幹貨(huo)分享：細胞(bao)培養的(de)血(xue)清 血(xue)清解凍滅(mie)活(huo)等(deng)問題

　　細胞(bao)培養基的(de)配(pei)制(zhi)：

　　細胞培養 液(ye)中(zhong)添(tian)加(jia)的(de)血(xue)清有牛血(xue)清、馬血(xue)清、人血(xue)清等，其中牛血(xue)清是zui常用(yong)的血(xue)清，分為胎(tai)牛血(xue)清和新(xin)生(sheng)小(xiao)牛血(xue)清。胎牛血(xue)清是從(cong)母(mu)牛破(po)腹(fu)取出(chu)的(de)胎(tai)牛中(zhong)分(fen)離出(chu)的(de)血(xue)清，價格(ge)昂(ang)貴(gui)。新(xin)生(sheng)小(xiao)牛血(xue)清是從(cong)剛(gang)出(chu)生(sheng)的(de)尚(shang)未哺乳的小(xiao)牛中(zhong)分(fen)離出(chu)來(lai)的(de)血(xue)清，如廠家能做(zuo)到這(zhe)壹(yi)點(dian)，新(xin)生(sheng)小(xiao)牛血(xue)清的質量(liang)與(yu)胎(tai)牛血(xue)清的質量(liang)相差(cha)不(bu)大(da)。如(ru)小(xiao)牛出(chu)生(sheng)後(hou)已(yi)哺乳，從(cong)這(zhe)種(zhong)小(xiao)牛中(zhong)取出(chu)的(de)血(xue)清中可(ke)能含(han)有較(jiao)多(duo)的生(sheng)物活(huo)性物(wu)質，其質量(liang)明(ming)顯(xian)不如前兩種(zhong)。

　　血(xue)清的質量(liang)，種(zhong)類(lei)及(ji)使(shi)用(yong)的濃度都有可(ke)能影響細(xi)胞的(de)生(sheng)長(chang)，而(er)不同(tong)批次(ci)的血(xue)清支持細(xi)胞(bao)生(sheng)長的(de)能(neng)力(li)也不同(tong)，尤其是對克(ke)隆(long) 細胞(bao)的生長(chang)，某些(xie)批次(ci)血(xue)清可(ke)能含(han)有毒(du)性或抑制(zhi)細(xi)胞生長(chang)的物(wu)質(zhi)。註(zhu)意以下(xia)幾(ji)點(dian)：

　　(1)需(xu)要(yao)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)的血(xue)清必須儲存(cun)於(yu)-20℃或-80℃低溫(wen)冰(bing)箱(xiang) 中(zhong)。4℃冰(bing)箱(xiang)中(zhong)保(bao)存(cun)時(shi)間切勿(wu)超(chao)過(guo)1 個(ge)月(yue)。由(you)於(yu)血(xue)清結(jie)冰(bing)時(shi)體(ti)積(ji)會增加約(yue)10%，因此(ci)，血(xue)清在(zai)凍入(ru)低溫(wen)冰(bing)箱(xiang)前(qian)，必須預留壹定體(ti)積(ji)空(kong)間，否(fou)則(ze)易(yi)發生汙染或玻璃瓶(ping)凍裂。

　　(2)BUNSEN本(ben)生提(ti)供的血(xue)清為無(wu)菌(jun)，無需再(zai)過(guo)濾(lv)除菌。如發現(xian)血(xue)清有懸浮物，則(ze)可(ke)將(jiang)血(xue)清加入(ru)培養液(ye)內壹起(qi)過(guo)濾(lv)，切勿(wu)直(zhi)接過(guo)濾(lv)血(xue)清。否則(ze)會導致(zhi)營養(yang)物(wu)質的(de)流失!

　　(3)瓶(ping)裝血(xue)清解凍需(xu)采用(yong)逐步(bu)解凍法(fa)：-20 ℃或 -80 ℃ 低溫(wen)冰(bing)箱(xiang)中(zhong)的血(xue)清放入(ru)4℃冰(bing)箱(xiang)中(zhong)溶(rong)解1 天(tian)。然(ran)後(hou)移(yi)入(ru)室溫(wen)，待(dai)全部(bu)溶(rong)解後再(zai)分(fen)裝(zhuang)。在(zai)溶(rong)解過(guo)程(cheng)中需不斷輕輕(qing)搖(yao)晃均(jun)勻(小心勿(wu)造成(cheng)氣(qi)泡)，使(shi)溫(wen)度(du)與成(cheng)分(fen)均(jun)壹(yi)，減少沈澱的發(fa)生(sheng)。切勿(wu)直(zhi)接將(jiang)血(xue)清從(cong)-20 ℃進(jin)入(ru)37℃解凍，這(zhe)樣因溫(wen)度(du)改(gai)變(bian)太(tai)大(da)，容(rong)易造成(cheng)蛋白質凝集(ji)而出(chu)現(xian)沈澱。影響使(shi)用(yong)效(xiao)果(guo)!

