本生闡述(shu)：ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)進(jin)行各(ge)項實(shi)驗(yan)條件如(ru)何(he)選擇(ze)

　　使用ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)進(jin)行試驗(yan)時(shi)，應(ying)分(fen)別(bie)以(yi)陽性對(dui)照(zhao)與(yu)陰性對(dui)照(zhao)控(kong)制(zhi)試(shi)驗(yan)條件，待檢(jian)樣品應作(zuo)壹式(shi)二(er)份(fen)，以(yi)保(bao)證(zheng)實(shi)驗(yan)結果的(de)準確(que)性。有時(shi)本底較高(gao)，說明有非(fei)特異(yi)性反應(ying)。

　　在ELISA中(zhong)，進(jin)行各(ge)項實(shi)驗(yan)條件的(de)選擇(ze)是很重(zhong)要(yao)的(de)，其中(zhong)包括(kuo)：

　　固(gu)相載體的(de)選擇(ze)：許(xu)多物質可作(zuo)為(wei)固相載體，如(ru)聚氯(lv)yixi、聚苯(ben)yixi、聚丙(bing)酰(xian)胺和纖(xian)維(wei)素(su)等。其形式(shi)可以(yi)是(shi)凹(ao)孔(kong)平板(ban)、試管(guan)、珠粒等(deng)。目前常用的(de)是40孔(kong)聚苯(ben)yixi凹(ao)孔(kong)板(ban)。不(bu)管(guan)何(he)種載體，在使(shi)用前均可進(jin)行篩選：用等量(liang)抗(kang)原包被，在同(tong)壹(yi)實(shi)驗(yan)條件下進(jin)行反應(ying)，觀(guan)察(cha)其顯(xian)色反應(ying)是(shi)否(fou)均壹(yi)性，據(ju)此(ci)判明其吸附性(xing)能是(shi)否(fou)良好(hao)。

　　包被抗體(或抗原)的(de)選擇(ze)：將抗體(或抗原(yuan))吸附在固(gu)相載體表(biao)面(mian)時(shi)，要(yao)求(qiu)純(chun)度要(yao)好(hao),吸附時(shi)壹(yi)般要求(qiu)PH在9.0～9.6之(zhi)間(jian)。吸附溫度，時(shi)間(jian)及其(qi)蛋白(bai)量(liang)也有壹定(ding)影(ying)響(xiang),壹般多采(cai)用4℃18～24小時(shi)。蛋白(bai)質包被的(de)適濃度需進(jin)行滴定(ding)：即用不(bu)同(tong)的(de)蛋白(bai)質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jin)行包被後，在其(qi)它試(shi)驗(yan)條件相同(tong)時(shi)，觀(guan)察(cha)陽性標本的(de)OD值(zhi)。選(xuan)擇(ze)OD值(zhi)大(da)而(er)蛋白(bai)量(liang)少的(de)濃度。對於(yu)多數(shu)蛋白(bai)質來說通常(chang)為(wei)1～10μg/ml。

　　除(chu)此(ci)之外還要註(zhu)意(yi)以(yi)下(xia)事(shi)項：

　　1.確(que)定(ding)ELISA檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)在有(you)效(xiao)期(qi)內;

　　2.仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)說明書(shu);

　　3.按說(shuo)明書(shu)確定(ding)所(suo)有(you)試(shi)劑(ji)齊(qi)全(quan)(數(shu)量(liang)、體(ti)積(ji));

　　4.標本制(zhi)備要規範，每份標本體積(ji)要(yao)按2-3個(ge)復孔(kong)以(yi)上(shang)的(de)量制(zhi)備，盡量分裝(zhuang)做(zuo)備份。短期(qi)內無(wu)法實(shi)驗(yan)者(zhe)，註意(yi)低(di)溫保存;

　　5.根(gen)據(ju)檢(jian)測標本數量確定(ding)所(suo)需(xu)試(shi)劑(ji)的(de)量;

　　6.準(zhun)備好所有實(shi)驗(yan)額外(wai)所(suo)需(xu)物品，如(ru)試管、吸頭、移(yi)液器、離(li)心機(ji)等(deng);

　　7.按(an)說(shuo)明書(shu)將所(suo)用試劑(ji)平(ping)衡(heng)至室溫，配制(zhi)所(suo)需(xu)試(shi)劑(ji)。

　　適(shi)應(ying)客(ke)戶(hu)：醫院檢(jian)驗(yan)科PCR實(shi)驗(yan)室，中(zhong)心實(shi)驗(yan)室，肝(gan)病(bing)中心;第(di)三方檢(jian)測機(ji)構(gou)，科研(yan)院所，大(da)專(zhuan)院校，制(zhi)藥(yao)廠(chang)，試劑(ji)生產廠(chang)家，疾(ji)控(kong)中(zhong)心，檢(jian)驗(yan)檢(jian)疫(yi)。

　　溫馨提示：不(bu)可用於(yu)臨床(chuang)治(zhi)療。