zhun)品(pin)是(shi)否(fou)能(neng)溶(rong)解(jie)?
判斷標(biao)準(zhun)品(pin)是(shi)否(fou)溶(rong)解(jie)需結合目(mu)視觀(guan)察、實(shi)驗驗(yan)證(zheng)和(he)儀(yi)器(qi)檢測等(deng)多(duo)種(zhong)方法(fa),具體操(cao)作如(ru)下:
1. 目(mu)視觀(guan)察法(fa)
溶(rong)液澄清度:溶(rong)解(jie)的標(biao)準(zhun)品(pin)溶(rong)液應呈(cheng)澄清透(tou)明(ming)狀態,無肉眼(yan)可(ke)見的懸浮(fu)顆粒(li)或沈澱(dian)。若(ruo)溶(rong)液渾濁或存在(zai)未(wei)溶(rong)顆(ke)粒(li),需進壹步(bu)處(chu)理(li)。
靜置測試:將溶(rong)液靜置30分(fen)鐘,觀察是(shi)否(fou)有(you)沈澱(dian)析(xi)出(chu)。若(ruo)出現沈澱(dian),表(biao)明(ming)未(wei)溶(rong)解(jie)。
2. 實(shi)驗(yan)驗證(zheng)法(fa)
溶(rong)解(jie)度測試:按藥(yao)典(dian)方法(fa),稱(cheng)取標(biao)準(zhun)品(pin)加入溶(rong)劑(ji)後(hou),每隔(ge)5分(fen)鐘振搖30秒,30分(fen)鐘內無顆粒(li)殘留(liu)視為(wei)溶(rong)解(jie)。對於難溶(rong)物(wu)質(zhi),可(ke)適當(dang)延(yan)長觀察時間(jian)或輕(qing)微加熱(re)。
過(guo)濾/離(li)心:若(ruo)目(mu)視不確(que)定,可(ke)通(tong)過(guo)0.2μm濾膜過濾(lv)或離(li)心(xin)(3000g,10分(fen)鐘),取上清液檢測。上(shang)清液中無目(mu)標(biao)物(wu)損(sun)失則表(biao)明(ming)溶(rong)解(jie)。
3. 儀(yi)器(qi)輔(fu)助(zhu)檢(jian)測
HPLC驗(yan)證(zheng):溶(rong)解(jie)後(hou)樣(yang)品(pin)經HPLC檢測,若(ruo)主(zhu)峰面(mian)積(ji)與(yu)理(li)論(lun)值(zhi)壹致(zhi)且(qie)無異常(chang)峰(feng),說(shuo)明(ming)溶(rong)解(jie)充(chong)分(fen)。
紫外(wai)分(fen)光(guang)光(guang)度法(fa):對比(bi)溶(rong)解(jie)前後(hou)吸(xi)光(guang)度,若(ruo)差異(yi)顯(xian)著(zhu)(如(ru)吸(xi)光(guang)度下降),提(ti)示(shi)未(wei)溶(rong)解(jie)。
註(zhu)意(yi)事項(xiang)
溶(rong)劑(ji)選擇(ze):需確(que)保溶(rong)劑(ji)與(yu)標(biao)準(zhun)品(pin)兼容(rong),避免化學反應或析(xi)出(chu)。
溫(wen)度控制(zhi):部(bu)分(fen)標(biao)準(zhun)品(pin)需特定溫(wen)度溶(rong)解(jie)(如(ru)37℃水浴(yu)),但(dan)需驗證(zheng)熱(re)穩(wen)定性。
避免反復凍(dong)融:溶(rong)解(jie)後(hou)的標(biao)準(zhun)品(pin)應分(fen)裝保存,反復凍(dong)融可(ke)能導(dao)致(zhi)析(xi)出(chu)。若(ruo)ELISA實驗(yan)中(zhong)標(biao)準(zhun)品(pin)溶(rong)解(jie)不全(quan),可(ke)能導(dao)致(zhi)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)異(yi)常(chang)(如(ru)OD值偏(pian)低(di)或無梯度),建議(yi)優先通(tong)過(guo)超聲或(huo)更(geng)換(huan)溶(rong)劑(ji)優化溶(rong)解(jie)條(tiao)件(jian)。
註(zhu):以上僅(jin)供參(can)考(kao),不作為實際(ji)數據(ju),實驗需嚴(yan)格(ge)遵循說(shuo)明(ming)或咨詢(xun)技術老(lao)師。 Elisa試劑(ji)盒
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