人谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物酶(mei)4(GPX4)ELISA檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒技(ji)術說明(ming)書

　　BS-9843 人谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物酶(mei)4(GPX4)ELISA試劑(ji)盒

　　產品概(gai)述

　　本試劑(ji)盒采(cai)用(yong)雙(shuang)抗(kang)體壹步(bu)夾心酶(mei)聯免(mian)疫吸附法(fa)(ELISA)‌，用(yong)於體外定量檢(jian)測(ce)人血(xue)清(qing)、血漿(jiang)、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細胞(bao)裂解(jie)液(ye)及(ji)細胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)等樣(yang)本中(zhong)的(de)谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物酶(mei)4(GPX4)濃度。GPX4是谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物酶(mei)家族的關(guan)鍵成員(yuan)，通過催(cui)化(hua)還原(yuan)型谷胱(guang)甘(gan)肽(GSH)清(qing)除脂(zhi)質(zhi)過氧(yang)化(hua)物，在抑制鐵(tie)死亡(wang)、維持(chi)細胞(bao)膜完(wan)整(zheng)性及(ji)抗(kang)氧(yang)化(hua)應激中發揮核心作(zuo)用(yong)‌。

　　檢(jian)測(ce)原(yuan)理

　　雙(shuang)抗(kang)體夾心法(fa)‌：包(bao)被(bei)抗(kang)體與樣(yang)本中(zhong)GPX4結(jie)合(he)，生(sheng)物素標(biao)記抗(kang)體形成復(fu)合(he)物(wu)，辣(la)根過氧(yang)化(hua)物酶(mei)(HRP)標(biao)記的(de)鏈黴親(qin)和素催化(hua)顯色反應，顯色強(qiang)度與樣(yang)本中(zhong)GPX4濃度成正(zheng)比(bi)‌。

　　特(te)異(yi)性‌：可(ke)特(te)異(yi)性識(shi)別GPX4，與類(lei)似物(wu)無(wu)交叉反(fan)應，確(que)保檢(jian)測(ce)準(zhun)確(que)性‌。

　　試劑(ji)盒組(zu)成

　　組(zu)分(fen) 規(gui)格/描(miao)述(shu)

　　預包(bao)被(bei)微孔(kong)板 96孔(kong)板，含(han)抗(kang)人GPX4抗(kang)體

　　標(biao)準品(pin) 凍(dong)幹(gan)粉，重組(zu)人GPX4蛋白(bai)，臨(lin)用(yong)前(qian)用(yong)稀釋液(ye)復(fu)溶(rong)

　　生物(wu)素標(biao)記抗(kang)體 液體，HRP標(biao)記抗(kang)人GPX4抗(kang)體

　　顯色(se)底(di)物(TMB) 液(ye)體，3,3',5,5'-四甲(jia)基聯苯(ben)胺(an)溶(rong)液

　　終止(zhi)液 2M硫(liu)酸(suan)溶(rong)液

　　洗(xi)滌緩沖(chong)液 20×濃縮(suo)液，含(han)吐溫(wen)-20

　　樣(yang)本稀(xi)釋(shi)液(ye) 緩沖(chong)液，用(yong)於稀釋(shi)高(gao)濃度樣(yang)本

　　封(feng)板膜 透明(ming)，用(yong)於微孔(kong)板密封

　　樣(yang)本處(chu)理與保存(cun)

　　樣(yang)本類(lei)型‌：血清(qing)、血漿(jiang)、組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)、細胞(bao)裂解(jie)液(ye)、細胞(bao)培養(yang)上(shang)清(qing)等‌。

　　處(chu)理方法(fa)‌：

　　血清(qing)/血漿(jiang)：室(shi)溫凝固後離心(3000 rpm，10分(fen)鐘(zhong))，取上(shang)清(qing)。

　　組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：用(yong)生理鹽水(shui)制(zhi)備(bei)10%勻漿液(ye)，離心取上(shang)清(qing)。

　　細胞(bao)裂解(jie)液(ye)：裂解(jie)後離心(15000 rpm，10分(fen)鐘(zhong))，取上(shang)清(qing)。

　　保存(cun)條(tiao)件(jian)‌：短期(qi)(≤7天)2-8℃保存(cun)，長(chang)期(qi)(>7天)需(xu)分(fen)裝(zhuang)-20℃凍(dong)存(cun)，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)‌。

　　操(cao)作(zuo)步(bu)驟

　　標(biao)準品(pin)稀(xi)釋(shi)‌：用(yong)樣(yang)本稀(xi)釋(shi)液(ye)將標(biao)準品(pin)依次稀(xi)釋(shi)為1000 pg/mL、500 pg/mL、250 pg/mL、125 pg/mL、62.5 pg/mL、31.25 pg/mL、15.63 pg/mL，0 pg/mL為空白(bai)對(dui)照‌。

