ELISA試(shi)劑盒(he)常(chang)見問(wen)題解析(xi)

　　1. 標(biao)準(zhun)曲(qu)線線性(xing)不(bu)佳‌

　　可(ke)能原因(yin)‌：

　　標(biao)準(zhun)品(pin)溶解不(bu)充(chong)分或稀釋錯(cuo)誤(建議使(shi)用新(xin)鮮(xian)配(pei)置的(de)母(mu)液(ye))。

　　孵育時(shi)間/溫度(du)不(bu)穩(wen)定(需嚴格控(kong)制在37℃±1℃)。

　　洗(xi)板不jing(建議使(shi)用洗(xi)板機，確保每(mei)孔(kong)註滿(man)洗(xi)滌液(ye))。

　　解(jie)決(jue)方(fang)案‌：

　　標(biao)準(zhun)品(pin)分裝後(hou)-20℃保存，避(bi)免(mian)反復凍融。

　　使(shi)用前(qian)充(chong)分震(zhen)蕩(dang)混勻(yun)，梯(ti)度(du)稀釋時(shi)更(geng)換槍頭。

　　2. 顯色異常(chang)(顏(yan)色(se)過淺或過深)‌

　　可能(neng)原因(yin)‌：

　　底(di)物溶液(ye)失(shi)效(TMB避(bi)光(guang)保存，開(kai)封(feng)後(hou)1個月內(nei)用完)。

　　終止液(ye)添(tian)加時(shi)間不(bu)壹致(建議顯色後(hou)5分鐘(zhong)內(nei)終(zhong)止(zhi))。

　　樣(yang)本濃(nong)度過高(需(xu)預(yu)實驗(yan)確定稀釋倍數(shu))。

　　解決(jue)方(fang)案‌：

　　檢(jian)查(zha)底(di)物是否出現藍色沈(chen)澱(變質標誌(zhi))。

　　使(shi)用酶(mei)標(biao)儀讀(du)取OD值(zhi)，避(bi)免肉眼(yan)判斷誤差(cha)。

　　3. 重(zhong)復性差(板內(nei)/板(ban)間變異大(da))‌

　　可能原(yuan)因(yin)‌：

　　加(jia)樣(yang)量(liang)不準(建議使(shi)用校(xiao)準後(hou)的(de)移液(ye)器(qi)，避免氣泡)。

　　孔(kong)間汙(wu)染(加(jia)樣(yang)時(shi)槍頭勿觸碰(peng)孔(kong)壁(bi))。

　　孵育環(huan)境(jing)不(bu)均(jun)(使(shi)用恒溫搖床(chuang)或水(shui)浴)。

　　解決(jue)方(fang)案‌：

　　設置(zhi)復孔(kong)(至少(shao)3孔(kong)/樣(yang)本)，CV值(zhi)應(ying)<15%。

　　4. 高背景(jing)值(zhi)‌

　　可(ke)能原(yuan)因(yin)‌：

　　封(feng)閉不(bu)充分(建議使(shi)用5%脫(tuo)脂(zhi)奶(nai)粉或BSA封(feng)閉)。

　　壹抗(kang)/二抗(kang)濃度過高(需(xu)優(you)化(hua)抗(kang)體稀釋比例)。

　　洗(xi)滌液(ye)殘(can)留(洗(xi)板後(hou)拍(pai)幹(gan)，避(bi)免交(jiao)叉(cha)汙(wu)染)。

　　解(jie)決(jue)方(fang)案‌：

　　增(zeng)加(jia)封(feng)閉時(shi)間(37℃ 1小(xiao)時(shi)或4℃過夜)。

　　5. 樣(yang)本OD值(zhi)超(chao)出標準曲(qu)線範(fan)圍(wei)‌

　　可(ke)能原(yuan)因(yin)‌：

　　樣(yang)本基(ji)質幹(gan)擾(如(ru)高脂(zhi)、溶血(xue)樣(yang)本需(xu)預(yu)處理)。

　　樣(yang)本稀釋倍數(shu)不足(建議預(yu)實驗(yan)確定線性(xing)範(fan)圍(wei))。

　　解(jie)決(jue)方(fang)案‌：

　　使(shi)用樣(yang)本稀釋液(ye)(含(han)1% BSA或0.1%吐(tu)溫-20)。

　　6. 酶(mei)標(biao)儀讀(du)數異常(chang)‌

　　可能(neng)原因(yin)‌：

　　濾(lv)光(guang)片選(xuan)擇(ze)錯(cuo)誤(TMB檢(jian)測需450nm，OD校(xiao)正570nm)。

　　孔(kong)底(di)氣泡或汙(wu)染(讀(du)數前(qian)輕(qing)震(zhen)板)。

　　解(jie)決(jue)方(fang)案‌：

　　定期校(xiao)準酶(mei)標(biao)儀，使用空(kong)白孔(kong)調零(ling)。

　　操作註(zhu)意(yi)事(shi)項‌

　　試(shi)劑平衡(heng)‌：所有(you)試(shi)劑使(shi)用前(qian)需(xu)室溫平衡(heng)30分鐘(zhong)。

　　時(shi)間控(kong)制‌：顯色反(fan)應(ying)時(shi)間嚴格按說明(ming)書(shu)(通常(chang)10-15分鐘(zhong))。

　　數(shu)據(ju)記錄(lu)‌：及時(shi)記錄(lu)OD值(zhi)，避(bi)免終(zhong)止液(ye)揮(hui)發後(hou)讀(du)數。

　　若問題持續(xu)，建議聯(lian)系供應(ying)商(shang)提供(gong)技(ji)術復核(he)(如(ru)抗(kang)體效期驗證或樣(yang)本檢(jian)測)。

　　註：以上僅供(gong)參考(kao)，不(bu)作為(wei)實(shi)際數(shu)據(ju)，實(shi)驗(yan)需(xu)嚴格遵循(xun)說明(ming)或咨(zi)詢技(ji)術老(lao)師。

　　天(tian)津本生(sheng)壹直視(shi)質量(liang)控制為(wei)企(qi)業(ye)的(de)生(sheng)命(ming)，追(zhui)求企業(ye)競(jing)爭力(li)的不(bu)斷提升。公(gong)司在經(jing)營中始(shi)終秉承：遵紀守(shou)法(fa)，嚴於律(lv)己，寬(kuan)仁(ren)以待，敢於(yu)承擔(dan)的企業(ye)精(jing)神作為(wei)標(biao)準，以過硬的質量(liang)和優(you)良的(de)服(fu)務(wu)來維(wei)護(hu)和拓(tuo)展市(shi)場，較大(da)限(xian)度(du)的(de)滿(man)足客戶的(de)需(xu)求。與(yu)客戶的(de)共(gong)贏，是我(wo)們的(de)發展目標(biao)。本(ben)生(sheng)!您信任的合作夥伴。我(wo)們願(yuan)與(yu)您真(zhen)誠合(he)作，共(gong)創(chuang)美(mei)好的未(wei)來。