人白細(xi)胞(bao)介素22(IL-22)ELISA檢測試(shi)劑(ji)盒(he)技術(shu)說明書

　　BS-1649 人白細(xi)胞(bao)介素22(IL-22)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)

　　壹(yi)、產品(pin)概(gai)述(shu)

　　本試(shi)劑(ji)盒(he)采用(yong)雙抗(kang)體夾(jia)心酶(mei)聯(lian)免疫吸附法(fa)(ELISA)定量檢測人血清(qing)、血(xue)漿(jiang)或(huo)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)液中(zhong)白細(xi)胞(bao)介素22(IL-22)的(de)濃(nong)度。IL-22是(shi)壹(yi)種由活化的(de)T細(xi)胞(bao)、NK細(xi)胞(bao)等(deng)分(fen)泌的(de)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)，在炎(yan)癥(zheng)反應、組織修(xiu)復(fu)及(ji)免疫調(tiao)節中(zhong)發揮(hui)重(zhong)要(yao)作用‌。本試(shi)劑(ji)盒(he)具有高(gao)靈敏(min)度、高(gao)特(te)異(yi)性(xing)和(he)重復(fu)性好的(de)特(te)點，適用於(yu)科研實(shi)驗和臨(lin)床(chuang)檢測。

　　二、檢測原(yuan)理(li)

　　包被抗(kang)體‌：抗(kang)人IL-22單克(ke)隆抗(kang)體預(yu)包被於微孔(kong)板，與(yu)樣(yang)本中(zhong)IL-22結合形成固相(xiang)復(fu)合物(wu)。

　　生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體‌：加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)人IL-22抗(kang)體，與(yu)IL-22結(jie)合形成夾(jia)心結構(gou)。

　　酶(mei)結(jie)合物(wu)‌：加(jia)入(ru)辣(la)根(gen)過氧化(hua)物(wu)酶(mei)(HRP)標(biao)記(ji)的(de)鏈(lian)黴(mei)親和素(su)，與(yu)生(sheng)物(wu)素(su)特(te)異性結合。

　　顯(xian)色反應‌：加(jia)入(ru)底(di)物(wu)(TMB)顯(xian)色，顏色深(shen)淺與(yu)IL-22濃(nong)度成正(zheng)比。

　　終(zhong)止(zhi)與(yu)測定‌：加(jia)入(ru)終(zhong)止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反應，在450nm波(bo)長(chang)下測定吸光度(OD值(zhi))，通(tong)過標(biao)準(zhun)曲線(xian)計算(suan)樣(yang)本濃度‌。

　　三(san)、試(shi)劑(ji)盒(he)組成(cheng)

　　組分(fen) 規格 數(shu)量

　　預(yu)包被微孔(kong)板 96孔(kong)/板 1塊(kuai)

　　標(biao)準(zhun)品(pin)(凍(dong)幹(gan)) 2ng/支 2支

　　標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液 10mL 1瓶

　　生物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體 6mL 1瓶(ping)

　　HRP標(biao)記(ji)鏈(lian)黴(mei)親和素(su) 6mL 1瓶

　　洗滌(di)液(20×) 50mL 1瓶

　　顯(xian)色液(TMB) 11mL 1瓶

　　終(zhong)止(zhi)液(2M H₂SO₄) 6mL 1瓶

　　四(si)、樣(yang)本要求

　　血清(qing)/血(xue)漿(jiang)‌：采集(ji)後室(shi)溫靜(jing)置30分(fen)鐘(zhong)，離心(2000×g，15分鐘(zhong))取上清(qing)，-20℃或(huo)-80℃保存，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。

　　細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)‌：離心去(qu)除(chu)細(xi)胞(bao)碎(sui)片(pian)，立即(ji)檢測或(huo)分(fen)裝保存。

　　註(zhu)意(yi)事項‌：樣(yang)本中(zhong)避免含疊氮(dan)鈉(NaN₃)或(huo)EDTA等(deng)防(fang)腐劑(ji)，以(yi)免影(ying)響檢測結(jie)果(guo)‌。

　　五、操(cao)作步驟

　　標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)‌：用(yong)標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)液將(jiang)凍(dong)幹(gan)標(biao)準(zhun)品(pin)復(fu)溶為2ng/mL，按(an)倍(bei)比稀(xi)釋(shi)(如(ru)2ng/mL、1ng/mL、0.5ng/mL、0.25ng/mL、0.125ng/mL、0.0625ng/mL)，0ng/mL孔(kong)為空(kong)白(bai)對照。

　　加(jia)樣(yang)‌：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100μL標(biao)準(zhun)品(pin)或(huo)樣(yang)本，37℃孵(fu)育90分鐘(zhong)。

　　洗滌(di)‌：棄去(qu)孔(kong)內(nei)液體，用(yong)洗滌(di)液洗板3次，每(mei)次浸(jin)泡1分鐘(zhong)。

　　加(jia)生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體‌：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100μL，37℃孵(fu)育60分鐘(zhong)。

　　加(jia)酶(mei)結(jie)合物(wu)‌：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)100μL，37℃孵(fu)育30分鐘(zhong)。

　　顯(xian)色與(yu)終(zhong)止(zhi)‌：每(mei)孔(kong)加(jia)入(ru)90μL TMB，避(bi)光顯(xian)色15分鐘(zhong)，加(jia)入(ru)50μL終(zhong)止(zhi)液。