　　加(jia)樣(yang)‌：每孔(kong)加(jia)入(ru)100 μL標(biao)準品(pin)或(huo)樣(yang)本，37℃孵育90分(fen)鐘(zhong)。

　　洗滌(di)‌：棄去(qu)孔(kong)內(nei)液體，每孔(kong)加(jia)滿洗滌液(ye)，靜(jing)置30秒後棄(qi)去(qu)，重(zhong)復5次，拍(pai)幹(gan)。

　　加(jia)生物素標(biao)記抗(kang)體‌：每孔(kong)加(jia)入(ru)100 μL生物(wu)素標(biao)記抗(kang)體，37℃孵育60分(fen)鐘(zhong)。

　　加(jia)顯色底物(wu)‌：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)90 μL TMB底物(wu)，37℃避(bi)光孵育15-30分(fen)鐘(zhong)。

　　終止(zhi)反應‌：每孔(kong)加(jia)入(ru)50 μL終止(zhi)液，混勻後立(li)即(ji)測定吸(xi)光度(du)。

　　結果計(ji)算(suan)

　　儀(yi)器設(she)置‌：酶(mei)標(biao)儀(yi)波長(chang)450 nm(參(can)考波長630 nm)。

　　數據處理‌：以標(biao)準品(pin)濃度(pg/mL)為橫坐(zuo)標(biao)，OD值為(wei)縱(zong)坐(zuo)標(biao)，繪(hui)制(zhi)標(biao)準曲(qu)線。樣(yang)本濃度通過曲(qu)線方程計(ji)算(suan)，乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數‌。

　　靈(ling)敏(min)度‌：7.69 pg/mL，檢(jian)測(ce)範圍15.62-1000 pg/mL‌。

　　註意(yi)事(shi)項(xiang)

　　交叉反(fan)應‌：不與GPX1、GPX2、GPX3等(deng)類(lei)似物(wu)發生交叉反(fan)應‌。

　　操(cao)作(zuo)規(gui)範‌：

　　洗(xi)滌(di)需(xu)幹(gan)凈(jing)，避(bi)免(mian)殘(can)留(liu)液(ye)體影響(xiang)結(jie)果。

　　顯(xian)色時(shi)間(jian)控(kong)制(zhi)在15-30分(fen)鐘(zhong)，避(bi)免(mian)過度(du)顯色導致(zhi)數(shu)據偏差(cha)。

　　樣(yang)本避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)，以防蛋白(bai)降(jiang)解(jie)。

　　質(zhi)量控(kong)制(zhi)‌：建(jian)議每(mei)批(pi)次實(shi)驗設置雙(shuang)孔(kong)復(fu)測(ce)，CV值(zhi)<10%為(wei)合(he)格‌。

　　儲(chu)存(cun)條(tiao)件(jian)

　　未(wei)開(kai)封(feng)試劑(ji)盒：2-8℃避(bi)光保存(cun)，有效期(qi)6個(ge)月。

　　開封(feng)後：標(biao)準品(pin)、抗(kang)體、底物(wu)等(deng)組分(fen)按(an)說明(ming)書要(yao)求分(fen)裝(zhuang)保存(cun)，避(bi)免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)‌。

　　本說明(ming)書僅(jin)用(yong)於科研(yan)用(yong)途(tu)，不適(shi)用(yong)於臨床(chuang)診(zhen)斷。操(cao)作(zuo)前(qian)請(qing)仔細閱(yue)讀完(wan)整(zheng)說明(ming)書，並(bing)遵(zun)守(shou)實(shi)驗室(shi)安全(quan)規(gui)範。

　　註：供科研(yan)使(shi)用(yong)，以上(shang)資(zi)料(liao)供參(can)考。

　　人谷胱(guang)甘(gan)肽過氧(yang)化(hua)物酶(mei)4(GPX4)ELISA試劑(ji)盒本(ben)生壹直(zhi)視質(zhi)量控(kong)制(zhi)為(wei)企(qi)業的(de)生(sheng)命，追(zhui)求企(qi)業競爭(zheng)力(li)的不(bu)斷(duan)提(ti)升。公司(si)在經營中始(shi)終秉(bing)承(cheng)：遵(zun)紀(ji)守法(fa)，嚴於律己(ji)，寬仁以(yi)待(dai)，敢(gan)於承(cheng)擔(dan)的(de)企(qi)業精神作為標(biao)準，以(yi)過硬(ying)的(de)質(zhi)量和優良的服(fu)務(wu)來維護(hu)和拓展市場，較大限(xian)度(du)的(de)滿足(zu)客(ke)戶(hu)的(de)需(xu)求。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共贏(ying)，是(shi)我(wo)們的發展目標(biao)。