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菌(jun)種保存(cun)管(guan)規(gui)範(fan)操(cao)作(zuo)與(yu)關(guan)鍵(jian)要點(dian)
以(yi)下(xia)是關於菌(jun)種保存(cun)管(guan)使用(yong)方(fang)法的(de)關(guan)鍵(jian)要點(dian),結(jie)合(he)關(guan)鍵(jian)步驟與(yu)常(chang)見(jian)註意(yi)事項(xiang):
壹、菌種保存(cun)管(guan)使用(yong)步(bu)驟
材料(liao)準備(bei)
選擇聚丙(bing)烯(xi)材質凍(dong)存(cun)管(guan),內含25顆(ke)多孔(kong)瓷(ci)珠及含低(di)溫(wen)保護(hu)劑(ji)(如20%甘(gan)油)的(de)保存(cun)液(ye)。
未(wei)使用(yong)的(de)凍(dong)存管(guan)可在(zai)室溫(wen)或2-8℃保存(cun)12個月,使用(yong)前(qian)需(xu)檢(jian)查(zha)是否漏(lou)液(ye)或(huo)保存(cun)液(ye)混(hun)濁(zhuo)。
菌(jun)懸(xuan)液(ye)制(zhi)備(bei)
挑(tiao)取(qu)新(xin)鮮菌(jun)落配(pei)成3-4麥(mai)氏(shi)比濁度的(de)菌(jun)懸(xuan)液(ye),接種至凍存管(guan)內。
擰緊管(guan)蓋後輕(qing)柔顛倒(dao)4-5次混(hun)勻(yun),避免旋搖導(dao)致(zhi)瓷(ci)珠破損(sun)。
保存(cun)條(tiao)件(jian)
短(duan)期(qi)保存(cun):-20℃可維(wei)持(chi)1-5年菌(jun)種活性。
長期(qi)保存(cun):-80℃可延(yan)長至5-10年(nian),液(ye)氮(dan)氣(qi)相(-150℃)或液(ye)相(-196℃)保存(cun)效(xiao)果。


二、關鍵(jian)註意(yi)事項(xiang)
操(cao)作(zuo)規(gui)範(fan)
全(quan)程(cheng)在(zai)生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)中(zhong)操(cao)作(zuo),避免(mian)雜菌(jun)汙(wu)染。
瓷(ci)珠取出後不可(ke)放(fang)回(hui)凍存管(guan),單(dan)次(ci)使用(yong)後需(xu)滅(mie)菌處理(li)。
常見(jian)誤(wu)區(qu)
錯(cuo)誤(wu)保存(cun)溫(wen)度:部分菌(jun)種(如銅綠(lv)假單(dan)胞(bao)菌(jun))在(zai)4℃易自溶(rong),需(xu)根(gen)據菌種特(te)性選(xuan)擇溫(wen)度。
保護(hu)劑(ji)濃(nong)度不(bu)當(dang):甘(gan)油濃(nong)度建(jian)議10-20%,過(guo)高(gao)或(huo)過(guo)低(di)均影(ying)響(xiang)凍(dong)存(cun)效(xiao)果。
復蘇(su)方法錯(cuo)誤(wu):需(xu)快(kuai)速(su)水浴(yu)解(jie)凍(38-40℃),緩(huan)慢(man)復溫(wen)會導(dao)致(zhi)冰(bing)晶(jing)損(sun)傷細胞。
三(san)、保存(cun)效(xiao)果優化建(jian)議
分裝(zhuang)策(ce)略:單(dan)次(ci)制(zhi)備(bei)多管(guan)分裝(zhuang),避免(mian)反復(fu)凍融。
定期(qi)檢(jian)測:通(tong)過(guo)塗(tu)平(ping)板(ban)或(huo)死活染色(se)法監(jian)測菌(jun)種存活率,及(ji)時復壯退(tui)化菌(jun)株(zhu)。
如需(xu)進(jin)壹步了(le)解(jie)特(te)定菌(jun)種的保存(cun)細節(jie),可(ke)參考(kao)專(zhuan)業保藏(zang)中(zhong)心的技(ji)術規(gui)程(cheng)。
註:以(yi)上(shang)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),不作(zuo)為實際(ji)數據,實驗需(xu)嚴格(ge)遵循說(shuo)明(ming)或(huo)咨(zi)詢(xun)技術老師(shi)。 Elisa試(shi)劑(ji)盒
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