人(TREM-1)酶聯(lian)免疫分(fen)析 試劑(ji)盒(he) 人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)酶聯(lian)免疫分(fen)析 試劑(ji)盒(he)

　　本(ben)試劑(ji)盒(he)僅供研究(jiu)使(shi)用(yong)。

　　檢測範(fan)圍：

　　96T

　　1ng/L – 80ng/L

　　使(shi)用(yong)目的：

　　本(ben)試劑(ji)盒(he)用於(yu)測定(ding)人血漿及相(xiang)關(guan)液(ye)體樣(yang)本(ben)中髓系(xi)細胞(bao)觸(chu)發受體-1(TREM-1)含(han)量。

　　實驗原(yuan)理

　　本(ben)試劑(ji)盒(he)應用(yong)雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心法測定(ding)標本(ben)中人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)水(shui)平(ping)。用(yong)純(chun)化 的人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)抗(kang)體包被(bei)微孔板(ban)，制(zhi)成(cheng)固相(xiang)抗體，往(wang)包被(bei)單抗的微(wei)孔(kong)中 依次(ci)加入(ru)髓(sui)系細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)，再(zai)與(yu) HRP 標記的髓(sui)系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1) 抗(kang)體結合(he)，形(xing)成(cheng)抗體-抗(kang)原(yuan)-酶標抗體復(fu)合(he)物(wu)，經(jing)過(guo)洗(xi)滌後加底(di)物 TMB 顯色(se)。TMB 在(zai) HRP 酶的催(cui)化下(xia)轉化成(cheng)藍色(se)，並在(zai)酸的作用(yong)下(xia)轉化成(cheng)最終的黃(huang)色(se)。顏(yan)色的深(shen)淺和(he)樣(yang)品(pin)中的 髓(sui)系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)。用(yong)酶標儀在(zai) 450nm 波長(chang)下(xia)測定(ding)吸(xi)光度(du)(OD 值(zhi))， 通過(guo)標準曲線計(ji)算(suan)樣(yang)品(pin)中人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)濃度(du)。

　　ELISA試劑(ji)盒(he)組成(cheng)：

　　試劑(ji)盒(he)組成(cheng)48 孔配(pei)置(zhi)96 孔(kong)配(pei)置(zhi)保存(cun)

　　說明書1 份(fen)1 份(fen)

　　封(feng)板膜(mo)2 片(pian)(48)2 片(pian)(96)

　　密封(feng)袋1 個1 個

　　酶標包被(bei)板1×481×962-8℃保存(cun)

　　標準品(pin)：540μg/L0.5ml×1 瓶(ping)0.5ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　標準品(pin)稀(xi)釋液(ye)1.5ml×1 瓶(ping)1.5ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　酶標試劑(ji)3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye)3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　顯色(se)劑(ji) A 液(ye)3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　顯色(se)劑(ji) B 液(ye)3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　終止(zhi)液3 ml×1 瓶(ping)6 ml×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　濃縮洗(xi)滌液(20ml×20 倍(bei))×1 瓶(ping)(20ml×30 倍(bei))×1 瓶(ping)2-8℃保存(cun)

　　2. 加(jia)樣(yang)：分別(bie)設(she)空白(bai)孔(空白(bai)對照孔不加樣(yang)品(pin)及(ji)酶標試劑(ji)，其(qi)余各步(bu)操(cao)作相(xiang)同(tong))、標準孔、待測樣(yang)品(pin)孔(kong)。在(zai)酶標包被(bei)板上標準品(pin)準確加(jia)樣(yang) 50μl，待測樣(yang)品(pin)孔(kong)中先加(jia)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye) 40μl，然後(hou)再(zai)加待測樣(yang)品(pin) 10μl(樣(yang)品(pin)最(zui)終稀(xi)釋度(du)為 5 倍(bei))。加樣(yang)將樣(yang)品(pin)加(jia)於(yu)酶標板孔(kong)底(di) 部(bu)，盡(jin)量不觸(chu)及(ji)孔壁(bi)，輕(qing)輕晃(huang)動混勻(yun)。

　　3. 溫(wen)育：用封(feng)板膜(mo)封(feng)板後置(zhi) 37℃溫(wen)育(yu) 30 分(fen)鐘(zhong)。

　　4. 配液(ye)：將 30 倍(bei)濃縮洗(xi)滌液用蒸餾水(shui) 30 倍(bei)稀釋後(hou)備用

　　5. 洗(xi)滌：小(xiao)心(xin)揭掉(diao)封(feng)板膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體，甩幹，每(mei)孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液，靜置(zhi) 30 秒(miao)後棄(qi)去，如(ru)此

　　重(zhong)復(fu) 5 次，拍(pai)幹。

　　6. 加(jia)酶：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)酶標試劑(ji) 50μl，空白(bai)孔除(chu)外。

　　7. 溫(wen)育(yu)：操(cao)作同(tong) 3。

　　8. 洗(xi)滌：操(cao)作同(tong) 5。

　　9. 顯色(se)：每(mei)孔(kong)先(xian)加(jia)入顯色(se)劑(ji) A50μl，再(zai)加入(ru)顯色(se)劑(ji) B50μl，輕(qing)輕震(zhen)蕩混(hun)勻(yun)，37℃避(bi)光顯色(se)

　　10 分(fen)鐘(zhong).

