PCR，qPCR，dPCR分(fen)別是(shi)什(shen)麽(me)?有(you)什(shen)麽(me)區(qu)別?

　　PCR，qPCR，dPCR分(fen)別是(shi)什(shen)麽(me)嗎(ma)?這些(xie)東(dong)西(xi)，在(zai)生(sheng)物(wu)行業(ye)裏(li)見(jian)的比(bi)較(jiao)多，我(wo)們(men)生(sheng)物(wu)行業(ye)的從業(ye)人員(yuan)懂(dong)得(de)應該(gai)多(duo)壹些(xie)。PCR技術(shu)，在(zai)二十(shi)世(shi)紀八(ba)十(shi)年代被發(fa)明(ming)。現(xian)在(zai)DNA擴增已(yi)成為(wei)生(sheng)物(wu)學研(yan)究的基(ji)礎。96孔(kong)板供應天(tian)津本生(sheng)告訴(su)大(da)家，在(zai)過去的三十年(nian)中(zhong)，這項經典技術(shu)已得(de)到(dao)不斷改進(jin)，以(yi)解(jie)決(jue)研(yan)究中(zhong)的新問題(ti)和(he)新(xin)需求。從經典PCR，實時(shi)定(ding)量(liang)PCR到(dao)當(dang)前(qian)的數字(zi)PCR，PCR技術(shu)在(zai)不斷變(bian)化，但(dan)從(cong)未消(xiao)失。如今(jin)，PCR技術(shu)已經從(cong)實驗(yan)室(shi)中分(fen)離出(chu)來(lai)，在(zai)遺傳鑒(jian)定(ding)和(he)疾(ji)病診斷(duan)中發(fa)揮了(le)巨(ju)大(da)作(zuo)用，並且(qie)在(zai)日益(yi)廣闊(kuo)的領域中(zhong)具有新的生(sheng)命(ming)力。

　　PCR方法(fa):

　　PCR的原理在(zai)這裏(li)不需要進(jin)壹步解(jie)釋(shi)。多(duo)年來(lai)，研(yan)究人員(yuan)基(ji)於(yu)此(ci)開發了(le)壹系(xi)列衍(yan)生(sheng)技術(shu)。當(dang)前(qian)的PCR方法可(ke)分(fen)為(wei)三類：終(zhong)點PCR，qPCR和dPCR。

　　終(zhong)點PCR:

　　端點PCR是(shi)原始，簡單的PCR方法，並(bing)且(qie)今(jin)天仍然(ran)被(bei)廣泛使(shi)用。 PCR反應完成後，用戶只能通過凝(ning)膠電(dian)泳(yong)，毛細(xi)管(guan)電(dian)泳(yong)等(deng)方(fang)法檢測(ce)產(chan)物(wu)。終(zhong)點PCR本身無(wu)法量(liang)化(hua)，因(yin)為(wei)反應產(chan)生(sheng)的DNA數量(liang)可(ke)能無(wu)法反(fan)映(ying)初始(shi)情(qing)況。例如，不同樣品(pin)和(he)序列之(zhi)間(jian)的擴增效(xiao)率存(cun)在(zai)差(cha)異(yi)。

　　qPCR和dPCR:

　　研(yan)究人員(yuan)已(yi)經通(tong)過兩(liang)種(zhong)方(fang)式(shi)克(ke)服了(le)定(ding)量(liang)PCR分(fen)析的挑戰：實(shi)時(shi)定(ding)量(liang)PCR(qPCR)和(he)數字(zi)PCR(dPCR)。 qPCR主(zhu)要使(shi)用插入(ru)染料(liao)或(huo)熒光探針(zhen)(例(li)如TaqMan)。通過監測(ce)PCR期(qi)間的熒光強度，可以(yi)比(bi)較(jiao)多個樣品(pin)的DNA水平。數字(zi)PCR(dPCR)的基(ji)本工作(zuo)原(yuan)理很簡單。先將(jiang)樣品(pin)分(fen)為(wei)多個PCR反應，每個反應多(duo)包(bao)含壹個模板。然後通過對(dui)陽性(xing)和(he)陰(yin)性(xing)反(fan)應進(jin)行(xing)計(ji)數來(lai)確(que)定(ding)初始(shi)樣品(pin)中(zhong)模板分(fen)子的數量(liang)。

