微生(sheng)物(wu)木(mu)質素(Lignin)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)技(ji)術說明(ming)書(shu)

　　BS-5184微生(sheng)物(wu)木(mu)質素(Lignin)ELISA試(shi)劑盒(he)

　　1. 產品(pin)概(gai)述

　　本試(shi)劑盒(he)采用(yong)雙抗體(ti)夾(jia)心酶(mei)聯(lian)免疫吸附法(fa)(ELISA)，專(zhuan)用(yong)於定量檢(jian)測(ce)微生(sheng)物(wu)發酵(jiao)液、細(xi)胞裂解液等(deng)樣(yang)本中的(de)木(mu)質素含(han)量。木(mu)質素是微生(sheng)物(wu)代謝(xie)或(huo)降(jiang)解植物(wu)細胞壁過程(cheng)中(zhong)產生(sheng)的(de)芳香(xiang)族聚(ju)合物(wu)，其含(han)量變化(hua)可反(fan)映微生(sheng)物(wu)對(dui)木(mu)質纖維(wei)素的(de)利(li)用(yong)效率‌。

　　2. 檢(jian)測(ce)原(yuan)理(li)

　　固(gu)相(xiang)抗(kang)體(ti)包(bao)被微孔(kong)板捕(bu)獲(huo)樣(yang)本中的(de)木(mu)質素，再加入(ru)酶(mei)標記檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)形(xing)成"抗體(ti)-抗(kang)原-酶(mei)標抗體(ti)"復合物(wu)。洗(xi)滌後加(jia)入(ru)TMB底(di)物(wu)顯色(se)，450nm波長(chang)下測(ce)定吸光度(du)，吸光度(du)值(zhi)與(yu)木(mu)質素濃(nong)度呈(cheng)正(zheng)相(xiang)關(guan)‌。

　　3. 試(shi)劑盒(he)組(zu)成

　　組(zu)分 96孔(kong)配(pei)置 48孔(kong)配(pei)置 保存條件

　　微孔(kong)酶(mei)標板 12孔(kong)×8條 12孔×4條 2-8℃密封幹燥

　　標準(zhun)品(木(mu)質素) 0.5mL×6管(guan) 0.5mL×6管 -20℃避(bi)光

　　樣(yang)本稀(xi)釋(shi)液 6mL 3mL 2-8℃

　　酶(mei)標抗體(ti)-HRP 10mL 5mL 2-8℃避(bi)光

　　20×洗(xi)滌緩(huan)沖(chong)液 25mL 15mL 室(shi)溫

　　TMB顯色(se)液 9mL 4.5mL 2-8℃避(bi)光

　　終(zhong)止(zhi)液 9mL 4.5mL 室(shi)溫

　　封板膜(mo) 2張(zhang) 2張(zhang) 室(shi)溫

　　4. 樣本處理(li)

　　4.1 微生(sheng)物(wu)發酵(jiao)液

　　8000×g離(li)心(xin)10分鐘去(qu)除菌體(ti)

　　取(qu)上(shang)清液立即檢測(ce)或(huo)-80℃凍存(cun)(避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong))

　　4.2 細(xi)胞裂解液

　　超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)後12000×g離(li)心(xin)15分鐘

　　取(qu)上(shang)清液用(yong)PBS稀(xi)釋(shi)10倍(bei)後檢(jian)測(ce)

　　4.3 註意(yi)事(shi)項

　　樣本渾濁(zhuo)需0.22μm濾(lv)膜過濾(lv)

　　避(bi)免使(shi)用含(han)疊氮(dan)鈉的樣本(抑(yi)制(zhi)HRP活性(xing))

　　5. 實驗步(bu)驟(zhou)

　　5.1 試(shi)劑準(zhun)備

　　洗(xi)滌緩(huan)沖(chong)液：蒸餾(liu)水(shui)稀(xi)釋(shi)20倍(bei)至(zhi)1×工(gong)作液

　　標準(zhun)品梯(ti)度(du)：按說明(ming)書(shu)稀(xi)釋(shi)至(zhi)0-60μg/mL

　　5.2 加(jia)樣

　　標準(zhun)品/樣(yang)本各(ge)50μL加(jia)入(ru)對(dui)應(ying)微孔(kong)