　　測定‌：450nm波長(chang)下讀(du)取OD值(zhi)，繪(hui)制(zhi)標(biao)準(zhun)曲線(xian)並計算(suan)樣(yang)本濃度‌。

　　六、結(jie)果(guo)計(ji)算(suan)

　　以(yi)標(biao)準(zhun)品(pin)濃度(du)為橫(heng)坐(zuo)標(biao)，OD值(zhi)為縱(zong)坐(zuo)標(biao)，繪(hui)制(zhi)標(biao)準(zhun)曲線(xian)。

　　根據樣(yang)本OD值(zhi)在標(biao)準(zhun)曲線(xian)上對應(ying)濃(nong)度，乘以(yi)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數(如(ru)樣(yang)本未稀(xi)釋(shi)則(ze)乘(cheng)1)。

　　建議使用(yong)專(zhuan)業(ye)軟件(jian)(如(ru)ELISA Calc)進(jin)行曲(qu)線(xian)擬(ni)合和濃度計(ji)算(suan)。

　　七(qi)、性能(neng)指(zhi)標(biao)

　　靈敏(min)度‌：檢測限為0.015ng/mL。

　　精密(mi)度‌：批內(nei)變異系(xi)數(CV)<10%，批間(jian)CV<15%。

　　線(xian)性範圍(wei)‌：0.0625-2ng/mL，相關系(xi)數(R²)>0.99。

　　回收率‌：對高(gao)、中(zhong)、低濃(nong)度樣(yang)本進行加(jia)標(biao)回收，回收率在85%-115%之(zhi)間(jian)。

　　特(te)異(yi)性(xing)‌：不(bu)與(yu)IL-10、IL-17、IL-23等(deng)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)發生交叉反應。

　　八、註(zhu)意(yi)事項

　　試(shi)劑(ji)保存‌：未(wei)開封(feng)試(shi)劑(ji)盒(he)2-8℃保存，有(you)效期(qi)12個月(yue);開封(feng)後標(biao)準(zhun)品(pin)、生物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體、HRP標(biao)記(ji)物(wu)需分裝凍(dong)存(cun)，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融(rong)。

　　操(cao)作規範‌：移(yi)液時(shi)避免產生氣泡(pao)，洗滌(di)時(shi)確(que)保孔(kong)內(nei)液體棄(qi)盡。

　　安(an)全(quan)防護‌：終(zhong)止(zhi)液含強酸(suan)，操(cao)作時(shi)佩(pei)戴(dai)手(shou)套(tao)和護目(mu)鏡(jing)。

　　質(zhi)量(liang)控(kong)制‌：每(mei)批次實驗需設(she)置(zhi)雙孔(kong)復(fu)檢，OD值(zhi)異(yi)常時(shi)需重復(fu)檢測。

　　九(jiu)、常見(jian)問題分(fen)析(xi)

　　問題現象(xiang) 可能(neng)原(yuan)因(yin) 解決(jue)方案(an)

　　標(biao)準(zhun)曲線(xian)線(xian)性差(cha) 標(biao)準(zhun)品(pin)稀(xi)釋(shi)錯(cuo)誤(wu) 重新配制標(biao)準(zhun)品(pin)，確(que)保倍(bei)比稀(xi)釋(shi)

　　樣(yang)本OD值(zhi)過高(gao) 樣(yang)本濃度超(chao)出(chu)檢測範圍(wei) 稀(xi)釋(shi)樣(yang)本後重新檢測

　　顯(xian)色過淺或(huo)未(wei)顯(xian)色 酶(mei)結(jie)合物(wu)失(shi)活 檢查試(shi)劑(ji)有(you)效期(qi)，更換新試(shi)劑(ji)

　　洗滌(di)後孔(kong)內(nei)有殘(can)留(liu)液體 洗滌(di)次數不足或(huo)力(li)度不夠 增加(jia)洗滌(di)次數，用力(li)拍幹(gan)孔(kong)板

　　註(zhu)：以(yi)上僅(jin)供參考(kao)，本試(shi)劑(ji)僅(jin)供科研使(shi)用，不(bu)作為實(shi)際(ji)數據，實(shi)驗需嚴格遵循(xun)說明或(huo)咨(zi)詢(xun)技術(shu)老(lao)師(shi)。

　　天(tian)津本生壹(yi)直(zhi)視(shi)質(zhi)量控(kong)制為企(qi)業(ye)的(de)生(sheng)命(ming)，追(zhui)求企業競(jing)爭力(li)的(de)不(bu)斷提升(sheng)。公(gong)司在經(jing)營(ying)中(zhong)始終(zhong)秉(bing)承：遵紀守法(fa)，嚴於(yu)律(lv)己，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待，敢(gan)於(yu)承(cheng)擔(dan)的(de)企(qi)業精神(shen)作為標(biao)準(zhun)，以(yi)過硬(ying)的(de)質(zhi)量和優(you)良(liang)的(de)服(fu)務(wu)來(lai)維(wei)護和拓(tuo)展市場，較大限度(du)的(de)滿(man)足客戶(hu)的(de)需求。與(yu)客戶(hu)的(de)共(gong)贏，是(shi)我(wo)們的(de)發(fa)展目標(biao)。本生!您(nin)信任的(de)合作夥伴。我(wo)們願與(yu)您(nin)真誠合作，共(gong)創美(mei)好的(de)未(wei)來(lai)。本生試(shi)劑(ji)盒(he)