　　盡(jin)管(guan)qPCR和dPCR都能夠定(ding)量(liang)樣品(pin)中(zhong)的核酸，但它們有壹個重要的區別。 qPCR只能實現(xian)相對(dui)定(ding)量(liang)(例(li)如，樣品(pin)A的目標序列是(shi)樣品(pin)B的目標序列的兩倍)，除(chu)非使(shi)用此標準生(sheng)成標準曲線。數字(zi)PCR本身是(shi)絕對(dui)定(ding)量(liang)的，不需要標準曲線。另(ling)壹方(fang)面(mian)，qPCR技術(shu)更加成熟，市場(chang)上(shang)有大(da)量(liang)商(shang)業(ye)產(chan)品(pin)可(ke)供選擇(ze)。 dPCR仍然(ran)是(shi)小的新鮮肉(rou)。它不如qPCR廣泛使(shi)用且價(jia)格(ge)昂(ang)貴。與(yu)dPCR相比(bi)，qPCR更適合(he)於(yu)高通量(liang)分(fen)析，並(bing)且(qie)動態(tai)範(fan)圍(wei)廣。

　　DPCR通(tong)常(chang)更準確(que)。 qPCR可以(yi)輕(qing)松區分(fen)兩倍(bei)的濃度差(cha)異(yi)(例如5個拷貝(bei)和(he)10個拷貝(bei))，但(dan)是(shi)面(mian)對(dui)小的差(cha)異(yi)，它卻較(jiao)弱。 dPCR理論(lun)上(shang)可以(yi)識別相差(cha)少於(yu)20%的拷貝數，例(li)如5和6拷(kao)貝(bei)。該準確(que)度對(dui)於(yu)量(liang)化(hua)涉及染(ran)色體(ti)重排(pai)的基(ji)因(yin)的拷貝數或(huo)量(liang)化(hua)癌癥患(huan)者(zhe)血(xue)液(ye)中(zhong)的循環(huan)生(sheng)物(wu)學指(zhi)標特別(bie)有用。由(you)於(yu)dPCR相當(dang)於(yu)在(zai)反應結(jie)束(shu)時稀(xi)釋(shi)樣品(pin)並(bing)讀取數據，因(yin)此(ci)dPCR比(bi)qPCR對(dui)抑制(zhi)劑(ji)的抵抗力更高。

　　PCR，qPCR，dPCR分(fen)別是(shi)什(shen)麽(me)?有(you)什(shen)麽(me)區(qu)別?本生(sheng)(天(tian)津)健康(kang)科(ke)技有(you)限公(gong)司(si)由(you)具有行業(ye)背(bei)景和(he)豐(feng)富(fu)市場經驗(yan)的業(ye)人士(shi)組成，於(yu)為(wei)生(sheng)命(ming)科(ke)學研(yan)究域(yu)提供產品(pin)，為(wei)廣大(da)科(ke)研(yan)工作(zuo)者(zhe)提供服務。 既能滿足(zu)研(yan)發類(lei)客戶(hu)對(dui)產品(pin)種(zhong)類(lei)、包(bao)裝(zhuang)的特殊(shu)要求，也(ye)能滿足(zu)生(sheng)產(chan)型企(qi)業(ye)從(cong)小(xiao)試(shi)、中(zhong)試到規模化生(sheng)產(chan)各(ge)個階段的綜合需求。本生(sheng)!您(nin)信(xin)任(ren)的合作(zuo)夥(huo)伴。我(wo)們(men)願與您(nin)真誠合(he)作(zuo)，共(gong)創美(mei)好(hao)的未來(lai)。