血(xue)清幹貨分(fen)享：胎牛血(xue)清使(shi)用(yong)中(zhong)會(hui)出(chu)現哪些問(wen)題(ti)

　　常見(jian)問(wen)題(ti)：

　　如何(he)儲(chu)存(cun)和(he)解(jie)凍(dong)胎牛血(xue)清?

　　胎牛血(xue)清中為什麽會(hui)產(chan)生(sheng)絮狀(zhuang)沈(chen)澱(dian)?如(ru)何(he)避免(mian)?

　　胎牛血(xue)清的(de)熱滅(mie)活?

　　細(xi)胞培養中(zhong)出(chu)現黑(hei)點該(gai)怎麽(me)做?

　　小牛(niu)血(xue)清和(he)胎牛血(xue)清有何(he)區(qu)別?

　　1、如(ru)何(he)儲(chu)存(cun)和(he)解(jie)凍(dong)血(xue)清才不會(hui)使(shi)產(chan)品質(zhi)量受(shou)損(sun)?

　　將血(xue)清從(cong)冷凍箱取出(chu)後(hou)，先置於2～8℃冰箱使(shi)之(zhi)融解(jie)，然(ran)後在(zai)室(shi)溫下(xia)使(shi)之(zhi)全(quan)融。但(dan)必(bi)須註(zhu)意(yi)的(de)是，融解(jie)過程中必(bi)須規則地搖晃(huang)均勻。

　　長(chang)時間儲(chu)存(cun)在(zai)2-8℃時，血(xue)清中的(de)各種蛋白(bai)和(he)脂蛋白(bai)(如冷凝(ning)集(ji)素(su)、纖(xian)維(wei)蛋白(bai)原、玻(bo)粘(zhan)連蛋白(bai)等)可能(neng)聚集(ji)而(er)形(xing)成(cheng)沈(chen)澱(dian)或(huo)可見(jian)的(de)混(hun)濁(zhuo)。因此，推(tui)薦(jian)在(zai)-20℃以(yi)下(xia)儲(chu)存(cun)血(xue)清，並避免(mian)反復凍融。

　　我(wo)們(men)建議血(xue)清應(ying)保存(cun)在(zai)-2O℃。若存(cun)放於4℃時，請(qing)勿(wu)超(chao)過壹個月(yue)。若壹次無(wu)法用(yong)完(wan)壹瓶，建議無(wu)菌分(fen)裝(zhuang)血(xue)清至恰(qia)當(dang)的(de)滅(mie)菌容(rong)器(qi)內，再(zai)放(fang)回(hui)冷凍。

　　2、血(xue)清中包含(han)絮(xu)狀(zhuang)沈(chen)澱(dian)，它(ta)們是什麽，怎麽(me)處理(li)?

　　沈(chen)澱(dian)包(bao)含(han)纖(xian)維(wei)蛋白(bai)和(he)脂蛋白(bai)。這是正(zheng)常特(te)性，不會(hui)影(ying)響(xiang)產(chan)品性質(zhi)。要除(chu)去(qu)沈(chen)澱(dian)，離(li)心(xin)血(xue)清(400g，1-2分(fen)鐘(zhong))或者簡單(dan)的(de)讓(rang)其(qi)沈(chen)澱(dian)在(zai)瓶(ping)子(zi)底(di)部，將血(xue)清小心的(de)轉(zhuan)移到另(ling)壹個無(wu)菌瓶(ping)裏(li)(壹般不建議采用(yong)過濾(lv)的(de)方(fang)法(fa)除(chu)去(qu)沈(chen)澱(dian)，因為(wei)沈(chen)澱(dian)會(hui)堵塞(sai)濾(lv)膜(mo)而無(wu)法過濾(lv))。大多(duo)情(qing)況輕(qing)輕搖動(dong)沈(chen)澱(dian)並(bing)加(jia)熱至37℃就會(hui)再(zai)溶解(jie)。所以，使(shi)用(yong)產(chan)品時要搖動(dong)並加(jia)熱血(xue)清至37℃，沈(chen)澱(dian)會(hui)自然消失。

　　3、如何(he)避免(mian)血(xue)清中產(chan)生(sheng)沈(chen)澱(dian)?

