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您現在(zai)的(de)位置:首頁 > 技術(shu)文章(zhang) > 新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)蛋(dan)白檢測(ce)指(zhi)標(biao)有哪些(xie)?
新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)(Newborn Calf Serum)是(shi)來(lai)自(zi)剛(gang)出生(sheng)~出生(sheng)後2周(zhou)內的(de)新(xin)生(sheng)牛靜脈取(qu)血(xue)。經(jing)大(da)規模(mo)混合(he)後(hou)除菌過濾制(zhi)成成品(pin),主(zhu)要用於動物(wu)細胞培(pei)養(yang),是(shi)醫藥(yao)生(sheng)物(wu)技(ji)術(shu)產(chan)品(pin)的(de)重要(yao)原材料之壹,其(qi)質(zhi)量(liang)好(hao)壞直(zhi)接(jie)影響細胞生(sheng)長(chang)情況(kuang)。
總蛋(dan)白含(han)量(liang)是(shi)新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)需(xu)要檢查的(de)指標(biao)。它(ta)屬(shu)於(yu)化(hua)學(xue)成分(fen)的初(chu)步分析。有人統計過國產(chan)新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)的(de)蛋(dan)白含(han)量(liang)1,在(zai)比(bi)較各產(chan)區各年(nian)份後,發現其(qi)含(han)量(liang)在(zai)3.7%~4.4%之(zhi)間。進(jin)口(kou)新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)並不(bu)與之*壹致。因為(wei)國內的(de)血(xue)清(qing)常采自(zi)奶牛,而國外的血清(qing)常采自(zi)肉牛。蛋(dan)白質(zhi)是(shi)新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)的(de)主要(yao)成分(fen),在(zai)細胞培(pei)養(yang)中(zhong)起著維持滲(shen)透(tou)壓(ya)、pH 值(zhi)緩沖(chong)、物(wu)質(zhi)運(yun)輸(shu)和提(ti)供(gong)營(ying)養、促(cu)進細胞粘附(fu)等(deng)重要(yao)作用。在(zai)胎(tai)牛血清(qing)中(zhong),其總(zong)蛋(dan)白含(han)量(liang)要更(geng)低(di)。
血紅(hong)蛋(dan)白含(han)量(liang)也是(shi)新(xin)生(sheng)牛血(xue)清(qing)壹(yi)項(xiang)重要(yao)檢測(ce)指(zhi)標(biao)。它(ta)是(shi)在(zai)血(xue)清(qing)運(yun)輸(shu)和加工(gong)過(guo)程中細胞裂解(jie)釋(shi)放(fang)到血(xue)清(qing)中(zhong)的。之(zhi)所(suo)以檢測(ce)主(zhu)要是(shi)由(you)於(yu)牛(niu)血(xue)清(qing)中(zhong)血紅(hong)蛋(dan)白具(ju)有氧化(hua)性(xing),其含(han)量(liang)過高(gao)會引起(qi)羧基(ji)的產(chan)生(sheng)和脂(zhi)質過(guo)氧化(hua)反應(ying),從(cong)而導致生(sheng)產(chan)細胞受損(sun),也會增加(jia)下遊(you)純(chun)化(hua)處(chu)理的難(nan)度(du),給(gei)藥品(pin)質(zhi)量(liang)帶來(lai)安全(quan)隱患2。有報道血紅(hong)蛋(dan)白具(ju)有神經毒(du)性(xing)。
使用(yong)時(shi)常見(jian)問(wen)題(ti)及解(jie)決(jue)方(fang)法(fa):
壹、保存(cun)血(xue)清(qing)-好(hao)的方(fang)法(fa)?
血清(qing)應(ying)保(bao)存(cun)在(zai)-5℃至-2O℃若(ruo)存(cun)放(fang)於4℃時(shi),請勿(wu)超過(guo)壹個月。若(ruo)您壹次無法(fa)用完壹(yi)瓶(ping),建(jian)議將(jiang)無菌分裝(zhuang)血(xue)清(qing)至恰當的滅(mie)菌容器(qi)內,再(zai)放(fang)回冷(leng)凍(dong)。
二(er)、如(ru)何(he)解凍(dong)血清(qing)才不(bu)會使產(chan)品(pin)質(zhi)量(liang)受損(sun)?
將(jiang)血(xue)清(qing)從(cong)冷凍(dong)箱取(qu)出後,先置於(yu)2-8℃冰箱使(shi)之溶(rong)解(jie),然(ran)後在(zai)室(shi)溫下使之(zhi)全(quan)溶。但必須註意的(de)是(shi),溶解(jie)過(guo)程中必須(xu)規(gui)則(ze)地(di)搖(yao)晃(huang)均(jun)勻。
三、如(ru)何(he)避免沈(chen)澱(dian)物(wu)的(de)產(chan)生(sheng)?
1.解凍(dong)血清(qing)時(shi),請按(an)照(zhao)所(suo)建(jian)議的(de)逐(zhu)步解凍(dong)法(fa)(-2O℃至4℃至室(shi)溫),若(ruo)血清(qing)解(jie)凍(dong)時(shi)改變的溫度太(tai)大(da)(如(ru)-20℃至37℃),實(shi)驗(yan)顯示非(fei)常容易產(chan)生(sheng)沈(chen)澱(dian)物(wu)。
2.解(jie)凍(dong)血清(qing)時(shi),請隨(sui)時(shi)將(jiang)之(zhi)搖(yao)晃(huang)均(jun)勻,使溫度(du)及(ji)成分(fen)均壹(yi),減少沈(chen)澱(dian)的(de)發生(sheng)
3.請勿(wu)將(jiang)血(xue)清(qing)置(zhi)於37℃太(tai)久(jiu)。若(ruo)在(zai)37℃放(fang)置太(tai)久(jiu),血(xue)清(qing)會變得(de)混(hun)濁,同(tong)時(shi)血清(qing)中(zhong)許(xu)多(duo)較不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)成分(fen)也會因此(ci)受到(dao)損(sun)害,而影響血清(qing)的(de)質量(liang)。
4.血清(qing)的(de)熱滅(mie)活非(fei)常容易造(zao)成沈(chen)澱(dian)物(wu)的(de)增(zeng)多(duo),若非(fei)必(bi)要(yao),可以無須(xu)做此步驟(zhou)。
5.若(ruo)必須(xu)做血清(qing)的(de)熱滅(mie)活,請遵守(shou)56℃,30分(fen)鐘的原則(ze),並且隨時(shi)搖(yao)晃(huang)均(jun)勻。溫度過(guo)高(gao),時(shi)間過(guo)久(jiu)或(huo)搖(yao)晃(huang)不(bu)均勻,都會造(zao)成沈(chen)澱(dian)物(wu)的(de)增(zeng)多(duo)。
四、血(xue)清(qing)解(jie)凍(dong)後發現有絮(xu)狀沈(chen)澱(dian)物(wu)出現,該(gai)如(ru)何(he)處(chu)理?
欲去(qu)除這(zhe)些(xie)絮(xu)狀沈(chen)澱(dian)物(wu),可(ke)以將(jiang)血(xue)清(qing)分(fen)裝至無菌離(li)心(xin)管內,以400g稍微(wei)離(li)心(xin),上(shang)清(qing)液(ye)即可接(jie)著加入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)內壹(yi)起(qi)過(guo)濾。但(dan)不(bu)建(jian)議以過濾的(de)方(fang)法(fa)去除這(zhe)些(xie)絮(xu)狀沈(chen)澱(dian)物(wu),因(yin)為(wei)它(ta)可(ke)能(neng)會阻塞(sai)過濾膜(mo)。
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