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本生提醒(xing)您(nin):做(zuo)ELISA標準曲(qu)線(xian)時(shi)需(xu)要註(zhu)意(yi)哪些問(wen)題(ti)
做(zuo)ELISA實(shi)驗(yan)的老(lao)師(shi)們都(dou)知道(dao)ELISA標準曲(qu)線(xian)做(zuo)的好(hao)與(yu)壞會(hui)直(zhi)接(jie)影(ying)響到實驗(yan)的結(jie)果(guo),甚(shen)至(zhi)是關(guan)系到實驗(yan)的成(cheng)敗(bai)。今(jin)天(tian)小(xiao)編(bian)就(jiu)和大(da)家(jia)壹起(qi)來(lai)看下我們在(zai)做(zuo)ELISA標準曲(qu)線(xian)時(shi)需(xu)要重點註意(yi)的細節(jie)問(wen)題(ti)。
設置(zhi)標準曲(qu)線(xian)樣(yang)品(pin)的標準濃(nong)度範(fan)圍要(yao)有壹個(ge)比(bi)較(jiao)大(da)的跨(kua)度(du),並且(qie)要(yao)能涵蓋妳所(suo)要檢(jian)測實(shi)驗(yan)樣(yang)品(pin)的濃(nong)度(du),即(ji)樣(yang)品(pin)的濃(nong)度(du)要(yao)在(zai)標準曲(qu)線(xian)濃(nong)度(du)範(fan)圍之內,包括上(shang)限(xian)和下限(xian)。而(er)對(dui)於呈(cheng)S型(xing)的標準曲(qu)線(xian),盡(jin)量(liang)要使實(shi)驗(yan)樣(yang)品(pin)的濃(nong)度(du)在(zai)中(zhong)間坡(po)度(du)*陡段,即(ji)曲(qu)線(xian)幾乎(hu)成(cheng)直(zhi)線(xian)的範(fan)圍內。

2.檢(jian)測標準樣(yang)品(pin)時(shi),應按濃度(du)遞(di)增(zeng)順序進行(xing),以(yi)減少(shao)高(gao)濃度(du)對低(di)濃(nong)度(du)的影(ying)響,提高(gao)準確(que)性(xing)。
3.標準曲(qu)線(xian)的樣(yang)品(pin)數(shu)壹般(ban)為(wei)7個(ge)點,但至(zhi)少(shao)要保證有(you)5個(ge)點。
4.做出(chu)的標準曲(qu)線(xian)相(xiang)關(guan)系數(shu)因實(shi)驗(yan)要(yao)求不(bu)同(tong)而(er)有(you)所(suo)變動,但壹(yi)般(ban)來(lai)說,相(xiang)關(guan)系數(shu)R至少(shao)要大(da)於0.98,對於有些(xie)實驗(yan),至(zhi)少(shao)要0.99甚(shen)至(zhi)是(shi)0.999。
5.樣品(pin)的濃(nong)度(du)等指標是根(gen)據(ju)標準曲(qu)線(xian)計(ji)算(suan)出(chu)來(lai)的,所(suo)以(yi)首(shou)先(xian)要(yao)把(ba)做標準曲(qu)線(xian)看(kan)作(zuo)是比(bi)做正(zheng)式實驗(yan)還(hai)要重要(yao)的壹(yi)件(jian)事,否(fou)則(ze)後(hou)面(mian)的實(shi)驗(yan)結(jie)果無從(cong)談起(qi)。
6.采用(yong)倍(bei)比(bi)稀(xi)釋(shi)法配制(zhi)標準曲(qu)線(xian)中(zhong)的標準樣(yang)品(pin)濃(nong)度,這樣(yang)就(jiu)能夠保證標準樣(yang)品(pin)的濃(nong)度(du)不(bu)會(hui)出(chu)現較(jiao)大(da)的偏離(li)。
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