ELISA樣(yang)本(ben)稀(xi)釋操(cao)作(zuo)指南：原理(li)、方法與優(you)化(hua)技(ji)巧

　　ELISA樣(yang)本(ben)稀(xi)釋操(cao)作(zuo)指南

　　壹(yi)、稀釋原(yuan)理(li)

　　ELISA樣本(ben)稀(xi)釋的(de)核心(xin)是(shi)通(tong)過(guo)精(jing)確的(de)濃(nong)度(du)梯(ti)度調(tiao)整(zheng)，使(shi)待測(ce)樣(yang)本(ben)的(de)OD值(zhi)落在(zai)標準(zhun)曲線(xian)線(xian)性範(fan)圍內(通(tong)常(chang)為(wei)最(zui)高標(biao)準(zhun)品OD值的(de)50%-80%)‌。稀(xi)釋不足(zu)會(hui)導(dao)致(zhi)信(xin)號飽(bao)和，過度(du)稀釋則可能降(jiang)低(di)檢測(ce)靈(ling)敏(min)度(du)‌。關鍵是(shi)通(tong)過(guo)預(yu)實(shi)驗(yan)確(que)定(ding)樣本(ben)基質效(xiao)應，選擇(ze)適(shi)當(dang)的(de)稀(xi)釋液(ye)(如1×PBS或專(zhuan)用稀(xi)釋緩沖(chong)液(ye))以(yi)保持抗原(yuan)-抗體(ti)結合(he)活性‌。

　　二、標(biao)準操(cao)作方法

　　標準品稀釋‌

　　采(cai)用(yong)倍比(bi)稀釋法：原液(ye)按(an)1:2、1:4等(deng)比例(li)逐級(ji)稀(xi)釋，推薦(jian)濃(nong)度(du)梯(ti)度覆蓋(gai)檢測(ce)範(fan)圍(如1000 pg/mL至15.6 pg/mL)‌。

　　使(shi)用校(xiao)準(zhun)移液(ye)器(qi)，每(mei)步(bu)混勻後(hou)取(qu)150-300μL轉(zhuan)移至下(xia)壹(yi)管(guan)，避免氣泡殘留‌。

　　樣(yang)本(ben)稀(xi)釋‌

　　血(xue)清(qing)/血(xue)漿(jiang)樣本(ben)需用稀(xi)釋緩沖(chong)液(ye)至(zhi)少稀釋2倍(bei)，細(xi)胞上(shang)清(qing)建(jian)議1:1稀釋‌。

　　高(gao)濃(nong)度(du)樣(yang)本(ben)需預實(shi)驗(yan)確(que)定(ding)最(zui)佳稀(xi)釋倍(bei)數(shu)，確保OD值接(jie)近(jin)標(biao)準(zhun)曲線(xian)中段‌。

　　三、優(you)化(hua)技(ji)巧

　　稀(xi)釋液(ye)選擇(ze)‌：含(han)0.05% Tween-20的(de)PBS可(ke)減(jian)少非特異(yi)性(xing)結(jie)合(he)，脫脂牛(niu)奶(nai)(5%)適合(he)封(feng)閉(bi)高背景(jing)樣本(ben)‌。

　　避(bi)免誤(wu)差‌：使(shi)用帶(dai)濾(lv)芯(xin)槍頭防(fang)止交(jiao)叉(cha)汙染，手工(gong)洗板時(shi)拍(pai)幹(gan)孔內液(ye)體(ti)‌。

　　質控驗(yan)證(zheng)‌：每(mei)板需含空(kong)白(bai)孔和陰性(xing)對照，標準曲線(xian)R²值需>0.99‌。

　　四(si)、常(chang)見(jian)問題處(chu)理

　　假陽性(xing)/陰性(xing)‌：檢查樣(yang)本(ben)是(shi)否(fou)溶血(xue)或脂(zhi)血，避(bi)免反復(fu)凍(dong)融‌。

　　信(xin)號異(yi)常(chang)‌：確(que)認(ren)酶標(biao)試(shi)劑(ji)現(xian)配(pei)現(xian)用，顯(xian)色(se)時(shi)間控制(zhi)在(zai)15-30分(fen)鐘(zhong)‌。

　　通(tong)過(guo)規(gui)範(fan)操(cao)作和優(you)化(hua)策略(lve)，可(ke)顯(xian)著提(ti)升ELISA檢測(ce)的(de)準(zhun)確性和重(zhong)復(fu)性(xing)‌。

　　註(zhu)：以上(shang)僅(jin)供(gong)參(can)考，不作(zuo)為(wei)實(shi)際(ji)數據，實(shi)驗(yan)需嚴格(ge)遵循(xun)說(shuo)明或(huo)咨詢技(ji)術(shu)老師。 Elisa試(shi)劑(ji)盒(he)

　　ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)  天(tian)津(jin)本(ben)生壹(yi)直視質(zhi)量(liang)控制(zhi)為企(qi)業(ye)的(de)生命(ming)，追(zhui)求企業(ye)競爭(zheng)力的(de)不斷提(ti)升。公(gong)司在(zai)經營(ying)中始(shi)終(zhong)秉(bing)承(cheng)：遵紀守(shou)法，嚴於律己，寬(kuan)仁以(yi)待，敢(gan)於承(cheng)擔(dan)的(de)企(qi)業(ye)精(jing)神作(zuo)為標(biao)準，以過硬的(de)質(zhi)量(liang)和優(you)良的(de)服(fu)務來(lai)維(wei)護(hu)和拓(tuo)展(zhan)市(shi)場，較大(da)限(xian)度(du)的(de)滿足(zu)客(ke)戶的(de)需求。與客(ke)戶的(de)共贏(ying)，是(shi)我(wo)們的(de)發展(zhan)目標，本(ben)生，您(nin)信(xin)任的(de)合(he)作夥(huo)伴(ban)! 本(ben)生試(shi)劑(ji)盒(he)