雞(ji)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)免(mian)費代測本(ben)生(sheng)生(sheng)物公司(si)供(gong)應(ying)：ELISA試(shi)劑(ji)盒(he),動(dong)物血清,熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR耗(hao)材,移(yi)液(ye)器(qi)吸(xi)嘴,微量離心(xin)管,進(jin)口(kou)凍存管,細胞(bao)培養(yang)皿,培養(yang)板,培(pei)養(yang)瓶,進(jin)口(kou)吸(xi)頭,儀(yi)器(qi)及手(shou)套(tao),色(se)譜耗(hao)材,針(zhen)頭過濾(lv)器(qi)。

本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)僅供(gong)研究(jiu)使(shi)用(yong)

檢測範圍(wei)： 96T

使(shi)用(yong)目(mu)的(de)：

本試(shi)劑(ji)盒(he)用(yong)於測定(ding)雞(ji)血(xue)清、血漿及相(xiang)關液(ye)體樣本(ben)中硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)含量(liang)。

實(shi)驗原理(li)

本試(shi)劑(ji)盒(he)應(ying)用雙(shuang)抗體(ti)夾(jia)心(xin)法(fa)測(ce)定(ding)標(biao)本(ben)中雞(ji)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)水(shui)平。用(yong)純化(hua)的(de)蛋(dan)白激(ji)酶(mei)B(PKB)抗體(ti)包被(bei)微孔板，制(zhi)成固相(xiang)抗體，往包被(bei)單(dan)抗(kang)的(de)微孔中依次(ci)加(jia)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)，再與(yu)HRP 標(biao)記的(de)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)抗體(ti)結合(he)，形成(cheng)抗體(ti)-抗原-酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)復合(he)物，經過*洗(xi)滌後加(jia)底物TMB 顯(xian)色。TMB 在HRP 酶的(de)催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成藍(lan)色(se)，並(bing)在酸(suan)的(de)作用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成終的(de)黃色。顏色的(de)深(shen)淺(qian)和(he)樣品(pin)中的(de)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)呈正(zheng)相(xiang)關。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm 波長下(xia)測(ce)定(ding)吸(xi)光度(du)(OD 值)，通過標(biao)準(zhun)曲線計算樣品(pin)中硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)濃度(du)。

試(shi)劑(ji)盒(he)組(zu)成：

1 30 倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye) 20ml×1 瓶 ; 2 酶標(biao)試(shi)劑(ji) 6ml×1 瓶

3 酶標(biao)包(bao)被(bei)板 12 孔×8 條(tiao) ; 4 樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye) 6ml×1 瓶

5 顯(xian)色劑A 液(ye) 6ml×1 瓶 ; 6 顯(xian)色劑B 液(ye) 6ml×1/瓶

7 終止液(ye) 6ml×1 瓶; 8 標(biao)準(zhun)品(pin)(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶

9 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye) 1.5ml×1 瓶; 10 說明書(shu) 1 份

11 封板膜(mo) 2 張(zhang); 12 密(mi)封袋(dai) 1 個

標(biao)本(ben)要求

1. 標(biao)本(ben)采集(ji)後盡(jin)早進(jin)行(xing)提(ti)取(qu)，提取(qu)按相(xiang)關文獻(xian)進(jin)行(xing)，提(ti)取(qu)後應(ying)盡(jin)快進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)。若不(bu)能(neng)馬上(shang)進(jin)行(xing)試(shi)驗(yan)，可(ke)將標(biao)本(ben)放於-20℃保(bao)存(cun)，但應避免反復凍融

2. 不(bu)能(neng)檢測含 NaN3 的(de)樣品(pin)，因 NaN3 抑(yi)制(zhi)胎盤(pan)核糖核酸(suan)抑止劑(HPRI)活性(xing)。

