人HA tag標簽(HA tag)酶聯免疫分(fen)析試(shi)劑(ji)盒

　　本(ben)試(shi)劑(ji)盒僅供研(yan)究使(shi)用(yong)。 貨(huo)號(hao)：BS1537

　　檢(jian)測(ce)範(fan)圍：

　　96T

　　12pg/ml -420pg/ml

　　使(shi)用(yong)目的：

　　本(ben)試(shi)劑(ji)盒用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)人血(xue)清、血(xue)漿(jiang)及(ji)相(xiang)關液體(ti)樣本(ben)中(zhong) HA tag 標簽(HA tag)含量(liang)。

　　實(shi)驗(yan)原理

　　本(ben)試(shi)劑(ji)盒應用(yong)雙(shuang)抗(kang)體(ti)夾心(xin)法測定標本(ben)中(zhong)人 HA tag 標簽(HA tag)水平(ping)。用(yong)純(chun)化(hua)的人 HA tag 標簽(HA tag)抗體(ti)包被微(wei)孔板，制(zhi)成固相抗體(ti)，往包被單(dan)抗的微(wei)孔中(zhong)依(yi)次加入 HA tag 標簽(HA tag)，再與(yu) HRP 標記(ji)的 HA tag 標簽(HA tag)抗體(ti)結(jie)合(he)，形(xing)成抗(kang)體(ti)-抗原(yuan)-酶(mei)標抗體(ti)復合(he)物(wu)，經 過洗(xi)滌(di)後(hou)加底物 TMB 顯(xian)色(se)。TMB 在(zai) HRP 酶(mei)的催化(hua)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)藍(lan)色(se)，並(bing)在(zai)酸(suan)的作用(yong)下(xia)轉(zhuan) 化(hua)成(cheng)最(zui)終的黃色。顏色的深淺和樣品(pin)中的 HA tag 標簽(HA tag)呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)標儀在 450nm 波(bo)長(chang)下(xia)測(ce)定(ding)吸光度(OD 值(zhi))，通(tong)過標準(zhun)曲線(xian)計(ji)算(suan)樣品(pin)中人 HA tag 標簽(HA tag)濃度。

　　試劑(ji)盒組(zu)成(cheng)

　　標本(ben)要求

　　1.標本(ben)采(cai)集(ji)後(hou)盡早進行提(ti)取，提(ti)取按(an)相(xiang)關(guan)文(wen)獻(xian)進行，提(ti)取後(hou)應盡快進行實(shi)驗(yan)。若不(bu)能(neng) 馬上(shang)進行試(shi)驗(yan)，可將(jiang)標本(ben)放(fang)於(yu)-20℃保存(cun)，但應避免反復凍融

　　2.不(bu)能(neng)檢測(ce)含 NaN3 的樣品(pin)，因(yin) NaN3 抑(yi)制辣根(gen)過氧(yang)化(hua)物(wu)酶(mei)的(HRP)活性(xing)。

　　操(cao)作步驟(zhou)

　　1. 標準(zhun)品(pin)的稀釋：本(ben)試(shi)劑(ji)盒提(ti)供原(yuan)倍標準(zhun)品(pin)壹(yi)支，用(yong)戶可按(an)照(zhao)下(xia)列(lie)圖(tu)表(biao)在小(xiao)試管(guan)中進行稀(xi) 釋(shi)。

　　400pg/ml

　　5 號標準(zhun)品(pin)

　　150μl 的原倍標準(zhun)品(pin)加入 150μl 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) 200pg/ml

　　4 號標準(zhun)品(pin)

　　150μl 的 5 號標準(zhun)品(pin)加入 150μl 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) 100pg/ml

　　3 號標準(zhun)品(pin)

　　150μl 的 4 號標準(zhun)品(pin)加入 150μl 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) 50pg/ml

　　2 號標準(zhun)品(pin)

