本(ben)生資(zi)訊(xun)| 對(dui)於(yu)血清知(zhi)識(shi)點，圍觀(guan)的看過(guo)來!

　　由(you)於(yu)血清來源於(yu)動物(wu)，且含(han)有細胞培養中(zhong)所(suo)需要的各(ge)種(zhong)營(ying)養(血漿蛋白(bai)、多肽、脂(zhi)肪、碳(tan)水(shui)化(hua)合物(wu)、生長(chang)因子(zi)、激素、無機(ji)物(wu)等(deng))，這奠定了(le)血清是細胞培養實驗中(zhong)普遍的試(shi)劑(ji)的基(ji)礎。

　　目前(qian)血清的采(cai)集(ji)地(di)主要(yao)分(fen)布(bu)在以下(xia)國(guo)家(jia)：

　　市面上的牛血清產品名稱(cheng)雖(sui)然對(dui)較(jiao)多(duo)，但(dan)根據(ju)其不同(tong)的特(te)性，大(da)致可(ke)以分(fen)為(wei)以下(xia)四(si)種。根據牛的取(qu)血年齡可(ke)以區(qu)分(fen)：

　　胎牛血清

　　胎牛血清(Foetal Bovine Serum，簡稱(cheng)FBS)指的是取自未(wei)出生，母(mu)牛剖腹心(xin)臟(zang)穿刺(ci)采血得來的血清。

　　國產胎牛血清

　　國產胎牛血清(並無明(ming)確定義(yi)，但(dan)通常(chang)用(yong)此(ci)命名)指的是出生4-6小(xiao)時(shi)，且未(wei)進行(xing)哺乳(ru)(unsuckled)進食(shi)的新(xin)生牛，有時還(hai)稱(cheng)作國產(chan)新(xin)生牛血清。

　　新(xin)生牛血清

　　新(xin)生牛血清(Newborn Calf Serum，簡稱(cheng)NBCS，或稱(cheng)小牛血清)指的是出生14天(tian)-3個(ge)月(yue)進行(xing)取血的牛血清。

　　成(cheng)年牛血清

　　成(cheng)年牛血清(Adult Bovine Serum，簡稱(cheng)ABS)指的是取血時牛齡通(tong)常(chang)超(chao)過(guo)12個(ge)月(yue)的牛血清。

　　以上取(qu)血牛齡的差異主要(yao)是受(shou)當(dang)地(di)國家(jia)畜牧(mu)業的發(fa)展(zhan)及法(fa)規(gui)限制(zhi)影響(xiang)，因為(wei)牛血多為(wei)畜牧(mu)業副(fu)產業，並未(wei)有專門(men)為(wei)取血而(er)養的牛。

　　幾(ji)種(zhong)血清的比較(jiao)：

　　這幾(ji)種(zhong)不同(tong)牛齡血清所含的促(cu)細胞生長(chang)因子(zi)、促貼附因子(zi)、激素及其他(ta)活(huo)性物(wu)質(zhi)等(deng)組分(fen)與比例不同(tong)。常(chang)規來(lai)說，年齡越(yue)小的牛血清，細胞培養效果(guo)越(yue)好。

　　胎牛血清培養效果(guo)好於(yu)新(xin)生牛，且因為(wei)胎牛未(wei)進食(shi)過(guo)母乳(ru)，所(suo)以IgG含(han)量(liang)低。故目前(qian)多(duo)數實驗人員選擇(ze)的都(dou)是胎牛血清進行(xing)細胞培養。

　　胎牛血清成(cheng)分(fen)已(yi)知(zhi)的有上千(qian)多種(zhong)，以下(xia)為(wei)主要(yao)成(cheng)分(fen)表：

　　以下(xia)是BUNSEN本生技術小(xiao)編(bian)為(wei)您總結(jie)的血清相關的知(zhi)識(shi)點：

　　1、血清的顏(yan)色(se)如何(he)?

