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酶(mei)標板的(de)選購(gou)及拆(chai)裝(zhuang)酶(mei)標板有(you)哪些(xie)註意(yi)事項(xiang)
BUNSEN教您如(ru)何選購(gou)酶(mei)標板有(you)哪些(xie)註意(yi)事項(xiang):
在(zai)酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(yan)中(zhong), 參(can)與免疫(yi)學(xue)反應的抗原、抗(kang)體(ti)、標記抗體(ti)或抗(kang)原的(de)純度、濃(nong)度(du)和比例;緩(huan)沖(chong)液種類、濃度和(he)離(li)子強(qiang)度、pH值(zhi)和(he)反應溫度、時(shi)間等(deng)條(tiao)件起(qi)著(zhe)關(guan)鍵(jian)作(zuo)用(yong)。此外(wai),作為載體(ti)的固(gu)相聚苯乙烯(xi)表(biao)面對抗原(yuan)、抗(kang)體(ti)或抗(kang)原抗(kang)體(ti)復合物的吸(xi)附也起(qi)著(zhe)重要(yao)作(zuo)用(yong)。
BUNSEN酶(mei)標板壹(yi)般要(yao)比細(xi)胞(bao)培(pei)養板貴(gui),細(xi)胞(bao)板主(zhu)要(yao)做細(xi)胞(bao)培(pei)養,也可(ke)以(yi)用來測蛋(dan)白(bai)濃(nong)度(du);酶(mei)標板包(bao)括(kuo)包(bao)被板和(he)反應板,壹(yi)般不用(yong)做細(xi)胞(bao)培(pei)養,它(ta)主要(yao)做免疫(yi)酶(mei)聯(lian)反應後的蛋(dan)白(bai)檢(jian)測,需要(yao)更(geng)高的要(yao)求(qiu)和(he)特定(ding)的(de)酶(mei)標工作液(ye)。
壹(yi):根(gen)據酶(mei)標板底部的(de)不同,可(ke)以(yi)分(fen)為平底、U型底、V型底
平底的折(zhe)射率(lv)低,適於在(zai)酶(mei)標儀(yi)檢測;U型底的酶(mei)標板折(zhe)射(she)率(lv)較高,方便(bian)加樣(yang)、吸(xi)樣(yang)、混(hun)勻(yun)等操作(zuo),可(ke)以不用(yong)放在(zai)酶(mei)標儀(yi)上(shang),直接(jie)通過目測觀察(cha)顏(yan)色(se)變化情(qing)況,從(cong)而判定(ding)有(you)無(wu)相(xiang)應(ying)的(de)免疫(yi)反應。V底的酶(mei)標板可(ke)以(yi)精確(que)的吸(xi)取(qu)樣(yang)品。

二:根(gen)據(ju)酶(mei)標板與蛋(dan)白(bai)和(he)其(qi)它(ta)分(fen)子結(jie)合能力的(de)不同,分(fen)為高結合力、中(zhong)結(jie)合力和(he)氨基化
高結合力:表(biao)面經處理後(hou),其(qi)蛋(dan)白(bai)結(jie)合能力大(da)大(da)增(zeng)強(qiang),可達(da)300~400ngIgG/cm2,主要(yao)結(jie)合的蛋(dan)白(bai)分(fen)子量(liang)>10kD。使(shi)用該(gai)類酶(mei)標板可(ke)提(ti)高敏感(gan)性,並(bing)可相(xiang)對減少(shao)包(bao)被蛋(dan)白(bai)的(de)濃(nong)度(du)和用量(liang),不足之(zhi)處為較易(yi)產(chan)生非(fei)特異性反應。抗原或抗(kang)體(ti)包被後,以(yi)非(fei)離子去(qu)汙劑(ji)無(wu)法(fa)有(you)效地(di)封(feng)閉(bi)未結(jie)合蛋(dan)白(bai)的(de)部(bu)位(wei),需使(shi)用蛋(dan)白(bai)作(zuo)為封閉(bi)劑(ji)。
中(zhong)結合力:經表(biao)面疏水(shui)鍵被動(dong)與蛋(dan)白(bai)結(jie)合,適合作為分(fen)子量(liang)>20kD的大(da)分(fen)子蛋(dan)白(bai)的(de)固(gu)相載體(ti),其(qi)蛋(dan)白(bai)結(jie)合能力為200~300ng IgG/cm2。由於該(gai)類酶(mei)標板所具有(you)的僅(jin)與大分(fen)子結(jie)合的特性,適用(yong)於作為未純化抗(kang)體(ti)或抗(kang)原的(de)固(gu)相載體(ti),可降(jiang)低潛(qian)在(zai)的(de)非(fei)特異性交(jiao)叉(cha)反應。該(gai)類板可(ke)以(yi)惰(duo)性蛋(dan)白(bai)或(huo)非(fei)離子去(qu)汙劑(ji)作(zuo)為封閉(bi)液。