　　(4)熱(re)滅(mie)活(huo)是指56℃, 30 分鐘(zhong)加熱(re)已(yi)*解凍的(de)血(xue)清。加熱(re)過(guo)程(cheng)中須(須)規(規)則搖晃(huang)均(jun)勻(勻)。此(ci)熱(re)處(chu)理(li)的目的(de)是使血(xue)清中的補(bu)體(ti)成(cheng)分(fen)(complement )滅活(huo)。除非(fei)必須，壹般不建議作(zuo)此(ci)熱(re)處(chu)理(li)，因為熱(re)處(chu)理(li)會造成(cheng)血(xue)清沈澱物顯(xian)著(zhu)增多(duo)，而且(qie)還(hai)會影響血(xue)清的質量(liang)。補(bu)體(ti)參與(yu)反(fan)應(ying)有：細(xi)胞(bao)毒(du)作(zuo)用(yong), 平(ping)滑肌(ji)細胞(bao)收(shou)縮(suo), 肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)和(he)血(xue)小板(ban)釋(shi)放組(zu)胺(an), 增強吞(tun)噬(shi)作(zuo)用(yong), 促進(jin)淋巴細(xi)胞(bao)和巨噬(shi)細(xi)胞發(fa)生(sheng)化(hua)學(xue)趨(qu)化(hua)和(he)活(huo)化(hua)。Cyagen提(ti)供的血(xue)清是經(jing)過(guo)嚴格(ge)處理(li)可(ke)以直(zhi)接使(shi)用(yong)，不需(xu)要(yao)特(te)殊的(de)處(chu)理，就(jiu)能(neng)夠維持良好的支(zhi)持(chi)效(xiao)果(guo)。

　　(5)切(qie)勿(wu)將(jiang)血(xue)清在(zai)37℃放置(zhi)太(tai)久，否(fou)則(ze)血(xue)清會變(bian)得渾濁(zhuo)，同時(shi)血(xue)清中的有效(xiao)成(cheng)分(fen)會破(po)壞(huai)而影響血(xue)清質量。

　　(6)血(xue)清中的沈澱物

　　絮(xu)狀(zhuang)物：主要(yao)是血(xue)清中的脂(zhi)蛋白變(bian)性及(ji)解凍後(hou)血(xue)清中纖維(wei)蛋白造成(cheng)，這(zhe)些(xie)絮(xu)狀(zhuang)物不(bu)會影響血(xue)清本(ben)身的(de)質量。可(ke)用(yong)離心3000rpm, 5 分(fen)鐘(zhong)去除，也可(ke)不用(yong)處理(li)。顯微鏡(jing)下(xia)“小(xiao)黑(hei)點(dian)"：經(jing)過(guo)熱(re)處(chu)理(li)過(guo)的(de)血(xue)清，沈澱物的(de)形(xing)成(cheng)會顯著(zhu)增多(duo)。有些(xie)沈澱物在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀察象“小黑(hei)點(dian)"，常(chang)誤(wu)認為血(xue)清受汙染。壹般情況(kuang)下(xia)，此(ci)小黑(hei)點(dian)不(bu)會影響細(xi)胞生(sheng)長(chang)。

　　血(xue)清  本(ben)生壹(yi)直視(shi)質(zhi)量控(kong)制(zhi)為企(qi)業(ye)的生命(ming)，追(zhui)求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭(zheng)力(li)的(de)不(bu)斷提(ti)升。公司在(zai)經(jing)營中(zhong)始(shi)終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀守(shou)法(fa)，嚴於(yu)律(lv)己，寬仁(ren)以待(dai)，敢(gan)於(yu)承(cheng)擔的(de)企(qi)業(ye)精神作(zuo)為標(biao)準(zhun)，以過(guo)硬(ying)的質量和(he)優良的(de)服(fu)務(wu)來(lai)維護(hu)和(he)拓(tuo)展(zhan)市場，較(jiao)大(da)限度(du)的(de)滿(man)足客戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的共贏(ying)，是我們的(de)發展目標(biao)。本(ben)生!您(nin)信(xin)任(ren)的(de)合(he)作(zuo)夥伴。我們願(yuan)與您(nin)真誠合(he)作(zuo)，共創美好的未(wei)來(lai)。