上海小(xiao)鼠瘦(shou)素(su)（LEP）ELISA試(shi)劑盒技(ji)術(shu)說明書(shu)本生生物公(gong)司供應(ying)：ELISA試(shi)劑盒,血(xue)清(qing)，熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR耗材(cai)，移液(ye)器(qi)吸嘴(zui)，微(wei)量(liang)離心(xin)管，進口(kou)凍(dong)存管，細胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)，培(pei)養(yang)板(ban)，培(pei)養(yang)瓶(ping)，吸頭，儀器(qi)及手套(tao)，色(se)譜耗材(cai)，針(zhen)頭過(guo)濾(lv)器(qi)。

英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng)：Mouse Leptin,LEP ELISA試(shi)劑盒

本試(shi)劑盒是(shi)固(gu)相夾心(xin)法(fa)酶聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附實(shi)驗(ELISA).已知(zhi)待測物質(zhi)濃(nong)度(du)的(de)標準(zhun)品、未(wei)知(zhi)濃(nong)度(du)的(de)樣(yang)品加(jia)入(ru)微(wei)孔(kong)酶標板(ban)內(nei)進行檢(jian)測。先(xian)將待(dai)測物質(zhi)和(he)生物素(su)標記(ji)的(de)抗(kang)體(ti)同(tong)時(shi)溫育。洗滌後(hou)，加(jia)入(ru)親和(he)素(su)標記(ji)過(guo)的(de)HRP。再(zai)經過(guo)溫育和(he)洗滌，去(qu)除(chu)未結(jie)合的酶結(jie)合物，然後加入(ru)底物A、B，和(he)酶結(jie)合物同(tong)時(shi)作用。產生顏色(se)。顏色(se)的(de)深淺(qian)和(he)樣(yang)品中(zhong)指標的(de)濃(nong)度(du)呈(cheng)比(bi)例(li)關(guan)系。

貨號(hao)：BS-2619

規格：96T/48T

產(chan)品名(ming)：小(xiao)鼠瘦(shou)素(su)（LEP）ELISA試(shi)劑盒

檢(jian)測種(zhong)屬：人(ren)、大小(xiao)鼠、豚(tun)鼠、兔(tu)子、豬(zhu)、犬、牛羊(yang)、雞鴨(ya)、猴ELISA試(shi)劑盒等(deng)種(zhong)屬。

保(bao)存條件(jian)及有(you)效期(qi)：

1、試(shi)劑盒保(bao)存：2-8℃。

2、有(you)效期(qi)：6個(ge)月

標記(ji)物：血(xue)清(qing)、血(xue)漿(jiang)、組織(zhi)勻漿(jiang)等(deng)

【測試(shi)種(zhong)屬】犬、大小(xiao)鼠、人(ren)、豚(tun)鼠、兔(tu)子、牛(niu)羊(yang)、豬(zhu)、雞鴨(ya)elisa試(shi)劑盒等(deng)種(zhong)屬
【儲(chu)存方式(shi)】：2-8℃
【檢(jian)測目(mu)的(de)】用(yong)於測定(ding)血清，血漿及(ji)相關液體(ti)等(deng)樣(yang)本。例(li)如適(shi)合檢測包括血(xue)清(qing)、血漿(jiang)、尿(niao)液、胸(xiong)腹水、灌(guan)洗液(ye)、腦脊(ji)液、細(xi)胞培(pei)養(yang)上清、組織(zhi)勻漿(jiang)等(deng)標本。
【用(yong)途(tu)】科(ke)研(yan)實(shi)驗，不(bu)用於臨(lin)床診(zhen)斷(duan)。

小(xiao)鼠ELISA試(shi)劑盒 小(xiao)鼠ELISAkit   試(shi)劑盒代(dai)測  瘦(shou)素(su)（LEP）

上海小(xiao)鼠瘦(shou)素(su)（LEP）ELISA試(shi)劑盒技(ji)術(shu)說明書(shu)

