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如(ru)何(he)正確使(shi)用Roche 480配套PCR板(ban)?避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染與(yu)信(xin)號(hao)幹(gan)擾(rao)的(de)實(shi)操指(zhi)南(nan)
以下是(shi)天(tian)津本生使(shi)用Roche 480配套PCR板(ban)時(shi)避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙染與(yu)信(xin)號(hao)幹(gan)擾(rao)的(de)詳細操作(zuo)指(zhi)南(nan):
壹(yi)、實(shi)驗(yan)前準(zhun)備(bei)
耗(hao)材選(xuan)擇
必(bi)須(xu)使(shi)用與(yu)LightCycler® 480匹(pi)配(pei)的(de)96孔(kong)PCR板(推(tui)薦半(ban)裙邊白色(se)板(ban))。
選(xuan)擇專(zhuan)用光學(xue)封板膜,確保(bao)密(mi)封性(xing)並減少(shao)熒光(guang)背(bei)景(jing)幹(gan)擾(rao)。
滅菌(jun)處(chu)理(li)
新(xin)開(kai)封的(de)PCR板(ban)需(xu)紫(zi)外線(xian)照(zhao)射15分(fen)鐘(zhong)或高(gao)壓滅菌(jun)(若(ruo)材料允(yun)許)。
操作(zuo)臺(tai)和(he)移液(ye)器需(xu)用75%乙醇擦拭(shi)消(xiao)毒。

二(er)、反(fan)應(ying)體系(xi)配置
加(jia)樣規範
反(fan)應(ying)液(ye)需(xu)在(zai)冰上(shang)配(pei)制,避(bi)免(mian)高(gao)溫(wen)降(jiang)解(jie)。
每(mei)孔體積(ji)嚴格控制(zhi)在(zai)20μL(誤(wu)差(cha)<1μL),使(shi)用低吸附(fu)吸(xi)頭分(fen)裝。
防(fang)汙染措(cuo)施
分(fen)區(qu)操作(zuo):核(he)酸(suan)提(ti)取、體系(xi)配制、PCR擴增(zeng)需(xu)在(zai)不(bu)同(tong)超(chao)凈臺(tai)進(jin)行。
每(mei)加(jia)樣壹(yi)次更(geng)換(huan)吸頭(tou),避(bi)免(mian)氣(qi)溶(rong)膠汙染。
三、封板與(yu)離(li)心(xin)
密(mi)封操作(zuo)
封膜時需(xu)覆(fu)蓋孔口(kou),輕壓邊緣排除(chu)氣(qi)泡。
禁止(zhi)使(shi)用記號(hao)筆(bi)在(zai)板或膜上標(biao)記(可能幹(gan)擾(rao)熒光(guang)信(xin)號(hao))。
離(li)心(xin)參(can)數(shu)
2000 rpm離(li)心(xin)30秒(miao),確保(bao)液(ye)體集(ji)中至孔底。
四、儀器(qi)操作(zuo)
裝板註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
確認(ren)板底清(qing)潔(jie)幹(gan)燥(zao),避(bi)免(mian)指(zhi)紋或灰(hui)塵影響光學檢測。
放(fang)入(ru)儀(yi)器時對準托(tuo)架(jia)卡槽(cao),避(bi)免(mian)傾(qing)斜(xie)。
程(cheng)序設置
熱蓋溫(wen)度(du)設(she)為(wei)105°C,防(fang)止(zhi)蒸(zheng)發。
熒光(guang)采(cai)集(ji)通道需(xu)與(yu)染料匹(pi)配(pei)(如(ru)FAM通道用於(yu)SYBR Green)。
五、實(shi)驗(yan)後(hou)處(chu)理(li)
數(shu)據(ju)保(bao)存(cun)
使(shi)用光盤(pan)刻(ke)錄(lu)原(yuan)始(shi)數據,避(bi)免(mian)U盤(pan)傳(chuan)輸(shu)導(dao)致(zhi)文件損壞。
耗(hao)材廢(fei)棄
PCR板為壹(yi)次性(xing)使(shi)用,禁止(zhi)剪(jian)開(kai)重(zhong)復利(li)用。
實(shi)驗(yan)結(jie)束(shu)後立(li)即帶(dai)離(li)實(shi)驗(yan)室,按生物(wu)危害廢(fei)物處(chu)理(li)。
關(guan)鍵問(wen)題規避(bi)
交叉(cha)汙染:
操作(zuo)全(quan)程(cheng)佩(pei)戴(dai)無(wu)粉(fen)手套;
每(mei)批次實(shi)驗(yan)預(yu)留至少2孔陰(yin)性(xing)對照(zhao)。
信(xin)號(hao)幹(gan)擾(rao):
白色(se)PCR板(ban)可減少(shao)背(bei)景(jing)熒光(guang);
避(bi)免(mian)強(qiang)光(guang)直(zhi)射反(fan)應(ying)板(ban)。
通過(guo)規範操作(zuo)流(liu)程(cheng)和(he)嚴格分(fen)區(qu)管理(li),可顯著(zhu)提升實(shi)驗(yan)結(jie)果可靠(kao)性(xing)。
109611 C0.1ml 無(wu)裙邊96孔PCR板(ban) 透(tou)明(ming)10塊(kuai)/盒,20盒/箱(xiang)
109611M 0.1ml 無(wu)裙邊96孔PCR板(ban) 乳(ru)白10塊/盒,20盒/箱(xiang)
209601C 0.2ml 無(wu)裙邊96孔PCR板(ban) 透(tou)明(ming)10塊(kuai)/盒,20盒/箱(xiang)
209621C 0.2ml 半裙邊96孔PCR板(ban) 透(tou)明(ming)10塊(kuai)/盒,20盒/箱(xiang)
104801M Roche480專(zhuan)用96孔PCR板(ban) 乳(ru)白10塊/盒,20盒/箱(xiang)
註(zhu):以上(shang)資料僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),具體(ti)請咨詢技術(shu)老師。
天(tian)津本生壹(yi)直(zhi)視質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)為(wei)企業(ye)的(de)生(sheng)命(ming),追(zhui)求(qiu)企業(ye)競爭力的(de)不(bu)斷(duan)提升。公司在(zai)經營(ying)中始(shi)終秉承(cheng):遵(zun)紀守(shou)法,嚴於(yu)律(lv)己,寬(kuan)仁(ren)以(yi)待,敢於(yu)承擔(dan)的(de)企業(ye)精神(shen)作(zuo)為(wei)標(biao)準,以(yi)過(guo)硬的(de)質(zhi)量(liang)和(he)優(you)良(liang)的(de)服務(wu)來(lai)維(wei)護(hu)和(he)拓(tuo)展(zhan)市(shi)場(chang),較大(da)限(xian)度(du)的(de)滿足客(ke)戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共(gong)贏,是(shi)我們的(de)發展目(mu)標(biao)。本生!您(nin)信(xin)任的(de)合(he)作(zuo)夥伴(ban)。我們願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠合(he)作(zuo),共(gong)創(chuang)美好(hao)的(de)未來(lai)。
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