氨基化:經表(biao)面改(gai)性處(chu)理後(hou)擁有(you)帶正(zheng)電(dian)荷(he)的(de)氨基,其(qi)疏(shu)水(shui)鍵由親(qin)水(shui)鍵取(qu)代。該(gai)類酶(mei)標板適合作為小(xiao)分(fen)子蛋(dan)白(bai)的(de)固(gu)相載體(ti)。使(shi)用合適的(de)緩沖(chong)液和(he)pH值(zhi),其(qi)表(biao)面可通過離(li)子鍵(jian)與帶負(fu)電(dian)荷(he)的(de)小(xiao)分(fen)子結(jie)合。由於其(qi)表(biao)面的親(qin)水(shui)特性和(he)可通過其(qi)它(ta)交(jiao)聯劑(ji)共(gong)價結合的能力,可(ke)用(yong)於固(gu)定(ding)溶於Triton-100、Tween 20等去(qu)汙劑(ji)的(de)蛋(dan)白(bai)分(fen)子。該(gai)類板的(de)缺陷(xian)為由於降低了疏(shu)水(shui)性,壹(yi)部(bu)分(fen)蛋(dan)白(bai)分(fen)子無(wu)法(fa)結(jie)合;此外(wai),其(qi)表(biao)面需有(you)效地(di)封(feng)閉(bi)。由於親(qin)水(shui)和共(gong)價的表(biao)面特性,使(shi)用的(de)封閉液必(bi)須(xu)能(neng)夠(gou)與非(fei)反應性氨基基團和(he)所選擇(ze)的交(jiao)聯劑(ji)中(zhong)任(ren)何功能(neng)基團發(fa)生作用。
三(san):根(gen)據顏色分(fen)為透明(ming)、黑(hei)色、白色
透明(ming)的(de)是常用的(de),用(yong)於最壹(yi)般的酶(mei)聯(lian)免疫(yi)實(shi)驗(yan)。相(xiang)對於透明(ming)的(de)的板子,還有(you)用於發光(guang)檢(jian)測用的(de)不透明(ming)的(de)板子,壹(yi)般有(you)黑色(se)和白色兩(liang)種。黑色(se)的(de)酶(mei)標板自身(shen)會(hui)有(you)光(guang)吸(xi)收(shou),所以(yi)它(ta)的信(xin)號(hao)相對於白色的板子要(yao)低很多(duo),因此壹(yi)般用於檢測較強(qiang)的光(guang),如(ru)熒(ying)光(guang)檢(jian)測。而白色(se)的(de)酶(mei)標板就(jiu)用(yong)於較弱的(de)光(guang)檢(jian)測,常用(yong)於壹(yi)般的化學(xue)發(fa)光(guang)。另外(wai)黑色(se)的(de)酶(mei)標板還可(ke)以消弱非(fei)特異反應帶來的問(wen)題。有(you)些客戶會(hui)問,用(yong)壹(yi)般的酶(mei)標板可(ke)不可(ke)以(yi)進行發光(guang)檢(jian)測,回(hui)答(da)是(shi)不可(ke)以(yi)的,因為壹(yi)般從化學(xue)發(fa)光(guang)反應中發射出(chu)的(de)光(guang)是(shi)各(ge)向同性的(de),也就(jiu)是(shi)說各(ge)個(ge)方向(xiang)上(shang)同等(deng)發(fa)射出來的。如(ru)果用透明(ming)的(de)板子,光(guang)不僅(jin)會(hui)從垂(chui)直(zhi)方(fang)向發(fa)散,還從(cong)水(shui)平方向(xiang)發散出來。很容(rong)易(yi)的(de)就(jiu)會(hui)通過各(ge)個(ge)孔(kong)之間的(de)間隙(xi)和孔(kong)壁(bi)。這(zhe)樣(yang)的話(hua),光(guang)較強(qiang)時(shi)相(xiang)鄰孔(kong)之間的(de)影(ying)響就會(hui)很大,因此不能(neng)用(yong)透明(ming)的(de)酶(mei)標板來進行化學(xue)發(fa)光(guang)實(shi)驗(yan)。

拆(chai)裝(zhuang)酶(mei)標板的(de)註(zhu)意(yi)事項(xiang):
