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如(ru)何選擇ELISA試劑(ji)盒(he)?關鍵(jian)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)解析(xi)
選擇ELISA試劑(ji)盒(he)需(xu)首(shou)先(xian)明(ming)確(que)檢測(ce)目標(biao)(大(da)分子蛋(dan)白(bai)或(huo)小(xiao)分子抗(kang)原)及樣本(ben)類型(xing),再(zai)根(gen)據檢測原理(li)匹(pi)配方(fang)法(fa):
1. 雙(shuang)抗體(ti)夾心(xin)法(fa)
適(shi)用(yong)於(yu)二(er)價(jia)及(ji)以上(shang)大(da)分子抗(kang)原(如(ru)細胞(bao)因子、抗(kang)體(ti)),通過捕(bu)獲抗(kang)體(ti)和(he)檢測抗(kang)體形(xing)成“夾心(xin)"結(jie)構,特(te)異(yi)性高(gao)且(qie)靈(ling)敏(min)度(du)強(qiang)。但(dan)需(xu)確(que)保抗(kang)原含(han)多(duo)個表位,且(qie)需(xu)優(you)化(hua)抗(kang)體對(dui)以(yi)避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)反(fan)應。
2. 競(jing)爭(zheng)法(fa)
針(zhen)對(dui)小(xiao)分子抗(kang)原,通過待(dai)測物(wu)與(yu)酶標(biao)抗原/抗體競(jing)爭(zheng)結合位點,顯色(se)信(xin)號(hao)與(yu)待測(ce)物(wu)濃度(du)成反(fan)比(bi)。優勢在於(yu)可(ke)檢(jian)測不純(chun)樣本(ben),但敏(min)感性和(he)專(zhuan)壹性(xing)較低。
3. 間接法(fa)
通過酶(mei)標(biao)二抗(kang)放(fang)大(da)信(xin)號(hao),靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)且(qie)經濟靈(ling)活,常(chang)用(yong)於(yu)抗(kang)體效(xiao)價(jia)檢(jian)測。但(dan)需(xu)註意(yi)二抗可(ke)能與(yu)非目標(biao)蛋(dan)白(bai)結(jie)合導(dao)致(zhi)背景升(sheng)高(gao)。
4. 直(zhi)接法(fa)
步驟(zhou)簡單(dan),適(shi)合快速檢測(ce),但(dan)靈(ling)敏(min)度(du)低且(qie)需(xu)標(biao)記每種(zhong)壹抗(kang),成本較高(gao)。
選擇建(jian)議(yi)
大(da)分子蛋(dan)白(bai):優(you)先(xian)雙(shuang)抗體(ti)夾心(xin)法(fa);
小(xiao)分子抗(kang)原:選擇競(jing)爭(zheng)法(fa);
樣本(ben)復雜(za)度(du):高(gao)背景樣本(ben)需優(you)化(hua)封(feng)閉和(he)洗滌步驟(zhou);
靈(ling)敏(min)度(du)要(yao)求:低豐度(du)目標(biao)需高(gao)敏(min)試劑(ji)盒(he)(pg/mL級)。
註(zhu)意事項
驗證試劑(ji)盒(he)的(de)批(pi)間(jian)精密(mi)度(CV<15%)和(he)加(jia)標(biao)回(hui)收率(lv)(80%~120%);
特(te)殊樣本(ben)(如(ru)高(gao)脂(zhi)血(xue)清(qing))需預(yu)處理(li)或(huo)選擇適(shi)配試劑(ji)盒(he)。
註(zhu):以(yi)上(shang)僅(jin)供參考(kao),不作(zuo)為實(shi)際(ji)數據,實(shi)驗需嚴格(ge)遵(zun)循(xun)說明(ming)或(huo)咨詢(xun)技(ji)術(shu)老師(shi)。
天津本(ben)生(sheng)壹直(zhi)視(shi)質(zhi)量控制為企(qi)業的生(sheng)命(ming),追求企業競(jing)爭(zheng)力的不斷(duan)提升(sheng)。公司(si)在(zai)經營(ying)中始終秉(bing)承(cheng):遵紀守法(fa),嚴於(yu)律己(ji),寬仁以待(dai),敢(gan)於承(cheng)擔(dan)的(de)企(qi)業精神(shen)作為標(biao)準(zhun),以過硬(ying)的(de)質(zhi)量和(he)優良(liang)的(de)服務(wu)來維護和(he)拓展市(shi)場(chang),較大(da)限(xian)度的滿足客戶的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客戶(hu)的(de)共(gong)贏,是我們(men)的發(fa)展目標(biao),本生(sheng),您信(xin)任的合作夥伴!
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