樣(yang)本處(chu)理及(ji)要求(qiu)：

1. 血(xue)清：室(shi)溫血液(ye)自(zi)然凝固10-20分(fen)鐘(zhong)，離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清，保存過(guo)程中(zhong)如出現沈澱(dian)，應(ying)再次(ci)離心(xin)。

2. 血漿(jiang)：應(ying)根據(ju)標本的(de)要(yao)求(qiu)選(xuan)擇EDTA或(huo)檸檬酸(suan)鈉作為(wei)抗凝(ning)劑，混合10-20分鐘(zhong)後，離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清，保存過(guo)程中(zhong)如有(you)沈澱形(xing)成，應(ying)該再(zai)次離心(xin)。

3. 尿液(ye)：用無菌管收集，離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清，保存過(guo)程中(zhong)如有(you)沈澱形(xing)成，應(ying)再次(ci)離心(xin)。胸腹水、腦脊(ji)液參(can)照(zhao)實(shi)行。

4. 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清：檢測分(fen)泌(mi)性的成份時(shi)，用無(wu)菌(jun)管收集。離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清。檢測細(xi)胞(bao)內(nei)的成份時(shi)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋(shi)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，細(xi)胞濃(nong)度(du)達(da)到(dao)100萬/ml左右。通(tong)過(guo)反(fan)復(fu)凍(dong)融，以使(shi)細胞破(po)壞(huai)並(bing)放出細胞(bao)內(nei)成份。離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清。保存過(guo)程中(zhong)如有(you)沈澱形(xing)成，應(ying)再次(ci)離心(xin)。

5. 組織(zhi)標本：切(qie)割(ge)標本後(hou)，稱(cheng)取(qu)重(zhong)量(liang)。加入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS，PH7.4。用(yong)液氮(dan)迅速(su)冷凍保存備用。標本融化後仍(reng)然保持(chi)2-8℃的(de)溫度。加(jia)入(ru)壹定(ding)量(liang)的PBS(PH7.4)，用(yong)手工(gong)或(huo)勻漿(jiang)器(qi)將標本勻漿(jiang)充分(fen)。離心(xin)20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清。分裝(zhuang)後壹份(fen)待(dai)檢測，其(qi)余冷凍(dong)備用。

6. 標本采(cai)集後盡早(zao)進(jin)行提(ti)取(qu)，提(ti)取(qu)按(an)相關文(wen)獻進行，提(ti)取(qu)後(hou)應(ying)盡快(kuai)進(jin)行實(shi)驗。若(ruo)不能馬上進行試(shi)驗，可(ke)將標本放於-20℃保(bao)存，但應(ying)避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融.

7. 不(bu)能檢測含(han)NaN3的(de)樣(yang)品，因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根過(guo)氧化物酶的(de)(HRP)活(huo)性。

小(xiao)鼠瘦(shou)素(su)（LEP）ELISA試(shi)劑盒操作(zuo)步(bu)驟：

小(xiao)鼠瘦(shou)素(su)（LEP）ELISA試(shi)劑盒組成：
試(shi)劑盒組成48 孔(kong)配置(zhi)96 孔(kong)配置(zhi)保存
說明書(shu)1 份(fen)1 份
封板(ban)膜2 片(pian)(48)2 片(96)
密(mi)封袋1 個(ge)1 個(ge)
酶標包被板(ban)1×481×962-8℃保(bao)存
標準(zhun)品：540μg/L0.5ml×1 瓶(ping)0.5ml×1 瓶(ping)2-8℃保存
標準(zhun)品稀釋(shi)液(ye)1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試(shi)劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保(bao)存
樣(yang)品稀釋(shi)液(ye)3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色(se)劑 A 液3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存
顯色(se)劑 B 液3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶2-8℃保(bao)存
濃(nong)縮(suo)洗滌液(ye)(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保(bao)存

作步(bu)驟：

1. 使(shi)用(yong)前(qian)，將所(suo)有(you)試(shi)劑充分(fen)混(hun)勻。不(bu)要(yao)使液體(ti)產(chan)生大量(liang)的泡(pao)沫，以免(mian)加(jia)樣(yang)時(shi)加(jia)入(ru)大量(liang)的氣泡，產(chan)生加(jia)樣(yang)上的誤差(cha)。