　　按(an)如下(xia)操作(zuo)可避(bi)免(mian)沈(chen)澱(dian)的(de)產(chan)生(sheng)：

　　(1)解(jie)凍(dong)血(xue)清時，請(qing)隨(sui)時將之(zhi)搖晃(huang)均勻，使(shi)溫(wen)度(du)及(ji)成(cheng)分(fen)均壹，減少(shao)沈(chen)澱(dian)的(de)發(fa)生(sheng)。

　　(2) 血(xue)清分(fen)裝(zhuang)凍(dong)存(cun)時，須規則搖晃(huang)均勻(小(xiao)心勿(wu)造(zao)成(cheng)氣泡)，使(shi)溫(wen)度(du)與成(cheng)分(fen)均壹。

　　(3) 勿直(zhi)接(jie)由(you)-20℃直(zhi)接(jie)至37℃解(jie)凍(dong)，因溫(wen)度(du)改(gai)變太大，容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)蛋白(bai)質(zhi)凝(ning)結(jie)而(er)發(fa)生(sheng)沈(chen)澱(dian)。

　　(4) 勿(wu)將血(xue)清置於37℃太久，否則(ze)血(xue)清會變得(de)渾(hun)濁(zhuo)，同(tong)時血(xue)清中許多(duo)較不穩(wen)定(ding)的(de)成(cheng)份(fen)也會因此受(shou)到破(po)壞(huai)，從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)血(xue)清的(de)品質(zhi)。

　　(5) 血(xue)清的(de)熱滅(mie)活非(fei)常容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)沈(chen)澱(dian)物的(de)增多(duo)，若非(fei)必(bi)要，可以(yi)無(wu)須做(zuo)此步驟。

　　(6) 若必(bi)須做(zuo)血(xue)清的(de)熱滅(mie)活，請(qing)遵守56℃，30分(fen)鐘(zhong)的(de)原則，並且隨(sui)時搖晃(huang)均勻。溫(wen)度(du)過高，時間過久或搖晃(huang)不均(jun)勻(yun)，都(dou)會(hui)造(zao)成(cheng)沈(chen)澱(dian)物的(de)增多(duo)。

　　4、培養基(ji)中(zhong)添加(jia)了(le)血(xue)清和(he)抗(kang)生(sheng)素後(hou)，可長(chang)期(qi)保存(cun)嗎(ma)?

　　壹旦您在(zai)新(xin)鮮培養基(ji)中(zhong)添加(jia)了(le)血(xue)清和(he)抗(kang)生(sheng)素時，您應(ying)該(gai)在(zai)兩(liang)到(dao)三周(zhou)內使(shi)用(yong)它(ta)。因為(wei)壹些抗(kang)生(sheng)素和(he)血(xue)清中的(de)基(ji)本成分(fen)在(zai)解(jie)凍(dong)後就開(kai)始(shi)降(jiang)解(jie)。

　　5、為(wei)什麽要熱滅(mie)活血(xue)清?

　　加(jia)熱可以(yi)滅(mie)活補(bu)體系(xi)統(tong)。激活的(de)補(bu)體參與(yu)溶解(jie)細(xi)胞事(shi)件(jian)，刺激(ji)平(ping)滑肌(ji)收縮，細(xi)胞和(he)血(xue)小(xiao)板釋(shi)放組(zu)胺，激(ji)活淋(lin)巴(ba)細(xi)胞和(he)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞。在(zai)免(mian)疫(yi)學 研究，培養ES細(xi)胞、平(ping)滑肌(ji)細(xi)胞時，推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)熱滅(mie)活血(xue)清。

　　6、有必(bi)要做(zuo)熱滅(mie)活嗎(ma)?