　　10. 終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液 50μl，終止(zhi)反應(ying)(此時(shi)藍色(se)立(li)轉黃(huang)色(se))。

　　11. 測定(ding)：以(yi)空白(bai)孔調(tiao)零(ling)，450nm 波(bo)長依序測量各孔的吸(xi)光度(du)(OD 值(zhi))。 測定(ding)應(ying)在(zai)加終止(zhi)液後(hou) 15 分鐘(zhong)以內(nei)進行(xing)。

　　人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)酶聯(lian)免疫分(fen)析 試劑(ji)盒(he)操(cao)作程序總(zong)結：

　　計算(suan)

　　以標準物的濃度(du)為橫坐標，OD 值(zhi)為縱(zong)坐標，在(zai)坐標紙上繪出標準曲線，根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)的

　　OD 值(zhi)由標準曲線查出相(xiang)應(ying)的濃度(du);再乘以(yi)稀釋倍(bei)數;或用標準物的濃度(du)與 OD 值(zhi)計算(suan)出標準曲線的直線回歸(gui)方程式(shi)，將樣(yang)品(pin)的 OD 值(zhi)代(dai)入方程式(shi)，計算(suan)出樣(yang)品(pin)濃度(du)，再乘以(yi)稀釋

　　倍(bei)數，即(ji)為樣(yang)品(pin)的實際濃度(du)。

　　註意事(shi)項(xiang)

　　1.試劑(ji)盒(he)從(cong)冷(leng)藏(zang)環(huan)境(jing)中取(qu)出應(ying)在(zai)室(shi)溫平衡 15-30 分鐘(zhong)後方(fang)可使(shi)用(yong)，酶標包被(bei)板開封(feng)後如(ru)未

　　用(yong)完，板條(tiao)應(ying)裝入(ru)密封(feng)袋中保存(cun)。

　　2.濃洗(xi)滌液可能(neng)會(hui)有(you)結晶析出，稀(xi)釋時(shi)可在(zai)水浴中加溫(wen)助(zhu)溶(rong)，洗(xi)滌時不影(ying)響(xiang)結果。

　　3.各步(bu)加樣(yang)均應(ying)使(shi)用(yong)加樣(yang)器(qi)，並經常(chang)校(xiao)對(dui)其(qi)準確性，以避(bi)免試驗(yan)誤(wu)差。壹(yi)次加(jia)樣(yang)時間(jian)最(zui)好(hao) 控(kong)制(zhi)在(zai) 5 分鐘(zhong)內(nei)，如(ru)標本(ben)數(shu)量多(duo)，推薦使(shi)用(yong)排槍加樣(yang)。

　　4. 請每(mei)次(ci)測定(ding)的同(tong)時(shi)做(zuo)標準曲線，最(zui)好(hao)做(zuo)復(fu)孔。如(ru)標本(ben)中待測物(wu)質(zhi)含(han)量過高(樣(yang)本(ben) OD 值(zhi)大於(yu)標準品(pin)孔(kong)第壹(yi)孔的 OD 值(zhi))，請先(xian)用(yong)樣(yang)品(pin)稀(xi)釋液(ye)稀釋壹(yi)定倍(bei)數(n 倍(bei))後再測定(ding)， 計(ji)算(suan)時請最(zui)後乘(cheng)以總(zong)稀釋倍(bei)數(×n×5)。

　　5. 封(feng)板膜(mo)只限壹(yi)次性使(shi)用(yong)，以避免(mian)交叉汙(wu)染。

　　6.底(di)物請(qing)避光保存(cun)。

　　7.嚴(yan)格按照說明書的操(cao)作進行(xing)，試驗(yan)結果判定(ding)必(bi)須以(yi)酶標儀讀數(shu)為準.

　　8.所有(you)樣(yang)品(pin)，洗(xi)滌液和各種廢棄(qi)物都應按傳染物處(chu)理。

　　9.本(ben)試劑(ji)不(bu)同(tong)批號(hao)組(zu)分不(bu)得(de)混(hun)用(yong)。

　　人(TREM-1)酶聯(lian)免疫分(fen)析 試劑(ji)盒(he) 人髓系(xi)細(xi)胞觸(chu)發受體-1(TREM-1)酶聯(lian)免疫分(fen)析 試劑(ji)盒(he)

　　保存(cun)條(tiao)件及(ji)有(you)效(xiao)期(qi)

　　1.試劑(ji)盒(he)保存(cun)：;2-8℃。

　　2.有(you)效(xiao)期(qi)：6 個月