ELISA樣(yang)本稀(xi)釋(shi)：如(ru)何(he)“稀(xi)釋(shi)"出(chu)準(zhun)確(que)結果(guo)?

　　ELISA樣(yang)本稀(xi)釋(shi)操(cao)作(zuo)指(zhi)南(nan)

　　壹(yi)、稀(xi)釋(shi)核(he)心(xin)原(yuan)則(ze)

　　樣(yang)本稀(xi)釋(shi)後(hou)OD值(zhi)應落(luo)在(zai)標(biao)準曲(qu)線最(zui)高(gao)值(zhi)OD值(zhi)的(de)半量程(cheng)內(如(ru)標(biao)準(zhun)品最(zui)高(gao)OD=2.4時(shi)，目(mu)標(biao)OD≈1.2)，此時計算誤(wu)差最(zui)小‌。高濃度(du)樣(yang)本(如IgG、TNFα)需(xu)預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定(ding)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數，避(bi)免(mian)鉤(gou)狀效(xiao)應‌。

　　二、標(biao)準(zhun)操(cao)作(zuo)流(liu)程(cheng)

　　梯度稀(xi)釋(shi)法(fa)‌

　　大(da)比(bi)例(li)稀(xi)釋(shi)(如(ru)200倍(bei))分(fen)步進行：先10倍(bei)稀(xi)釋(shi)，再(zai)基(ji)於(yu)此稀(xi)釋(shi)20倍(bei)‌

　　使用校準(zhun)移(yi)液器，單(dan)次(ci)取樣(yang)量≥5μL，避(bi)免(mian)氣泡(pao)殘(can)留‌

　　稀(xi)釋(shi)液選擇‌

　　含0.05% Tween-20的(de)PBS降(jiang)低背(bei)景，5%脫脂牛奶適(shi)合(he)高基(ji)質(zhi)樣(yang)本‌

　　復雜樣(yang)本(組織(zhi)勻(yun)漿(jiang))需(xu)預(yu)處(chu)理(li)：離心或(huo)超(chao)聲裂(lie)解(jie)‌

　　三、常(chang)見問(wen)題(ti)處(chu)理(li)

　　假(jia)陽性(xing)‌：類風(feng)濕因子(zi)幹(gan)擾(rao)樣(yang)本可加熱滅活(huo)(100℃ 1分(fen)鐘)

　　信(xin)號異常(chang)‌：溶血(xue)樣(yang)本需(xu)棄(qi)用，EDTA濃度(du)需(xu)<5 mM‌

　　基(ji)質(zhi)幹(gan)擾(rao)‌：血(xue)清樣(yang)本建議4℃靜置離心去除(chu)纖(xian)維(wei)蛋白‌

　　四、前(qian)沿技術應用

　　納米標(biao)記(ji)技(ji)術‌：提(ti)升靈(ling)敏度(du)，但(dan)需(xu)優化(hua)穩(wen)定(ding)性‌

　　自(zi)動化(hua)稀(xi)釋(shi)系(xi)統‌：減少人為(wei)誤(wu)差，適(shi)合(he)高通(tong)量檢(jian)測‌

　　通(tong)過規範操(cao)作(zuo)和梯度(du)稀(xi)釋(shi)策(ce)略(lve)，可確保(bao)檢(jian)測結(jie)果(guo)落(luo)在(zai)標(biao)準曲(qu)線線性(xing)範圍內，顯(xian)著(zhu)提(ti)升數(shu)據可靠(kao)性(xing)‌。

　　註(zhu)：以上僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，不作為(wei)實際(ji)數(shu)據，實(shi)驗(yan)需(xu)嚴(yan)格(ge)遵循(xun)說明或(huo)咨詢(xun)技(ji)術老師。 Elisa試(shi)劑盒(he)

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