　　實(shi)驗(yan)顯(xian)示，經過正(zheng)確(que)處理(li)的(de)熱滅(mie)活血(xue)清，對大多(duo)數的(de)細(xi)胞而(er)言(yan)是不需(xu)要的(de)。經此處理(li)過的(de)血(xue)清對細(xi)胞的(de)生(sheng)長只有微小的(de)促進，或沒有任何(he)作(zuo)用，甚至通(tong)常因為(wei)高(gao)溫處理(li)影響(xiang)了血(xue)清的(de)質(zhi)量，而(er)造(zao)成(cheng)細(xi)胞生(sheng)長速(su)率的(de)降(jiang)低(di)。

　　而(er)經過熱處理(li)的(de)血(xue)清，沈(chen)澱(dian)物的(de)形(xing)成(cheng)會(hui)顯(xian)著的(de)增多(duo)，這些(xie)沈(chen)澱(dian)物在(zai)倒(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)，像是“小黑點"，常常會(hui)讓(rang)研究者誤(wu)以(yi)為是血(xue)清遭受(shou)汙染，而(er)把(ba)血(xue)清放在(zai)37℃環(huan)境(jing)中，又會使(shi)此沈(chen)澱(dian)物更增多(duo)，使(shi)研究者誤(wu)認(ren)為(wei)是微生(sheng)物 的(de)分(fen)裂擴增。

　　若非(fei)必(bi)須，可以(yi)不需(xu)要做(zuo)熱處理(li)這壹步。不但(dan)節(jie)省時間，更(geng)確(que)保血(xue)清的(de)質(zhi)量!

　　7、細(xi)胞培養中(zhong)出(chu)現黑(hei)點是汙染嗎(ma)?如(ru)何(he)處理(li)?

　　壹旦您在(zai)細(xi)胞培養的(de)過程中發(fa)現有(you)黑(hei)點生(sheng)成，首先，要肉(rou)眼觀察(cha)培養基(ji)是否混濁(zhuo)，然(ran)後(hou)，在(zai)鏡下(xia)觀察(cha)培養細(xi)胞生(sheng)長的(de)狀(zhuang)態(tai)，黑(hei)點是否遊動。如(ru)果(guo)細(xi)胞被(bei)汙染，微(wei)生(sheng)物則會大量繁殖(zhi)，培養基(ji)就會(hui)迅(xun)速(su)變黃、變混濁(zhuo)。汙染包(bao)括(kuo)細(xi)菌(jun)汙染、支(zhi)原體汙染等。

　　如果(guo)在(zai)鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞，生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)，與黑(hei)點出(chu)現前(qian)相(xiang)比(bi)，沒有任何(he)變化(hua)，那(na)麽，黑(hei)點的(de)出(chu)現可能(neng)與(yu)以下(xia)幾種(zhong)情(qing)況有(you)關：

　　(1)細(xi)胞生(sheng)長過老，破(po)碎的(de)細(xi)胞殘(can)骸(hai);

　　(2)血(xue)清質(zhi)量不好(hao)，反復凍融的(de)結(jie)果(guo);

　　(3)配(pei)制培養基(ji)的(de)pH值偏(pian)高(gao)，不宜(yi)細(xi)胞生(sheng)長;

　　(4)配(pei)制培養基(ji)的(de)水(shui)質(zhi)、容(rong)器(qi)不合(he)格。可應(ying)用(yong)離(li)心(xin)、過濾(lv)的(de)方(fang)法(fa)去(qu)除(chu)這些(xie)黑點;

　　(5)培養原代細(xi)胞中(zhong)出(chu)現小(xiao)黑(hei)點，可能(neng)是原代組(zu)織中的(de)雜(za)質(zhi)，多(duo)次傳代可以(yi)消(xiao)除(chu)。

　　8、細(xi)胞培養中(zhong)如何(he)防止(zhi)黑點生(sheng)成?