酶(mei)標板在(zai)酶(mei)聯(lian)免疫(yi)吸(xi)附試(shi)驗(yan)中(zhong), 參(can)與免疫(yi)學(xue)反應的抗原、抗(kang)體(ti)、標記抗體(ti)或抗(kang)原的(de)純度、濃(nong)度(du)和比例;緩(huan)沖(chong)液種類、濃度和(he)離(li)子強(qiang)度、pH值(zhi)和(he)反應溫度、時(shi)間等(deng)條(tiao)件起(qi)著(zhe)關(guan)鍵(jian)作(zuo)用(yong)。
抗原、抗體(ti)和其(qi)它(ta)生物分(fen)子通過多(duo)種機制(zhi)吸(xi)附至載體(ti)表(biao)面,這(zhe)包括(kuo)通過疏(shu)水(shui)鍵、流(liu)水(shui)/離子鍵(jian)的被動(dong)吸(xi)附,通過引入其(qi)它(ta)活性基團如(ru)氨基和碳(tan)基的共(gong)價結合,以及通過表(biao)面改(gai)性後(hou)的親(qin)水(shui)鍵結合。
BUNSEN酶(mei)標板的(de)使(shi)用註(zhu)意(yi)事項(xiang):
拍板動(dong)作(zuo)
當需要(yao)拍幹(gan)板內的(de)液(ye)體(ti)時(shi),建議垂(chui)直(zhi)向(xiang)下拍打(da),保(bao)證板內殘留(liu)液體(ti)甩幹(gan)程度(du)的壹(yi)致(zhi)性。
嚴禁斜角拍幹(gan),斜(xie)角拍打(da)的(de)過程(cheng)中會(hui)導致(zhi)上(shang)下板條(tiao)受(shou)力不均(jun),易(yi)出(chu)現板條(tiao)脫落的(de)情(qing)況,且也會(hui)導致(zhi)液(ye)體(ti)甩幹(gan)程度(du)不壹(yi)致(zhi)而影(ying)響實(shi)驗(yan)結(jie)果分(fen)析(xi)。
拆(chai)裝(zhuang)動(dong)作(zuo)
當需要(yao)將(jiang)板條(tiao)拆(chai)下時(shi),可(ke)從板條(tiao)正(zheng)面(mian)兩(liang)端(duan)輕輕向上(shang)掰(bai)動(dong),然(ran)後摳取(qu)下來,務必(bi)要(yao)戴好(hao)無(wu)塵(chen)手(shou)套,以免汙染板條(tiao)而影(ying)響板條(tiao)的(de)透光(guang)性。
不可(ke)從(cong)板條(tiao)的(de)壹(yi)端(duan)強(qiang)行掰(bai)取(qu),容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)板條(tiao)斷(duan)裂(lie)。
在(zai)裝(zhuang)板條(tiao)時(shi),要(yao)註(zhu)意(yi)方向(xiang),板條(tiao)兩(liang)端(duan)分(fen)別設(she)計成(cheng)方(fang)形(xing)和(he)半圓(yuan)形(xing),半(ban)圓(yuan)形(xing)那(na)端必(bi)須(xu)裝(zhuang)在(zai)有(you)凸起(qi)臺階(jie)的(de)卡(ka)槽內(箭(jian)頭所在(zai)處(chu)),切勿(wu)裝反。
將板條(tiao)裝(zhuang)入板框(kuang)後,在(zai)兩(liang)側(ce)和中間部(bu)位(wei)都需要(yao)進行按(an)壓(ya),壓(ya)實(shi)後(hou)方(fang)可(ke)進行後續(xu)實(shi)驗(yan)。
酶(mei)標板 本(ben)生壹(yi)直(zhi)視(shi)質量(liang)控(kong)制(zhi)為企業(ye)的生命,追求(qiu)企業(ye)競(jing)爭力的(de)不斷(duan)提(ti)升(sheng)。公司在(zai)經營中(zhong)始終(zhong)秉(bing)承:遵紀守(shou)法(fa),嚴於律己,寬(kuan)仁以(yi)待(dai),敢於承擔(dan)的(de)企(qi)業(ye)精(jing)神(shen)作為標準,以(yi)過(guo)硬(ying)的(de)質量(liang)和優(you)良(liang)的(de)服務來維護和(he)拓(tuo)展(zhan)市場,較大限(xian)度(du)的滿(man)足客戶的(de)需(xu)求(qiu)。與客戶的(de)共(gong)贏(ying),是(shi)我們(men)的(de)發(fa)展(zhan)目標。本(ben)生!您信(xin)任(ren)的合作夥伴。我們(men)願(yuan)與您真誠合作,共(gong)創(chuang)美(mei)好(hao)的(de)未來。
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