多克隆(long)抗體(ti)制(zhi)備(bei)流(liu)程詳解

　　抗(kang)血清(qing)，通(tong)常(chang)指人(ren)工被動(dong)免疫後所(suo)制(zhi)成(cheng)的(de)多克隆(long)抗體(ti)，它(ta)是免疫化(hua)學(xue)的(de)主要(yao)內(nei)容。抗(kang)血清(qing)也成(cheng)為(wei)免疫血清(qing)，主要(yao)有免疫原(yuan)的(de)制(zhi)備(bei)、動(dong)物(wu)免疫、放血、抗血清(qing)的(de)分離(li)、抗血清(qing)的(de)分析(xi)和(he)鑒(jian)定。

　　壹、免疫原(yuan)的(de)制(zhi)備(bei)

　　免疫原(yuan)，是人工(gong)將(jiang)抗原(yuan)制(zhi)成(cheng)能刺激(ji)機體引起體(ti)液或(huo)細(xi)胞(bao)免疫的(de)反應物(wu)質(zhi)。免疫原(yuan)由質(zhi)量好的(de)抗原(yuan)和(he)佐劑(ji)制(zhi)成(cheng)。常(chang)用(yong)佐劑(ji)弗氏不(bu)佐劑(ji)、弗氏佐劑(ji)。

　　二、動(dong)物(wu)免疫

　　常(chang)用(yong)於(yu)動(dong)物(wu)免疫的(de)動(dong)物(wu)有家兔、羊，豚(tun)鼠(shu)等，其(qi)中(zhong)家(jia)兔(tu)對(dui)抗原(yuan)的(de)免疫反應性好(hao)、個(ge)體大小(xiao)合(he)適等(deng)優(you)點使用(yong)最(zui)多，兔的(de)IGG不(bu)分亞(ya)類(lei)，實(shi)驗中(zhong)易(yi)於(yu)管理(li)。用(yong)於(yu)免疫的(de)動(dong)物(wu)要(yao)求適(shi)齡、健(jian)壯、無感染(ran)性疾(ji)病(bing)，雄(xiong)性最(zui)好(hao)。

　　免疫部(bu)位(wei)：多采用(yong)腳(jiao)掌(zhang)、腹(fu)股溝淋(lin)巴(ba)結、大腿(tui)肌(ji)肉(rou)、皮(pi)下等(deng)，采用(yong)多部(bu)位(wei)配(pei)合(he)免疫效果(guo)好。

　　免疫劑量根(gen)據(ju)免疫動(dong)物(wu)、抗(kang)原(yuan)分子大小(xiao)，免疫方(fang)案不(bu)同(tong)有較(jiao)大的(de)區別。根(gen)據(ju)抗(kang)原(yuan)量不(bu)同(tong)，可(ke)分為微(wei)量，常(chang)量及(ji)大量免疫法(fa)。微(wei)量免疫抗原(yuan)在微(wei)克(ke)級別;常(chang)量免疫抗原(yuan)量在1-10mg左(zuo)右(you);大量免疫抗原(yuan)免疫劑量在50-100mg;小(xiao)鼠在微(wei)克(ke)級別，兔子在1毫克(ke)到(dao)幾(ji)毫克(ke)間(jian)。

　　三、微(wei)量采血、效價(jia)檢測

　　免疫動(dong)物(wu)最(zui)好(hao)先(xian)用(yong)5-10mg的(de)卡介苗刺激(ji)動(dong)物(wu)，激(ji)發(fa)免疫系統(tong)，通(tong)常(chang)稱為基(ji)礎免疫，7-10天可(ke)起到(dao)作用(yong)。接(jie)著註(zhu)射(she)第壹針(zhen)，產生初次(ci)抗體(ti)，IgM型抗(kang)體(ti)較(jiao)多;2-4周註(zhu)射(she)第二針(zhen)，免疫3-5次(ci)後微(wei)量采血檢測效價(jia)，微(wei)量采血再免疫後7-10天(tian)采集(ji)。兔(tu)子(zi)采用(yong)耳(er)緣靜(jing)脈或(huo)動(dong)脈，羊可(ke)耳(er)緣靜(jing)脈也可(ke)頸(jing)靜(jing)脈采血。