　　(1) 盡(jin)可能(neng)地(di)減少(shao)血(xue)清凍融次(ci)數。

　　(2) 培養基(ji)無(wu)需37℃水(shui)浴(yu)。

　　(3) 培養基(ji)保持(chi)最佳(jia)PH值7.0-7.2。

　　(4) 嚴(yan)格控(kong)制配(pei)制培養基(ji)的(de)水(shui)質(zhi)，容(rong)器(qi)定(ding)期(qi)刷(shua)洗(xi)。

　　(5) 掌握細(xi)胞傳(chuan)代(dai)的(de)最佳(jia)時機(ji)，細(xi)胞切勿生(sheng)長過老。

　　9、小(xiao)牛(niu)血(xue)清和(he)胎牛血(xue)清有何(he)區(qu)別與(yu)註(zhu)意(yi)事項?

　　(1)來源不同(tong)：胎牛血(xue)清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在(zai)屠(tu)宰(zai)懷孕母(mu)牛的(de)時候,通(tong)過心臟(zang)穿(chuan)刺采(cai)血(xue)獲(huo)取的(de)胎牛的(de)血(xue)清，新生(sheng)牛(小(xiao)牛(niu))血(xue)清(Calf serum, CS)采自出(chu)生(sheng)10至14 天的(de)小(xiao)牛(niu)。

　　(2)組(zu)份與(yu)比(bi)例(li)不同(tong)：兩(liang)者所含(han)的(de)促細(xi)胞生(sheng)長因子(zi)、促貼(tie)附(fu)因子(zi)、激素(su)及(ji)其(qi)他活性物質(zhi)等

　　(3)用途與(yu)用(yong)法(fa)不同(tong)：某(mou)些細(xi)胞必(bi)需(xu)胎牛血(xue)清才能(neng)生(sheng)長，而(er)有(you)些(xie)細(xi)胞只需小牛血(xue)清即可，使(shi)用(yong)濃(nong)度(du)不同(tong)，壹般在(zai)5%-10%，有(you)特(te)殊要求(qiu)的(de)濃(nong)度(du)在(zai)20%。

　　10、血(xue)清保存(cun)和(he)使(shi)用(yong)須註(zhu)意(yi)

　　血(xue)清應(ying)保存(cun)在(zai)-5℃至-20℃，若存(cun)放在(zai)4℃不可超(chao)過壹個月(yue)。

　　解(jie)凍(dong)血(xue)清時 ，應(ying)先(xian)將血(xue)清至於2-8℃冰箱，並經常搖勻(yun)使(shi)之(zhi)溶解(jie)，然(ran)後至室(shi)溫放(fang)置使(shi)之(zhi)升(sheng)溫，絕(jue)對(dui)不可將冷凍的(de)血(xue)清直接(jie)放(fang)入(ru)37℃水浴(yu)或者溫(wen)箱中，如(ru)放在(zai)37℃解(jie)凍(dong)，顏色加(jia)深(shen)，粘稠度(du)也會增加(jia)，血(xue)清在(zai)解(jie)凍(dong)和(he)熱滅(mie)活後(hou)，應(ying)按(an)用(yong)量分(fen)裝(zhuang)並(bing)於-20℃保存(cun)，避免(mian)反復凍融。

　　胎牛血(xue)清 本生(sheng)壹直視(shi)質(zhi)量控(kong)制為企業(ye)的(de)生(sheng)命，追(zhui)求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭力(li)的(de)不斷提升(sheng)。公(gong)司在(zai)經營中始終(zhong)秉承：遵紀守(shou)法(fa)，嚴(yan)於律己，寬(kuan)仁以待(dai)，敢(gan)於承擔的(de)企(qi)業(ye)精(jing)神(shen)作(zuo)為標(biao)準，以過硬的(de)質(zhi)量和(he)優良的(de)服(fu)務(wu)來維(wei)護(hu)和(he)拓展(zhan)市場，較大限度(du)的(de)滿足客戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共(gong)贏，是我們的(de)發(fa)展(zhan)目(mu)標(biao)。本生(sheng)!您信(xin)任的(de)合(he)作(zuo)夥伴(ban)。我們(men)願(yuan)與您真誠合作(zuo)，共(gong)創美(mei)好的(de)未(wei)來。