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ELISA實驗(yan)中(zhong)洗(xi)滌(di)步驟的常見(jian)錯誤(wu)有(you)哪些?
以下是天津(jin)本(ben)生對ELISA實驗(yan)中(zhong)洗(xi)滌(di)步驟的常見(jian)錯誤(wu)及(ji)對應的解決方案,綜(zong)合實驗(yan)關(guan)鍵環(huan)節與(yu)優(you)化(hua)建議:
壹(yi)、洗(xi)滌(di)液(ye)配(pei)置(zhi)與(yu)使(shi)用錯誤(wu)
緩(huan)沖(chong)液(ye)選擇(ze)不(bu)當
錯誤(wu):直(zhi)接(jie)使用純PBS(不(bu)含(han)Tween-20)洗滌(di),導致(zhi)非(fei)特異(yi)性結合殘留(liu)。
解決:需(xu)使用含(han)0.05%-0.2% Tween-20的PBST緩沖液(ye),降低(di)表面張力增(zeng)強洗(xi)滌(di)效果。
洗液(ye)溫(wen)度過(guo)低(di)
錯誤(wu):冬(dong)季未預熱(re)洗(xi)液(ye),導致(zhi)洗(xi)滌(di)不(bu)(“花(hua)板(ban)"現(xian)象(xiang))。
解決:洗(xi)液(ye)溫(wen)度應維(wei)持在(zai)20-30℃,避(bi)免低(di)溫(wen)影(ying)響去汙效果。
二、手(shou)工(gong)操(cao)作失誤(wu)
洗(xi)滌(di)不(bu)凈
錯誤(wu):洗(xi)液(ye)未註(zhu)滿孔(kong)或(huo)靜置(zhi)時間不(bu)足(<1分(fen)鐘(zhong)),殘留(liu)未結合物質(zhi)。
解決:每(mei)孔(kong)註(zhu)滿洗液(ye)後靜置(zhi)1-2分(fen)鐘(zhong),重(zhong)復3-5次(ci),拍板時垂(chui)直(zhi)扣(kou)幹(gan)。
拍板動(dong)作(zuo)不(bu)規範
錯誤(wu):左(zuo)右(you)甩動(dong)板(ban)子導(dao)致(zhi)孔(kong)間交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。
解決:垂(chui)直(zhi)扣(kou)板(ban)於吸(xi)水紙(zhi)上(shang),避(bi)免液(ye)體飛(fei)濺(jian)。
三、洗板(ban)機操(cao)作問題
參數設置(zhi)錯誤(wu)
錯誤(wu):吸(xi)液(ye)殘留(liu)量(liang)>2μL或(huo)吸(xi)頭(tou)高(gao)度不(bu)當,導(dao)致(zhi)液(ye)體殘(can)留。
解(jie)決:調整(zheng)吸(xi)頭(tou)距(ju)孔(kong)底0.5-1mm,每(mei)日校(xiao)準(zhun)註(zhu)液(ye)量(liang)。
維護不(bu)足
錯誤(wu):未定(ding)期清潔(jie)吸(xi)頭(tou),造(zao)成(cheng)堵(du)塞(sai)或(huo)汙染。
解決:每(mei)周用10%次(ci)氯(lv)酸鈉(na)沖洗(xi)管(guan)路,更(geng)換堵塞吸(xi)頭(tou)。
四、其他常見(jian)錯誤(wu)
錯誤(wu)類型(xing) 後果 解決方案
洗(xi)滌(di)次(ci)數不(bu)足 高(gao)背景信(xin)號(hao)(假(jia)陽(yang)性) 增(zeng)加至(zhi)5-6次(ci),最(zui)後壹(yi)次(ci)延長靜(jing)置(zhi)時間
洗液(ye)過期/汙(wu)染 絮(xu)狀物堵(du)塞孔(kong)底 現(xian)配(pei)現(xian)用,過濾混濁(zhuo)洗液(ye)
封(feng)閉後未充(chong)分(fen)洗 非(fei)特異(yi)性吸(xi)附增(zeng)加 封(feng)閉後PBST洗滌(di)3次(ci),去除BSA
五、本生試(shi)劑(ji)盒特別提(ti)示
顯(xian)色(se)前處理(li):最(zui)後壹(yi)次(ci)洗滌(di)後需拍幹,避(bi)免殘(can)留(liu)液(ye)體稀釋底(di)物導(dao)致(zhi)顯(xian)色(se)異(yi)常。
邊(bian)緣效應:外圈孔(kong)易殘(can)留液(ye)體,建議棄(qi)用或(huo)單(dan)獨處理(li)。
通過規(gui)範操(cao)作可(ke)減少(shao)80%的洗滌(di)相關(guan)誤差。若(ruo)問題持續(xu),建議聯系(xi)技術(shu)支(zhi)持獲(huo)取(qu)定(ding)制化(hua)方案。
註(zhu):以上資(zi)料僅(jin)供參考(kao),如需更(geng)詳(xiang)細(xi)說(shuo)明(ming),可(ke)參考具(ju)體(ti)品(pin)牌商附帶(dai)產(chan)品(pin)信(xin)息(xi)。
天津(jin)本(ben)生壹(yi)直(zhi)視質量(liang)控(kong)制為(wei)企業(ye)的生命(ming),追(zhui)求(qiu)企業(ye)競爭(zheng)力(li)的不(bu)斷提(ti)升。公司(si)在(zai)經營(ying)中(zhong)始終(zhong)秉(bing)承:遵(zun)紀(ji)守法,嚴(yan)於(yu)律(lv)己,寬(kuan)仁(ren)以待,敢於承擔的企業(ye)精(jing)神(shen)作為(wei)標準(zhun),以過硬的質量(liang)和優(you)良的服務來(lai)維(wei)護和拓展(zhan)市(shi)場,較大(da)限(xian)度(du)的滿足客戶(hu)的需求(qiu)。與客戶(hu)的共(gong)贏(ying),是我(wo)們的發展(zhan)目(mu)標。本(ben)生!您(nin)信(xin)任的合作夥(huo)伴。我們(men)願與您(nin)真誠(cheng)合作,共(gong)創美(mei)好(hao)的未來。移(yi)液(ye)器吸(xi)頭(tou)
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