　　為(wei)何有的胎牛血清顏(yan)色(se)偏(pian)紅(hong)，而(er)有的偏(pian)黃(huang)?是因為(wei)胎牛血清顏(yan)色(se)是由(you)血紅(hong)蛋白(bai)(鮮紅(hong))和膽紅(hong)素(黃)決定的，主要(yao)是受(shou)血紅(hong)蛋白(bai)影響(xiang)。

　　血紅(hong)蛋白(bai)含量(liang)很低時(shi)，含(han)少量(liang)膽紅(hong)素，呈(cheng)淡黃或金(jin)黃(huang)。血紅(hong)蛋白(bai)含量(liang)高時，會呈(cheng)現(xian)淡紅(hong)色(se)。

　　需要(yao)長期(qi)保(bao)存的血清必須(xu)儲存於(yu)-20℃冰箱(xiang)(未(wei)開封血清有效期(qi)為(wei)5年)。若(ruo)存放於(yu)4℃，請勿(wu)超(chao)過(guo)1個(ge)月(yue)，若(ruo)壹次(ci)無法(fa)用(yong)完壹瓶，建(jian)議(yi)將(jiang)血清無菌(jun)分(fen)裝並(bing)冷(leng)凍(dong)。

　　2、血清如何解凍(dong)?

　　血清解凍需采(cai)用(yong)逐(zhu)步解(jie)凍(dong)法(fa)：將(jiang)血清從-20℃冰箱(xiang)放入(ru)4℃冰箱(xiang)中溶(rong)解壹(yi)天，然後移入室溫(wen)，待全(quan)部(bu)溶(rong)解後(hou)再(zai)分(fen)裝。在溶(rong)解過(guo)程(cheng)中(zhong)需不斷

　　輕(qing)輕(qing)搖晃(huang)均(jun)勻(小(xiao)心(xin)勿(wu)造(zao)成(cheng)氣(qi)泡)，減(jian)少沈(chen)澱(dian)生成(cheng)。切(qie)勿(wu)直(zhi)接(jie)將(jiang)血清從-20℃轉入(ru)37℃解(jie)凍，這樣因溫(wen)差較(jiao)大(da)易造(zao)成(cheng)蛋(dan)白(bai)質(zhi)凝結(jie)並出現(xian)沈澱(dian)。

　　3、使用(yong)前(qian)是否(fou)需(xu)要過濾?

　　本公(gong)司血清在ISO 13485認(ren)證(zheng)的廠(chang)房中生產(chan)，經(jing)過(guo)3次(ci)0.1 μm過(guo)濾，出廠經(jing)過(guo)檢測(ce)並且會使用(yong)三(san)種(zhong)以上的細胞株進行(xing)培養測(ce)試(shi)及無菌(jun)檢測(ce)，汙(wu)染幾(ji)率(lv)非常(chang)非常(chang)非常(chang)低(重(zhong)要的事(shi)情(qing)說(shuo)三(san)遍)。通常(chang)細胞汙(wu)染有非常(chang)多的可(ke)能(neng)性，根據協(xie)助(zhu)使用(yong)者(zhe)進行(xing)分(fen)析檢測(ce)，結(jie)果表明(ming)絕(jue)大(da)部分(fen)都是因人為(wei)操(cao)作失誤(wu)導(dao)致汙(wu)染。因此(ci)買來的血清不需(xu)要(yao)再(zai)次(ci)進行(xing)過濾。

　　4、為(wei)什麽血清中會有沈澱(dian)生成(cheng)，主要(yao)成(cheng)分(fen)是什麽，會對(dui)實驗有什麽影響(xiang)?

　　血清中沈澱主要(yao)有：纖維蛋(dan)白(bai)(絮(xu)狀(zhuang)沈(chen)澱(dian))，胎球蛋(dan)白(bai)，脂蛋(dan)白(bai)，冷凝集素，玻連(lian)蛋白(bai)，磷酸(suan)鈣(gai)(顯微(wei)鏡下小黑(hei)點沈(chen)澱(dian))，膽固醇等(deng)。

　　原(yuan)因：造(zao)成(cheng)沈(chen)澱(dian)的主要(yao)原(yuan)因是溫(wen)度(du)的改(gai)變。熱滅活(huo)，反(fan)復凍融，長(chang)期(qi)儲存於(yu)2-8℃或者室溫(wen)。

　　預(yu)防(fang)：非(fei)必要，不用(yong)熱滅活(huo);避免(mian)反(fan)復凍融;-20℃保(bao)存;4℃全(quan)融(期(qi)間(jian)間(jian)斷搖晃(huang)均(jun)勻);2000 rpm離(li)心(xin)5分(fen)鐘(不建(jian)議(yi)用(yong)0.2 μm濾膜過濾)，取上清使用(yong)。

　　5、黑(hei)膠蟲(chong)是來源於(yu)血清嗎?