　　150μl 的 3 號標準(zhun)品(pin)加入 150μl 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye) 25pg/ml

　　1 號標準(zhun)品(pin)

　　150μl 的 2 號標準(zhun)品(pin)加入 150μl 標準(zhun)品(pin)稀釋(shi)液(ye)

　　2. 加樣：分(fen)別設(she)空白(bai)孔(空(kong)白對(dui)照(zhao)孔不(bu)加樣品(pin)及(ji)酶(mei)標試劑(ji)，其(qi)余各步操(cao)作相同)、標準(zhun)孔、待測(ce)樣品(pin)孔。在(zai)酶(mei)標包被板上(shang)標準(zhun)品(pin)準(zhun)確(que)加樣 50μl，待測(ce)樣品(pin)孔中(zhong)先(xian)加樣品(pin)稀釋(shi)液(ye) 40μl， 然後(hou)再加待測(ce)樣品(pin) 10μl(樣品(pin)最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品(pin)加於酶標板孔(kong)底部(bu)，盡 量(liang)不(bu)觸及(ji)孔(kong)壁，輕(qing)輕(qing)晃(huang)動(dong)混勻。

　　3. 溫(wen)育(yu)：用(yong)封(feng)板膜(mo)封板後(hou)置 37℃溫(wen)育(yu) 30 分(fen)鐘(zhong)。

　　4. 配(pei)液：將(jiang) 30 倍濃縮洗(xi)滌(di)液(ye)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui) 30 倍(bei)稀(xi)釋(shi)後(hou)備用(yong)

　　5. 洗(xi)滌(di)：小(xiao)心(xin)揭(jie)掉(diao)封板膜(mo)，棄去液(ye)體(ti)，甩幹，每(mei)孔加滿洗(xi)滌(di)液(ye)，靜(jing)置(zhi) 30 秒後棄去，如此 重(zhong)復(fu) 5 次，拍(pai)幹(gan)。

　　6. 加酶：每(mei)孔加入酶標試劑(ji) 50μl，空(kong)白孔除(chu)外(wai)。

　　7. 溫(wen)育(yu)：操作同 3。

　　8. 洗(xi)滌(di)：操(cao)作同 5。

　　9. 顯(xian)色(se)：每(mei)孔先(xian)加入顯(xian)色(se)劑(ji) A50μl，再加入顯(xian)色(se)劑(ji) B50μl，輕(qing)輕(qing)震(zhen)蕩(dang)混勻，37℃避(bi)光顯(xian)色(se)

　　10 分(fen)鐘(zhong).

　　10. 終止：每(mei)孔加終止液 50μl，終止反應(此時藍(lan)色(se)立轉黃色)。

　　11. 測(ce)定(ding)：以空白(bai)孔調(tiao)零(ling)，450nm 波(bo)長(chang)依(yi)序測(ce)量(liang)各孔的吸光度(OD 值(zhi))。 測定(ding)應在加終止 液後 15 分(fen)鐘(zhong)以內進行。

　　操(cao)作程序總(zong)結(jie)：

　　人HA tag標簽(HA tag)酶聯免疫分(fen)析試(shi)劑(ji)盒計(ji)算(suan)

　　以標準(zhun)物的濃度為橫坐標，OD 值(zhi)為縱坐(zuo)標，在坐標紙上(shang)繪(hui)出(chu)標準(zhun)曲線(xian)，根(gen)據(ju)樣品(pin)的OD 值(zhi)由標準(zhun)曲線(xian)查(zha)出(chu)相應的濃度;再乘(cheng)以稀釋(shi)倍數(shu);或用(yong)標準(zhun)物的濃度與(yu) OD 值(zhi)計(ji)算(suan)出(chu)標

　　準(zhun)曲線(xian)的直線(xian)回(hui)歸(gui)方程(cheng)式，將(jiang)樣品(pin)的 OD 值(zhi)代入方程式，計(ji)算(suan)出(chu)樣品(pin)濃度，再乘(cheng)以稀釋(shi)倍數(shu)，

