如(ru)何(he)正(zheng)確(que)使(shi)用(yong)ELISA板進行(xing)實(shi)驗(yan)?

　　以(yi)下(xia)是(shi)ELISA板正(zheng)確(que)使(shi)用(yong)的實(shi)驗(yan)指南，本生(sheng)結合(he)關(guan)鍵(jian)操作要(yao)點和(he)常(chang)見(jian)問題解決(jue)方(fang)案(an)：

　　壹(yi)、實(shi)驗(yan)前準(zhun)備(bei)

　　板選(xuan)擇與(yu)處(chu)理(li)‌

　　優先選(xuan)用(yong)聚苯(ben)乙(yi)烯材質96孔板(吸(xi)附性能均(jun)衡)，新(xin)板需(xu)用(yong)去離子水沖(chong)洗去除雜質‌

　　包前用(yong)碳酸鹽(yan)緩沖(chong)液(ye)(pH 9.6)平衡，避免溫(wen)差(cha)導致板變(bian)形

　　試劑(ji)配制(zhi)‌

　　標(biao)準(zhun)品需(xu)現(xian)配現(xian)用(yong)，凍存樣本避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)(建(jian)議分裝(zhuang)保(bao)存)

　　封閉液(ye)推薦(jian)5% BSA-PBST(含(han)0.05%吐(tu)溫(wen)20)，37℃預溫(wen)30分鐘

　　二(er)、核心(xin)操作步驟

　　包被與封閉‌

　　抗原/抗體包(bao)被濃度1-10 μg/mL，100μL/孔，4℃過(guo)夜或37℃ 2小(xiao)時‌

　　封閉液(ye)需(xu)覆蓋孔(kong)底，37℃孵(fu)育(yu)1小(xiao)時，拍(pai)幹時(shi)避免殘(can)留(liu)液(ye)體(ti)

　　加(jia)樣(yang)與(yu)孵(fu)育(yu)‌

　　樣(yang)本與(yu)標(biao)準(zhun)品同(tong)步加樣，避免邊緣(yuan)效(xiao)應(ying)(邊(bian)緣(yuan)孔(kong)可(ke)加PBS緩沖(chong))

　　37℃孵(fu)育(yu)時(shi)用(yong)保鮮(xian)膜(mo)封板，每(mei)10分鐘輕震(zhen)混勻壹(yi)次(ci)

　　三、關鍵(jian)質控點

　　洗滌(di)規範(fan)‌

　　手(shou)工(gong)洗板需(xu)拍(pai)幹後(hou)立即(ji)加(jia)洗滌(di)液(ye)，機器洗板需(xu)檢查(zha)針(zhen)頭(tou)通(tong)暢性(xing)

　　洗滌(di)次(ci)數(shu)3-5次(ci)，最(zui)後(hou)壹(yi)次(ci)拍(pai)幹後(hou)30秒內加下(xia)壹試劑(ji)

　　顯(xian)色控制‌

　　TMB避(bi)光孵(fu)育(yu)時(shi)間需(xu)預實驗(yan)確(que)定(ding)(通(tong)常10-20分鐘)

　　終(zhong)止液(ye)加(jia)入後15分鐘內讀數，雙(shuang)波長檢測(ce)(450/630nm)

　　四(si)、常見(jian)問題處(chu)理(li)

　　高(gao)背景‌：增加洗滌(di)次(ci)數(shu)至(zhi)5次(ci)，或更換封閉液(ye)為5%脫脂(zhi)奶粉‌

　　板間差(cha)異‌：同(tong)壹實(shi)驗(yan)使用(yong)同(tong)壹批(pi)次(ci)板，加(jia)樣(yang)時(shi)使用(yong)多(duo)通(tong)道移(yi)液(ye)器(qi)

　　註：具(ju)體(ti)參(can)數(shu)需(xu)根據(ju)試(shi)劑(ji)盒(he)說明(ming)書(shu)調整，建(jian)議每(mei)板設(she)置陰陽(yang)性對(dui)照(zhao)及(ji)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(R²>0.99)。

　　註：以(yi)上僅(jin)供參(can)考，不(bu)作為實際(ji)數據(ju)，實(shi)驗(yan)需(xu)嚴格遵(zun)循(xun)說明(ming)或咨(zi)詢(xun)技(ji)術老師。

　　天津(jin)本生(sheng)壹直(zhi)視質量控制為企業(ye)的生(sheng)命，追(zhui)求(qiu)企(qi)業競爭力的(de)不(bu)斷(duan)提(ti)升(sheng)。公(gong)司(si)在(zai)經(jing)營中(zhong)始終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀守(shou)法(fa)，嚴(yan)於(yu)律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁以(yi)待(dai)，敢於(yu)承(cheng)擔的企業(ye)精(jing)神(shen)作為標(biao)準(zhun)，以(yi)過(guo)硬的質量和(he)優良的(de)服務來(lai)維(wei)護(hu)和(he)拓展市(shi)場(chang)，較大(da)限度的(de)滿(man)足客戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客戶(hu)的(de)共(gong)贏，是(shi)我們(men)的發(fa)展(zhan)目標(biao)，本生(sheng)，您(nin)信任(ren)的(de)合(he)作夥(huo)伴!