如何正(zheng)確使(shi)用凍存管進行(xing)細胞(bao)凍存?

　　以(yi)下是細(xi)胞(bao)凍存管使(shi)用的關(guan)鍵(jian)步(bu)驟(zhou)與(yu)註意事項(xiang)，結(jie)合實(shi)驗(yan)室(shi)標準操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)：

　　1. ‌凍存前準備(bei)‌

　　細(xi)胞(bao)狀態(tai)‌：選(xuan)擇對數生長期(融(rong)合(he)度(du)80%-90%)的(de)細(xi)胞，復(fu)蘇(su)後兩周內凍存效果佳。

　　凍存液配制‌：

　　含(han)血清凍存液‌：培(pei)養基(ji)與血清比例(li)通(tong)常為1:1(難(nan)培(pei)養細(xi)胞可提高血清比例(li))，需(xu)搭(da)配程序降溫盒使(shi)用‌。

　　無(wu)血清凍存液‌：可(ke)直(zhi)接使(shi)用商(shang)品(pin)化(hua)凍存液(如逸漠生物、普美品(pin)牌(pai))，無(wu)需(xu)梯(ti)度(du)降(jiang)溫(wen)‌。

　　凍存管選(xuan)擇‌：2mL凍存管建議裝(zhuang)1mL細(xi)胞懸液(ye)，避免體(ti)積(ji)過大導致(zhi)冷(leng)卻(que)不(bu)均‌。

　　2. ‌細(xi)胞(bao)處(chu)理與分裝‌

　　消化(hua)與(yu)離(li)心‌：胰(yi)酶(mei)消化(hua)後，800-1200rpm離(li)心5分(fen)鐘(zhong)，棄上清保留細(xi)胞(bao)沈(chen)澱‌。

　　重(zhong)懸分(fen)裝(zhuang)‌：加(jia)入預(yu)冷(leng)凍存液輕(qing)柔(rou)吹(chui)打，分(fen)裝(zhuang)至(zhi)凍存管並(bing)標記(ji)細(xi)胞名(ming)稱、日(ri)期‌。

　　3. ‌降(jiang)溫(wen)與(yu)保存‌

　　梯(ti)度(du)降(jiang)溫(wen)‌(含(han)血清凍存液適(shi)用)：

　　4℃ 30分鐘 → -20℃ 2小時(shi) → -80℃過(guo)夜 → 液氮(dan)長(chang)期(qi)保存‌。

　　直(zhi)接凍存‌(無(wu)血清凍存液適(shi)用)：分裝後直(zhi)接放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24小(xiao)時(shi)後轉(zhuan)移至(zhi)液(ye)氮(dan)‌。

　　4. ‌關(guan)鍵(jian)註(zhu)意事項(xiang)‌

　　防爆管‌：液氮(dan)保存時(shi)優(you)先選(xuan)擇內(nei)旋(xuan)蓋(gai)凍存管，避(bi)免液(ye)氮(dan)滲(shen)入導致(zhi)爆(bao)管(guan)。

　　復(fu)蘇(su)驗(yan)證‌：凍存後需(xu)復(fu)蘇(su)驗(yan)證細(xi)胞(bao)活性，-80℃保存不超(chao)過半(ban)年(nian)。

　　擴展(zhan)資源‌：

　　含(han)血清凍存液需(xu)定期更換(huan)異丙醇(chun)(程序降溫盒內(nei))‌。

　　懸(xuan)浮細胞(bao)凍存需(xu)調(tiao)整(zheng)離(li)心參(can)數(shu)(如1000rpm)。

　　註(zhu)：以(yi)上僅供(gong)參(can)考(kao)，不(bu)作(zuo)為實(shi)際(ji)數(shu)據(ju)，實(shi)驗(yan)需(xu)嚴格遵(zun)循說(shuo)明(ming)或(huo)咨(zi)詢(xun)技(ji)術(shu)老師(shi)。

　　天(tian)津本生壹(yi)直(zhi)視質(zhi)量控制為企業的生命(ming)，追求企(qi)業(ye)競爭力(li)的(de)不(bu)斷提升(sheng)。公司(si)在(zai)經(jing)營(ying)中(zhong)始(shi)終(zhong)秉(bing)承(cheng)：遵(zun)紀守(shou)法，嚴(yan)於律己(ji)，寬(kuan)仁以(yi)待，敢於承(cheng)擔(dan)的企(qi)業精神(shen)作(zuo)為標準，以(yi)過硬的(de)質(zhi)量和(he)優良的(de)服(fu)務來(lai)維護(hu)和(he)拓展(zhan)市場，較(jiao)大限度(du)的滿足(zu)客戶(hu)的(de)需(xu)求。與客戶(hu)的(de)共(gong)贏(ying)，是(shi)我們(men)的(de)發展(zhan)目(mu)標，本生，您信任(ren)的(de)合作(zuo)夥(huo)伴(ban)!本(ben)生試(shi)劑(ji)盒