2. 根(gen)據(ju)待測樣(yang)品數(shu)量(liang)加上標準(zhun)品的(de)數(shu)量(liang)決定(ding)所(suo)需(xu)的板(ban)條(tiao)數。每個(ge)標準(zhun)品和(he)空(kong)白(bai)孔(kong)建議做(zuo)復(fu)孔(kong)。每個(ge)樣(yang)品根(gen)據(ju)自(zi)己的(de)數(shu)量(liang)來定(ding)，能使用(yong)復(fu)孔(kong)的盡量(liang)做復(fu)孔(kong)。

3. 加入(ru)稀釋(shi)好(hao)後的(de)標準(zhun)品50ul於反(fan)應(ying)孔(kong)、加入(ru)待(dai)測樣(yang)品50ul於反(fan)應(ying)孔(kong)內(nei)。立即(ji)加入(ru)50ul的(de)生物素(su)標記(ji)的(de)抗(kang)體(ti)。蓋(gai)上膜板(ban)，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育45分(fen)鐘(zhong)。

4. 甩去孔(kong)內(nei)液體(ti)，每孔(kong)加滿(man)洗滌液(ye)，振(zhen)蕩(dang)30秒，甩去洗滌液(ye)，用(yong)吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復此(ci)操作(zuo)4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板(ban)機(ji)洗滌，洗滌次(ci)數(shu)增加壹次(ci)。

5. 每孔(kong)加入(ru)100ul的(de)親和(he)鏈酶素(su)-HRP，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育30分(fen)鐘(zhong)。

6. 甩去孔(kong)內(nei)液體(ti)，每孔(kong)加滿(man)洗滌液(ye)，振(zhen)蕩(dang)30秒，甩去洗滌液(ye)，用(yong)吸水紙(zhi)拍(pai)幹。重(zhong)復此(ci)操作(zuo)4次(ci)。如果(guo)用(yong)洗板(ban)機(ji)洗滌，洗滌次(ci)數(shu)增加壹次(ci)。

7. 每孔(kong)加入(ru)底物A、B各50ul，輕(qing)輕(qing)振(zhen)蕩(dang)混勻，37℃溫育5分(fen)鐘(zhong)。避免(mian)光(guang)照(zhao)。

8. 取(qu)出酶標板(ban)，迅(xun)速加入(ru)50ul終止液，加(jia)入(ru)終止液後(hou)應(ying)立即(ji)測定(ding)結果。

9. 在450nm波(bo)長(chang)處(chu)測定(ding)各孔(kong)的OD值(zhi)。

結 果(guo) 判 斷(duan) 與分(fen)析：

1、儀器值(zhi)：於波(bo)長(chang)450nm的(de)酶標儀(yi)上讀(du)取(qu)各孔(kong)的OD值(zhi)

2、以吸光度OD值(zhi)為縱(zong)坐標(Y)，相應(ying)的指標標準(zhun)品濃(nong)度(du)為(wei)橫坐(zuo)標(X)，做(zuo)得(de)相應(ying)的曲(qu)線，樣(yang)品的(de)含(han)量(liang)可根(gen)據其(qi)OD值(zhi)由標準(zhun)曲(qu)線換(huan)算出相應(ying)的濃(nong)度(du), 再(zai)乘(cheng)以稀釋(shi)倍數;或(huo)用(yong)標準(zhun)物的(de)濃(nong)度(du)與OD值(zhi)計算出標準(zhun)曲(qu)線的(de)回(hui)歸(gui)方程式(shi)，將樣(yang)品的(de)OD值(zhi)代入(ru)方程式(shi)，計算出樣(yang)品濃(nong)度(du)，再(zai)乘(cheng)以稀釋(shi)倍數，即(ji)為樣(yang)品的(de)實(shi)際濃(nong)度(du)。

產(chan)品用(yong)途(tu)：可(ke)用(yong)於科(ke)研(yan)實(shi)驗,不(bu)用於臨(lin)床治(zhi)療(liao)！