　　目前科學(xue)界(jie)對(dui)黑(hei)膠蟲(chong)的身(shen)份(fen)並(bing)無定(ding)論, 通常(chang)是顯微鏡下觀(guan)察(cha)到密(mi)密(mi)麻(ma)麻(ma)的小(xiao)黑(hei)點在培養基(ji)中(zhong)自主遊(you)動，就(jiu)稱(cheng)為(wei)黑(hei)膠蟲(chong)汙(wu)染。

　　黑(hei)膠蟲(chong)在鏡下的典型特(te)征呈(cheng)卵(luan)圓(yuan)狀、球(qiu)狀、桿狀(zhuang)等(deng)，可(ke)引(yin)起細胞生長(chang)遲(chi)緩或裂解(jie)雕亡。

　　目(mu)前(qian)沒有充分(fen)的數據表明(ming)黑(hei)膠蟲(chong)來(lai)源(yuan)於(yu)血清，因為(wei)其尺寸遠(yuan)大(da)於(yu)血清過濾時所用(yong)的0.1微(wei)米(mi)(μm)濾膜。建(jian)議(yi)各(ge)位(wei)老(lao)師(shi)通過使用(yong)三(san)抗(kang)(Cat#: C3422-0100)外加支(zhi)原(yuan)體(ti)處理(li)試(shi)劑(ji)(Cat#: 03-038-1B)嘗試(shi)殺滅(mie)黑(hei)膠蟲(chong)。

　　6、血清存在批間差嗎?

　　答(da)案(an)是毋庸置(zhi)疑(yi)的，因為(wei)血清來源於(yu)動物(wu)，其組成(cheng)成(cheng)分(fen)有1000種左右(you)，且血清組成(cheng)及含量(liang)常(chang)隨供(gong)血動物(wu)的性別、年齡、生理(li)條(tiao)件(jian)和(he)營(ying)養

　　條(tiao)件(jian)不同(tong)而(er)異。每個批號的組(zu)分(fen)和百(bai)分(fen)比含(han)量(liang)都是不固定(ding)的，所(suo)以批間差異是存在的。

　　建(jian)議(yi)*行(xing)批號測(ce)試(shi)，篩(shai)選(xuan)出(chu)合適(shi)批號，購(gou)買半(ban)年甚至壹年以上的用(yong)量(liang)，避免(mian)批間差造(zao)成(cheng)實驗波(bo)動(胎牛血清在-20℃保存可(ke)達5年)。

　　Tips：

　　1、如(ru)果要(yao)除去(qu)血清中的沈(chen)澱(dian)，可(ke)以將(jiang)血清分(fen)裝至(zhi)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中，400g 離(li)心(xin)，留(liu)上清即可(ke)。由(you)於(yu)濾膜容(rong)易(yi)被(bei)沈(chen)澱堵塞，因此(ci)不建(jian)議(yi)用(yong)過(guo)濾的方(fang)法(fa)。

　　2、沈(chen)澱不是檢驗(yan)血清的硬(ying)指標，但(dan)為(wei)了(le)實驗準(zhun)確、實驗美(mei)觀(guan)、實驗便利(li)，還(hai)是應(ying)該(gai)盡量(liang)減少沈(chen)澱(dian)的產(chan)生。掌握(wo)正(zheng)確的血清解凍、使用(yong)方(fang)法(fa)，再(zai)加上壹(yi)款品質(zhi)穩(wen)定(ding)的優(you)秀(xiu)血清，對(dui)於(yu)細胞實驗來(lai)說，至(zhi)關(guan)重(zhong)要。

　　對(dui)於(yu)血清知(zhi)識(shi)點，圍觀(guan)的看過(guo)來! 本(ben)生生物(wu)公(gong)司供應(ying)：ELISA試(shi)劑(ji)盒,動物(wu)血清,熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR耗材(cai),移液(ye)器吸(xi)嘴(zui),微量(liang)離(li)心(xin)管(guan),進口凍存管(guan),細胞培養皿(min),培養板(ban),培養瓶,進口吸(xi)頭(tou),儀器及手套(tao),色(se)譜(pu)耗(hao)材(cai),針(zhen)頭(tou)過濾器等(deng)。