操(cao)作步(bu)驟

1. 標(biao)準(zhun)品(pin)的(de)稀(xi)釋(shi)：本試(shi)劑(ji)盒(he)提(ti)供(gong)原倍標(biao)準(zhun)品(pin)壹(yi)支(zhi)，用戶(hu)可(ke)按照(zhao)下(xia)列圖(tu)表(biao)在小(xiao)試(shi)管(guan)中進(jin)行(xing)稀(xi)釋(shi)。

60 ng/L5 號標(biao)準(zhun)品(pin)150µl 的(de)原倍標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru) 150µl 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)

30 ng/L4 號標(biao)準(zhun)品(pin)150µl 的(de) 5 號標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru) 150µl 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)

15 ng/L3 號標(biao)準(zhun)品(pin)150µl 的(de) 4 號標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru) 150µl 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)

7.5 ng/L2 號標(biao)準(zhun)品(pin)150µl 的(de) 3 號標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru) 150µl 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)

3.75 ng/L1 號標(biao)準(zhun)品(pin)150µl 的(de) 2 號標(biao)準(zhun)品(pin)加(jia)入(ru) 150µl 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)

2. 加(jia)樣：分(fen)別(bie)設空(kong)白孔(空(kong)白對(dui)照(zhao)孔不(bu)加(jia)樣品(pin)及酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji)，其(qi)余(yu)各步操(cao)作相(xiang)同(tong))、標(biao)準(zhun)孔、待(dai)測樣品(pin)孔。在酶標(biao)包(bao)被(bei)板上(shang)標(biao)準(zhun)品(pin)準確(que)加(jia)樣 50µl，待(dai)測(ce)樣品(pin)孔中先(xian)加(jia)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye) 40µl，

然後再加(jia)待測(ce)樣品(pin) 10µl(樣品(pin)終稀(xi)釋(shi)度(du)為(wei) 5 倍)。加(jia)樣將樣品(pin)加(jia)於酶(mei)標(biao)板孔底(di)部，盡(jin)

量不(bu)觸及孔壁(bi)，輕(qing)輕(qing)晃動混(hun)勻。

3. 溫(wen)育：用封板膜(mo)封板後置 37℃溫(wen)育 30 分(fen)鐘(zhong)。

4. 配(pei)液(ye)：將 30 倍濃(nong)縮(suo)洗(xi)滌液(ye)用蒸餾水(shui) 30 倍稀(xi)釋(shi)後備(bei)用(yong)

5. 洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉封板膜(mo)，棄去(qu)液(ye)體，甩(shuai)幹，每孔加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜置 30 秒(miao)後棄(qi)去(qu)，如此重(zhong)復 5 次(ci)，拍幹。

6. 加(jia)酶：每孔加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)試(shi)劑(ji) 50µl，空(kong)白孔除(chu)外。

7. 溫(wen)育：操(cao)作同(tong) 3。

8. 洗(xi)滌：操(cao)作同(tong) 5。

9. 顯(xian)色：每孔先(xian)加(jia)入(ru)顯(xian)色劑 A50µl，再加(jia)入(ru)顯(xian)色劑 B50µl，輕(qing)輕(qing)震蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光顯(xian)色

15 分(fen)鐘(zhong).

10. 終止：每孔加(jia)終止液(ye) 50µl，終止反應(ying)(此(ci)時(shi)藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。

11. 測定(ding)：以(yi)空(kong)白空(kong)調零(ling)，450nm 波長依序(xu)測(ce)量各孔的(de)吸(xi)光度(du)(OD 值)。 測定(ding)應(ying)在加(jia)終止液(ye)後 15 分(fen)鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行(xing)。

雞(ji)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)免(mian)費代測操(cao)作程(cheng)序總(zong)結：

計算(suan):

