ELISA與Western Blot實驗(yan)的區別

　　壹、基本(ben)原(yuan)理(li)與核心(xin)差(cha)異(yi)

　　ELISA(酶(mei)聯(lian)免(mian)疫吸附(fu)試驗)‌

　　基於(yu)抗原(yuan)-抗(kang)體特(te)異(yi)性(xing)結(jie)合(he)，通過酶

　　標記信(xin)號放(fang)大(da)(如(ru)HRP催(cui)化(hua)顯色(se))實現檢測(ce)，通常(chang)使(shi)用(yong)96孔(kong)聚(ju)苯乙(yi)烯(xi)酶(mei)標板作為固相(xiang)載(zai)體‌。

　　適(shi)用(yong)於(yu)溶液樣(yang)本(ben)(如血清(qing)、細(xi)胞培養上清(qing))的(de)定(ding)量分(fen)析，靈敏度高且可(ke)高通量操(cao)作‌。

　　Western Blot(蛋白質(zhi)免疫(yi)印(yin)跡(ji))‌

　　需(xu)先(xian)通過SDS-PAGE電泳分(fen)離蛋白質(zhi)，再轉(zhuan)印(yin)至(zhi)固相(xiang)膜(mo)(如PVDF膜)，通過抗體結(jie)合(he)和化(hua)學(xue)發(fa)光/顯色(se)檢(jian)測目標蛋白‌。

　　可(ke)提供蛋白質(zhi)分(fen)子量信(xin)息(xi)，適(shi)用(yong)於(yu)定(ding)性或(huo)半定(ding)量分(fen)析，尤(you)其適(shi)合(he)研(yan)究翻(fan)譯後修(xiu)飾‌。

　　二、操(cao)作流程對(dui)比

　　步驟(zhou)‌ ‌ELISA‌ ‌Western Blot‌

　　樣本(ben)處理(li)‌ 直接檢測(ce)液體樣(yang)本(ben)，無(wu)需(xu)電(dian)泳 需(xu)提(ti)取(qu)蛋白並(bing)電泳分(fen)離‌

　　檢(jian)測(ce)方(fang)式(shi)‌ 酶標儀讀(du)取(qu)吸(xi)光度(OD值(zhi)) 化(hua)學(xue)發(fa)光/顯色(se)成(cheng)像系(xi)統(tong)‌

　　耗(hao)時‌ 數(shu)小時(快速) 1-2天(tian)(復(fu)雜(za))‌

　　三(san)、應用(yong)場(chang)景選擇(ze)

　　ELISA優(you)先(xian)‌：

　　需(xu)高精度定(ding)量(如細(xi)胞因(yin)子濃(nong)度測(ce)定(ding))‌。

　　高通量篩(shai)選(如藥(yao)物開(kai)發(fa)中的(de)抗體檢(jian)測(ce))‌。

　　Western Blot優(you)先(xian)‌：

　　需(xu)分(fen)析蛋白質(zhi)分(fen)子量或(huo)翻(fan)譯後修(xiu)飾‌。

　　驗證(zheng)蛋白質(zhi)表(biao)達(da)水平(如(ru)基因(yin)敲(qiao)除效(xiao)果)‌。

　　四、技術局(ju)限(xian)性

　　ELISA‌：無(wu)法區分(fen)蛋白質(zhi)亞型或(huo)修(xiu)飾，依(yi)賴(lai)抗(kang)體特(te)異(yi)性(xing)‌。

　　Western Blot‌：定(ding)量誤差較大，操(cao)作復(fu)雜(za)且(qie)通量低‌。

　　五、總(zong)結

　　ELISA與Western Blot雖均(jun)基(ji)於(yu)免疫反應(ying)，但ELISA以(yi)定(ding)量見長(chang)，Western Blot以定(ding)性分(fen)析為優(you)，選擇(ze)時需(xu)結(jie)合(he)實驗(yan)目的(de)(定(ding)量/定(ding)性)、樣(yang)本(ben)類型及(ji)設(she)備(bei)條(tiao)件綜(zong)合(he)判(pan)斷‌。

　　註：僅供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)，以上資(zi)料供參(can)考(kao)，如需(xu)具(ju)體產品說明(ming)請(qing)咨詢(xun)技術老師或(huo)品(pin)牌(pai)供應(ying)商(shang)。

　　Elisa酶(mei)標板本(ben)生壹直視(shi)質(zhi)量控制為企業的生命(ming)，追求(qiu)企業競(jing)爭(zheng)力(li)的不(bu)斷(duan)提(ti)升(sheng)。公(gong)司(si)在經(jing)營中(zhong)始(shi)終(zhong)秉承：遵(zun)紀(ji)守(shou)法，嚴於(yu)律己，寬仁(ren)以(yi)待，敢於(yu)承擔的(de)企業精神作為標準(zhun)，以(yi)過(guo)硬的(de)質(zhi)量和優(you)良(liang)的服務來維護(hu)和拓(tuo)展(zhan)市場(chang)，較大限(xian)度的(de)滿(man)足客戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與客戶(hu)的(de)共贏，是(shi)我(wo)們的(de)發(fa)展目標，本(ben)生，您(nin)信(xin)任的(de)合(he)作夥伴!本(ben)生試(shi)劑盒