　　37℃孵育30分(fen)鐘

　　5.3 洗(xi)滌

　　每(mei)孔(kong)加(jia)300μL洗(xi)滌液，靜(jing)置1分(fen)鐘後拍幹

　　重復5次

　　5.4 顯色(se)

　　每(mei)孔(kong)加(jia)酶(mei)標抗體(ti)100μL，37℃孵育30分(fen)鐘

　　洗(xi)滌後加(jia)TMB顯色(se)液90μL，避(bi)光15分(fen)鐘

　　加(jia)終(zhong)止(zhi)液50μL終(zhong)止(zhi)反(fan)應(ying)

　　5.5 測(ce)定

　　450nm波長測(ce)定OD值(參(can)考波(bo)長(chang)630nm)

　　6. 結(jie)果(guo)計(ji)算(suan)

　　以(yi)標準(zhun)品濃(nong)度為橫(heng)坐(zuo)標，OD值為縱(zong)坐標繪制(zhi)標準(zhun)曲線。樣(yang)本濃度(du)通(tong)過曲線方程(cheng)計(ji)算(suan)，超(chao)出範(fan)圍需(xu)稀(xi)釋(shi)後復測(ce)。

　　7. 性(xing)能(neng)指(zhi)標

　　參(can)數 指(zhi)標

　　靈(ling)敏(min)度 ≤0.5μg/mL

　　檢(jian)測(ce)範(fan)圍 1-60μg/mL

　　精(jing)密(mi)度 批(pi)內(nei)CV<8%，批間(jian)CV<12%

　　回收(shou)率(lv) 85%-115%

　　8. 註意(yi)事(shi)項

　　試(shi)劑盒(he)使(shi)用前(qian)需室溫平衡30分鐘

　　不同(tong)批(pi)號(hao)試(shi)劑不可(ke)混(hun)用(yong)

　　終(zhong)止(zhi)液含(han)強(qiang)酸，操作時(shi)佩(pei)戴防護裝備(bei)

　　顯色(se)液避(bi)免(mian)接(jie)觸金(jin)屬離(li)子(zi)

　　微量移(yi)液器(qi)需(xu)校(xiao)準(zhun)，避免(mian)交叉(cha)汙染

　　9. 有效期

　　6個月(yue)(2-8℃保存)

　　10. 聲(sheng)明(ming)

　　本產品(pin)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用。

　　註：以(yi)上(shang)僅(jin)供參(can)考，本試(shi)劑僅(jin)供科研(yan)使(shi)用，不作為實際(ji)數(shu)據，實驗需(xu)嚴格(ge)遵循(xun)說明(ming)或(huo)咨(zi)詢(xun)技(ji)術老師(shi)。

　　微生(sheng)物(wu)木(mu)質素(Lignin)ELISA檢(jian)測(ce)試(shi)劑盒(he)技(ji)術說明(ming)書(shu) 本生(sheng)壹(yi)直(zhi)視質量控(kong)制(zhi)為企(qi)業(ye)的生(sheng)命(ming)，追求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭力(li)的不斷(duan)提(ti)升。公司(si)在(zai)經營中始(shi)終(zhong)秉(bing)承：遵紀守法(fa)，嚴於律(lv)己，寬仁(ren)以(yi)待(dai)，敢於承擔的(de)企(qi)業(ye)精神(shen)作為標準(zhun)，以(yi)過硬(ying)的質量和(he)優(you)良(liang)的服(fu)務來維(wei)護(hu)和(he)拓(tuo)展(zhan)市(shi)場(chang)，較(jiao)大限(xian)度的(de)滿(man)足(zu)客(ke)戶的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶的(de)共贏，是我們(men)的(de)發(fa)展(zhan)目(mu)標。本生(sheng)!您(nin)信任(ren)的(de)合作夥(huo)伴。我們(men)願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠(cheng)合作，共創(chuang)美好(hao)的未來。本生(sheng)試(shi)劑盒(he)