　　即(ji)為樣品(pin)的實(shi)際(ji)濃度。

　　註意(yi)事項(xiang)

　　1.試劑(ji)盒從冷藏(zang)環境中取出(chu)應在室溫(wen)平(ping)衡(heng) 1 小(xiao)時後(hou)方(fang)可使(shi)用(yong)，酶(mei)標包被板開(kai)封(feng)後(hou)如(ru)未(wei)用(yong)完(wan)， 板條(tiao)應裝(zhuang)入密封袋中(zhong)保存(cun)。

　　2.濃洗(xi)滌(di)液(ye)可能(neng)會有結(jie)晶(jing)析出(chu)，稀釋(shi)時可在(zai)水浴中(zhong)加溫(wen)助溶，洗(xi)滌(di)時不(bu)影響(xiang)結(jie)果(guo)。

　　3.各步加樣均應使用(yong)加樣器，並(bing)經常(chang)校對其(qi)準(zhun)確(que)性(xing)，以避免試驗誤差(cha)。壹(yi)次加樣時間(jian)最(zui)好(hao) 控(kong)制在 5 分(fen)鐘(zhong)內，如標本(ben)數(shu)量(liang)多，推薦使用(yong)排(pai)槍(qiang)加樣。

　　4. 請每(mei)次測定(ding)的同時做(zuo)標準(zhun)曲線(xian)，最(zui)好(hao)做(zuo)復孔。如(ru)標本(ben)中(zhong)待測(ce)物(wu)質含(han)量(liang)過高(gao)(樣本(ben) OD 值(zhi) 大(da)於(yu)標準(zhun)品(pin)孔第(di)壹(yi)孔的 OD 值(zhi))，請先(xian)用(yong)樣品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹(yi)定倍(bei)數(n 倍(bei))後再測定，計(ji) 算(suan)時請(qing)最(zui)後(hou)乘(cheng)以總(zong)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)(×n×5)。

　　5. 封板膜(mo)只限壹(yi)次性(xing)使(shi)用(yong)，以避免交叉汙(wu)染(ran)。

　　6.底物請避光保存(cun)。

　　7.嚴(yan)格按(an)照(zhao)說(shuo)明書(shu)的操作進行，試(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)判(pan)定必(bi)須以酶標儀讀數為準(zhun).

　　8.所有樣品(pin)，洗(xi)滌(di)液(ye)和各種(zhong)廢(fei)棄(qi)物(wu)都應按(an)傳(chuan)染(ran)物處理。

　　9.本(ben)試(shi)劑(ji)不(bu)同批(pi)號(hao)組(zu)分(fen)不(bu)得混用(yong)。

　　保存(cun)條(tiao)件(jian)及(ji)有效(xiao)期

　　1.試劑(ji)盒保存(cun)：;2-8℃。

　　2.有效(xiao)期：6 個月(yue)

　　本(ben)生(sheng)壹(yi)直視(shi)質量(liang)控(kong)制為企業(ye)的生命，追求(qiu)企業(ye)競(jing)爭(zheng)力的不(bu)斷(duan)提(ti)升。公(gong)司在(zai)經營中(zhong)始終秉承：遵紀守(shou)法，嚴(yan)於(yu)律(lv)己(ji)，寬仁以待，敢於(yu)承擔(dan)的企業(ye)精神作為標準(zhun)，以過硬(ying)的質量(liang)和優(you)良(liang)的服務(wu)來維(wei)護(hu)和拓(tuo)展市場(chang)，較大(da)限(xian)度的滿足客戶的需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶的共贏(ying)，是(shi)我(wo)們(men)的發(fa)展目標。本(ben)生(sheng)!您(nin)信(xin)任的合作夥伴。我(wo)們(men)願與(yu)您(nin)真誠(cheng)合(he)作，共創(chuang)美(mei)好的未來。