　　兔子(zi)采血：冬季(ji)血液流(liu)動(dong)緩慢(man)，用(yong)雙手(shou)揉(rou)搓(cuo)兔(tu)子(zi)耳(er)朵，待(dai)耳(er)中(zhong)間(jian)動(dong)脈血管鼓(gu)起，用(yong)針(zhen)頭輕(qing)輕(qing)刺(ci)破動(dong)脈(註(zhu)意(yi)，不(bu)要(yao)擦拭(shi)酒精或(huo)其(qi)他液體(ti))，這時血液呈(cheng)滴狀(zhuang)流(liu)出(chu)，用(yong)EP管接(jie)住(zhu)即可(ke)。夏(xia)季(ji)由於(yu)血液流(liu)動(dong)活躍，可(ke)采用(yong)靜(jing)脈取血。

　　羊：用(yong)剪(jian)刀(dao)或者(zhe)電(dian)動(dong)推子將(jiang)耳(er)朵上(shang)的(de)毛剃光，揉(rou)搓(cuo)耳(er)朵，待(dai)血管鼓(gu)起，用(yong)註(zhu)射(she)器(qi)抽(chou)取。

　　檢測效價(jia)的(de)方(fang)法(fa)：簡(jian)潔ELISA、免疫擴散(san)、單(dan)向擴散(san)。或者(zhe)根(gen)據(ju)制(zhi)備(bei)抗(kang)體(ti)的(de)目的(de)選(xuan)擇(ze)其(qi)他(ta)檢測、分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)。

　　四(si)、免疫血清(qing)的(de)采集(ji)

　　微(wei)量采血檢測達到(dao)預(yu)期(qi)目的(de)後，壹(yi)次(ci)性放血處(chu)死(si)。

　　兔(tu)子(zi)、豚(tun)鼠(shu)采用(yong)心臟(zang)采血、羊采用(yong)靜(jing)脈放血處(chu)死(si)。

　　豚(tun)鼠(shu)采血5-10ml'，兔子(zi)100ml左(zuo)右(you)，羊，2500ml左(zuo)右(you)。小鼠(shu)用(yong)摘(zhai)取眼球(qiu)放血。

　　五、保(bao)存與(yu)應用(yong)‌

　　‌短(duan)期(qi)保(bao)存(cun)‌：4℃加0.02%NaN₃防(fang)腐(1-6個月(yue))‌。

　　‌長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)‌：分裝(zhuang)後-20℃或(huo)-80℃凍(dong)存，避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融‌。

　　‌應用(yong)場(chang)景‌：Western Blot、免疫組(zu)化(hua)等(deng)需高(gao)靈敏度實(shi)驗，但(dan)需驗證(zheng)特異(yi)性‌

　　註(zhu)：僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)，以上(shang)資(zi)料供參考，如(ru)需具體(ti)產品說(shuo)明請咨詢(xun)技術老(lao)師(shi)或品(pin)牌供應商。

　　多克隆(long)抗體(ti)  天(tian)津(jin)本(ben)生(sheng)壹直(zhi)視(shi)質(zhi)量控制(zhi)為企(qi)業(ye)的(de)生命，追(zhui)求企(qi)業(ye)競(jing)爭力的(de)不(bu)斷(duan)提升。公(gong)司(si)在經營中(zhong)始終秉(bing)承：遵紀(ji)守法(fa)，嚴(yan)於(yu)律(lv)己(ji)，寬仁以待(dai)，敢(gan)於(yu)承擔(dan)的(de)企業精(jing)神作(zuo)為(wei)標(biao)準(zhun)，以過(guo)硬的(de)質(zhi)量和(he)優(you)良(liang)的(de)服務來(lai)維護(hu)和(he)拓展市(shi)場(chang)，較(jiao)大限(xian)度(du)的(de)滿(man)足客戶的(de)需求。與(yu)客戶的(de)共(gong)贏，是我們的(de)發(fa)展目標(biao)。本(ben)生(sheng)!您(nin)信(xin)任的(de)合(he)作夥(huo)伴(ban)。我們願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠合(he)作，共(gong)創美(mei)好(hao)的(de)未來。本(ben)生(sheng)試劑(ji)盒