ELISA實驗原(yuan)理

　　ELISA(酶(mei)聯(lian)免疫吸(xi)附(fu)試(shi)驗)是壹(yi)種基(ji)於(yu)抗原(yuan)-抗體特異性(xing)結(jie)合的(de)免疫檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)，通(tong)過酶(mei)催(cui)化(hua)底(di)物(wu)顯色實現定性或(huo)定量分(fen)析‌。其核心(xin)原(yuan)理包(bao)括：

　　固相包(bao)被(bei)‌：抗原(yuan)或抗(kang)體通過(guo)物(wu)理吸(xi)附(fu)固(gu)定在(zai)微(wei)孔(kong)板(ban)表(biao)面(mian)‌。

　　免疫反(fan)應‌：待測(ce)樣本與包(bao)被(bei)物結(jie)合，形成抗(kang)原(yuan)-抗體復合(he)物(wu)‌。

　　信號放(fang)大‌：酶(mei)標記(ji)的(de)二(er)抗(kang)或底(di)物(wu)催(cui)化(hua)顯色，通過酶(mei)標儀(yi)讀(du)取吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)‌。

　　主(zhu)要(yao)ELISA類型(xing)及適(shi)用場(chang)景(jing)

　　類型(xing)‌ ‌          原(yuan)理特點‌                                   典(dian)型(xing)應用‌

　　直(zhi)接(jie)ELISA‌  抗原(yuan)直接(jie)包(bao)被(bei)，酶標(biao)壹(yi)抗檢(jian)測(ce)    病(bing)毒顆粒、純化蛋白定量‌

　　間接ELISA‌  酶標二(er)抗(kang)放(fang)大信(xin)號，靈(ling)敏度(du)高(gao)    抗(kang)體檢(jian)測(ce)(如(ru)HIV、新冠IgG/IgM)‌

　　夾(jia)心(xin)ELISA‌  雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心(xin)結(jie)構，特異性(xing)強(qiang)       胞因子(IL-6)、腫(zhong)瘤(liu)標(biao)誌(zhi)物(wu)(CEA)‌

　　競爭ELISA‌  標記(ji)抗(kang)原(yuan)與樣本抗原(yuan)競爭結合抗體 小(xiao)分(fen)子檢(jian)測(ce)(激(ji)素、藥(yao)物(wu))‌

　　關(guan)鍵(jian)試劑(ji)與(yu)儀(yi)器

　　試(shi)劑(ji)‌：

　　包(bao)被(bei)緩(huan)沖(chong)液‌(如(ru)碳酸鹽緩(huan)沖(chong)液)‌

　　酶(mei)標抗(kang)體‌(HRP或AP標(biao)記(ji))‌

　　顯色底物‌(TMB或(huo)OPD)‌

　　終止液‌(如(ru)硫酸(suan))‌

　　儀(yi)器‌：

　　酶(mei)標(biao)儀(yi)(檢(jian)測(ce)吸(xi)光(guang)度(du))‌

　　移液器(精(jing)確(que)加樣)‌

　　洗板(ban)機(ji)(去(qu)除(chu)未(wei)結(jie)合(he)物(wu))‌

　　操作步驟(以夾(jia)心(xin)ELISA為例)

　　包(bao)被(bei)‌：捕(bu)獲抗(kang)體固定於(yu)微(wei)孔(kong)板(ban)，4℃過(guo)夜(ye)‌。

　　封(feng)閉‌：加入BSA或(huo)脫(tuo)脂(zhi)牛(niu)奶(nai)封(feng)閉非(fei)特異性(xing)位點‌。

　　孵(fu)育‌：加入樣本和(he)檢(jian)測(ce)抗(kang)體，37℃孵育(yu)1小(xiao)時(shi)‌。

　　顯色‌：加入TMB底(di)物(wu)，避(bi)光(guang)反應15分鐘‌。

　　終止‌：加入終(zhong)止液，酶(mei)標儀(yi)讀(du)取450nm吸(xi)光(guang)度(du)‌。

　　註意(yi)事項

　　樣本處理(li)‌：避(bi)免反復(fu)凍融(rong)，離(li)心(xin)去(qu)除(chu)顆粒物(wu)‌。

　　洗(xi)滌(di)‌：每(mei)次(ci)孵(fu)育(yu)後(hou)需洗(xi)滌(di)，減少(shao)背(bei)景信(xin)號(hao)‌。

　　標準曲(qu)線(xian)‌：需(xu)設(she)置(zhi)梯度(du)濃度標準品(pin)，確(que)保(bao)線(xian)性(xing)範(fan)圍(wei)‌。

　　註：以(yi)上(shang)資料僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體產品(pin)信(xin)息(xi)請(qing)咨詢技術(shu)老(lao)師或品(pin)牌(pai)供應商。

　　ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) 本(ben)生(sheng)壹(yi)直視(shi)質(zhi)量(liang)控制為企業的(de)生(sheng)命，追求(qiu)企業競爭力(li)的(de)不斷(duan)提升(sheng)。公(gong)司在(zai)經營(ying)中始(shi)終(zhong)秉(bing)承(cheng)：遵紀(ji)守(shou)法(fa)，嚴(yan)於(yu)律己(ji)，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待(dai)，敢(gan)於(yu)承(cheng)擔(dan)的(de)企業精(jing)神(shen)作為標準，以(yi)過(guo)硬的(de)質(zhi)量和(he)優(you)良的(de)服務(wu)來維(wei)護和(he)拓展(zhan)市(shi)場(chang)，較(jiao)大限(xian)度的(de)滿足客(ke)戶的(de)需(xu)求(qiu)。與客(ke)戶的(de)共(gong)贏(ying)，是我們(men)的(de)發(fa)展目標(biao)，本(ben)生，您信(xin)任的(de)合(he)作夥(huo)伴(ban)!