以標(biao)準(zhun)物的(de)濃度(du)為(wei)橫(heng)坐標(biao)，OD 值為(wei)縱(zong)坐標(biao)，在坐標(biao)紙上(shang)繪出(chu)標(biao)準(zhun)曲線，根據樣品(pin)的(de)OD 值由標(biao)準(zhun)曲線查出(chu)相應(ying)的(de)濃度(du);再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數;或用(yong)標(biao)準(zhun)物的(de)濃度(du)與 OD 值計算出(chu)標(biao)準(zhun)曲線的(de)直線回歸(gui)方(fang)程(cheng)式，將樣品(pin)的(de) OD 值代入(ru)方(fang)程(cheng)式，計(ji)算(suan)出(chu)樣品(pin)濃(nong)度(du)，再乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數，

即為(wei)樣品(pin)的(de)實際濃(nong)度(du)。

雞(ji)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)ELISA檢測試(shi)劑(ji)盒(he)註(zhu)意事(shi)項(xiang)

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)從(cong)冷藏環境(jing)中取(qu)出(chu)應在室(shi)溫平(ping)衡 15-30 分(fen)鐘(zhong)後方(fang)可(ke)使(shi)用(yong)，酶(mei)標(biao)包(bao)被(bei)板開(kai)封後如未(wei)用完，板條(tiao)應裝入(ru)密(mi)封袋(dai)中保(bao)存(cun)。

2. 濃洗(xi)滌液(ye)可(ke)能(neng)會(hui)有(you)結晶(jing)析出(chu)，稀(xi)釋(shi)時可(ke)在水(shui)浴(yu)中加(jia)溫助(zhu)溶(rong)，洗(xi)滌時不(bu)影(ying)響結果(guo)。

3. 各(ge)步(bu)加(jia)樣均應(ying)使(shi)用(yong)加(jia)樣器(qi)，並(bing)經常(chang)校對其(qi)準確(que)性(xing)，以避免試(shi)驗(yan)誤(wu)差(cha)。壹(yi)次(ci)加(jia)樣時(shi)間控制(zhi)在 5 分(fen)鐘(zhong)內(nei)，如標(biao)本(ben)數量多(duo)，推薦(jian)使(shi)用(yong)排(pai)槍(qiang)加(jia)樣。

4. 請(qing)每次(ci)測(ce)定(ding)的(de)同時做(zuo)標(biao)準(zhun)曲線，做復孔。如標(biao)本(ben)中待測(ce)物質含量(liang)過高(樣本(ben) OD 值大於標(biao)準(zhun)品(pin)孔孔的(de) OD 值)，請(qing)先(xian)用(yong)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)稀(xi)釋(shi)壹(yi)定(ding)倍數(n 倍)後再測(ce)定(ding)，計(ji)算(suan)時(shi)請(qing)後乘以(yi)總稀(xi)釋(shi)倍數(×n×5)。

5. 封板膜(mo)只限(xian)壹(yi)次(ci)性(xing)使(shi)用(yong)，以(yi)避免交(jiao)叉汙染。6.底(di)物請(qing)避光保(bao)存(cun)。

7. 嚴格(ge)按照(zhao)說明書(shu)的(de)操(cao)作進(jin)行(xing)，試(shi)驗(yan)結果(guo)判定(ding)必(bi)須(xu)以(yi)酶標(biao)儀(yi)讀(du)數為(wei)準.

8. 所有(you)樣品(pin)，洗(xi)滌液(ye)和各種(zhong)廢棄(qi)物都應(ying)按(an)傳(chuan)染物處理(li)。

9. 本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)同(tong)批號組分(fen)不(bu)得混(hun)用。

10. 如與英(ying)文說明書(shu)有(you)異，以英文說明書(shu)為(wei)準。

保(bao)存(cun)條件(jian)及有(you)效期

1. 試(shi)劑(ji)盒(he)保(bao)存(cun)：;2-8℃。

2. 有(you)效期：6 個月(yue)

雞(ji)硫(liu)酸(suan)類肝素(HS)ELISA檢測試(shi)劑(ji)盒(he)相(xiang)關產(chan)品(pin)推薦(jian)：