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如何正(zheng)確(que)使用(yong)深(shen)孔(kong)板磁力(li)架(jia)?
深(shen)孔(kong)板磁力(li)架(jia)是實(shi)驗室中用(yong)於(yu)磁珠法(fa)分(fen)離(li)核(he)酸、蛋白(bai)等(deng)生(sheng)物(wu)樣(yang)本(ben)的(de)關鍵工具,其正確使用(yong)直(zhi)接影響實(shi)驗效(xiao)率(lv)和結(jie)果(guo)準確性(xing)。以下是操(cao)作要(yao)點及(ji)註意(yi)事(shi)項(xiang):
壹(yi)、操(cao)作流(liu)程
樣(yang)本(ben)準(zhun)備(bei)
將(jiang)待(dai)處理(li)樣(yang)本(ben)(如(ru)細胞裂解(jie)液(ye)、核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)液)加(jia)入(ru)深(shen)孔(kong)板,確保磁珠與(yu)樣(yang)本(ben)充分(fen)混合。
若(ruo)樣(yang)本(ben)粘(zhan)稠(chou)或含(han)蛋白,需選(xuan)擇低吸(xi)附(fu)材質(zhi)的深(shen)孔(kong)板(如聚丙烯(xi)),避(bi)免掛(gua)壁損(sun)失。
磁珠分(fen)離(li)
將(jiang)深(shen)孔(kong)板置於磁力(li)架(jia)上(shang),靜(jing)置30-90秒(miao),磁珠會(hui)吸附(fu)至(zhi)孔(kong)壁側(ce)壁。
使用(yong)移液(ye)器吸(xi)棄上(shang)清液(ye),保留磁珠結(jie)合(he)的靶物質(zhi)(如核(he)酸、蛋白)。
洗滌與(yu)洗脫
加(jia)入(ru)洗滌緩(huan)沖液,混勻後(hou)再次吸附(fu)磁珠,重復(fu)2-3次以去除雜(za)質(zhi)。
最後(hou)加(jia)入(ru)洗脫液(ye),移除(chu)磁場後磁珠分(fen)散(san),釋(shi)放(fang)純(chun)化(hua)產物。
二(er)、關鍵註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)
深(shen)孔(kong)板選擇:
根據實(shi)驗需求(qiu)選(xuan)擇孔(kong)底形狀(zhuang):圓底(di)(U型(xing))利(li)於混勻,V形(xing)底減(jian)少殘(can)留(liu),金字塔(ta)底兼(jian)顧兩(liang)者(zhe)優(you)勢。
自(zi)動(dong)化(hua)實(shi)驗需匹配(pei)ANSI標準尺(chi)寸,避(bi)免機械(xie)臂(bi)碰撞板底(di)。
磁力(li)架(jia)維護:
定(ding)期(qi)用(yong)75%酒(jiu)精(jing)或1%次氯酸(suan)鈉消(xiao)毒,避免浸(jin)泡(pao)或高壓滅(mie)菌。
存放(fang)於(yu)幹燥(zao)環(huan)境,避免高溫(wen)(>70℃)或強磁場幹擾(rao)。
安全操(cao)作:
磁力(li)架(jia)含(han)強磁體(ti),需遠(yuan)離(li)心(xin)臟起搏器等(deng)醫(yi)療(liao)設(she)備(bei),避(bi)免金(jin)屬(shu)工具吸附。
三(san)、常(chang)見(jian)問題解(jie)決
問(wen)題(ti)原(yuan)因 解(jie)決方(fang)案
磁珠回(hui)收(shou)率(lv)低 孔(kong)底不(bu)平(ping)整或磁套偏移更(geng)換U型(xing)底深(shen)孔(kong)板,檢查(zha)磁套安裝
交叉(cha)汙(wu)染(ran) 磁套未或真(zhen)空(kong)壓力(li)過大(da)控(kong)制(zhi)壓力(li)≤5mmHg,沿(yan)孔(kong)壁加(jia)樣(yang)
通(tong)過規範操(cao)作和定(ding)期維護,深(shen)孔(kong)板磁力(li)架(jia)可顯著提(ti)升(sheng)核酸提(ti)取(qu)、蛋白純(chun)化(hua)等(deng)實(shi)驗的效(xiao)率(lv)和可靠(kao)性(xing)。
註(zhu):以上(shang)僅供(gong)參(can)考,不(bu)作為(wei)實(shi)際數據,實(shi)驗需嚴(yan)格遵循說明或咨詢技(ji)術老(lao)師。
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