本生(sheng)教(jiao)妳正(zheng)確(que)操(cao)作(zuo)大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A(PKA)ELISA試(shi)劑(ji)盒

　　大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A試(shi)劑(ji)盒檢測(ce)原理(li):

　　大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A試(shi)劑(ji)盒采用雙抗體壹步夾(jia)心(xin)法(fa)酶聯(lian)免(mian)疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(ELISA)。往(wang)預(yu)先(xian)包被對稱(cheng)性(xing)蛋白激酶(mei)A(PKA)抗體的(de)包被微孔中，依(yi)次加入標本、標(biao)準(zhun)品、HRP標記的(de)檢測(ce)抗體，經過(guo)溫育並(bing)洗(xi)滌(di)。用(yong)底(di)物TMB顯色，TMB在(zai)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉化(hua)成藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)轉化(hua)成終(zhong)的(de)黃(huang)色。顏色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣品中的(de)對稱(cheng)性(xing)蛋白激酶(mei)A(PKA)呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標儀在(zai)450nm 波(bo)長下(xia)測定(ding)吸光度(du)(OD值)，計(ji)算樣品濃度(du)。

　　大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A試(shi)劑(ji)盒操作(zuo)：

　　大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A試(shi)劑(ji)盒使用，將(jiang)所有試(shi)劑(ji)充分(fen)混(hun)勻。不(bu)要使液體產生(sheng)大(da)量的(de)泡(pao)沫，以(yi)免加(jia)樣時(shi)加入大(da)量的(de)氣(qi)泡，產生加(jia)樣上的(de)誤(wu)差。根(gen)據待測(ce)樣品數(shu)量加上(shang)標(biao)準品的(de)數(shu)量決定(ding)所需的(de)板(ban)條(tiao)數(shu)。每個標(biao)準品和(he)空(kong)白孔(kong)建議(yi)做復(fu)孔。每個樣品根(gen)據自(zi)己的(de)數(shu)量來定(ding)，能使用復(fu)孔的(de)盡(jin)量做復(fu)孔。

　　標(biao)本用(yong)標(biao)本稀(xi)釋(shi)液1：1稀(xi)釋(shi)後(hou)加(jia)入50ul於反應孔(kong)內。加(jia)入稀釋(shi)好後(hou)的(de)標(biao)準品50ul於反(fan)應孔、加入待測(ce)樣品50ul於反(fan)應孔內。立即加(jia)入50ul的(de)生(sheng)物素標記的(de)抗體。蓋上(shang)膜板(ban)，輕輕(qing)振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫育1小時(shi)。甩去孔(kong)內液體，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液，振蕩(dang)30，甩去洗(xi)滌(di)液，用(yong)吸水紙(zhi)拍幹。重復(fu)此(ci)操作(zuo)3次。如果(guo)用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數(shu)增(zeng)加壹次。每孔加(jia)入80ul的(de)親(qin)和(he)鏈酶(mei)素-HRP，輕(qing)輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔(kong)內液體，每孔加(jia)滿洗(xi)滌(di)液，振蕩(dang)30，甩去洗(xi)滌(di)液，用(yong)吸水紙(zhi)拍幹。重復(fu)此(ci)操作(zuo)3次。如果(guo)用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數(shu)增(zeng)加壹次。每孔加(jia)入底(di)物A、B各50ul，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫育10分鐘。避免(mian)光照(zhao)。取出(chu)酶(mei)標板(ban)，迅(xun)速加(jia)入50ul終(zhong)止液，加(jia)入終(zhong)止液後(hou)應立即測(ce)定(ding)結果(guo)。在(zai)450nm波(bo)長處(chu)測(ce)定(ding)各孔(kong)的(de)OD值。局(ju)限(xian)6號(hao)標(biao)準(zhun)品以(yi)上的(de)結(jie)果為非線(xian)性(xing)的(de)，根(gen)據此(ci)標準(zhun)曲(qu)線(xian)無法(fa)得到的(de)結(jie)果。

　　大(da)鼠(shu)蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A試(shi)劑(ji)盒：

　　1、靈(ling)敏(min)度(du)：小(xiao)的(de)檢測(ce)濃(nong)度(du)小(xiao)於1號標準(zhun)品。稀釋(shi)度(du)的(de)線(xian)性(xing)。樣品線(xian)性(xing)回歸與(yu)預(yu)期濃度(du)相關(guan)系數(shu)R值為1.0 U/L。

　　2、特異性(xing)：不與(yu)其它(ta)細胞因子反(fan)應(ying)。

　　3、重復(fu)性(xing)：板(ban)內、板(ban)間變(bian)異系數(shu)均小於(yu)10%。

　　ELISA試(shi)劑(ji)盒 本生(sheng)壹直視(shi)質(zhi)量控制(zhi)為企業(ye)的(de)生(sheng)命(ming)，追求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭力的(de)不(bu)斷提(ti)升(sheng)。公司在(zai)經(jing)營中始終(zhong)秉(bing)承：遵紀(ji)守(shou)法，嚴(yan)於(yu)律(lv)己，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待，敢(gan)於承擔的(de)企(qi)業精神作(zuo)為標準(zhun)，以(yi)過(guo)硬(ying)的(de)質(zhi)量和(he)優良(liang)的(de)服(fu)務來維護(hu)和(he)拓展(zhan)市場(chang)，較(jiao)大(da)限(xian)度(du)的(de)滿(man)足(zu)客(ke)戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共(gong)贏(ying)，是(shi)我(wo)們(men)的(de)發展目(mu)標(biao)。本生(sheng)!您(nin)信任的(de)合(he)作(zuo)夥(huo)伴(ban)。我(wo)們(men)願與(yu)您(nin)真(zhen)誠合作(zuo)，共(gong)創(chuang)美(mei)好的(de)未(wei)來。

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