ELISA試(shi)驗(yan)假(jia)陽(yang)性(xing)的(de)原因及解(jie)決方案(an)

　　壹(yi)、假(jia)陽(yang)性(xing)常(chang)見(jian)原因(yin)

　　操(cao)作(zuo)因素(su)‌

　　加樣誤差(如槍頭(tou)觸(chu)碰孔(kong)壁(bi)或產生(sheng)氣(qi)泡)或洗滌(di)不充分(fen)導致(zhi)非特異(yi)性(xing)吸附‌。

　　試(shi)劑(ji)汙染(ran)或保存(cun)不當(如TMB顯色(se)劑(ji)避光(guang)失效)‌。

　　樣本(ben)因素(su)‌

　　溶血樣本(ben)釋放(fang)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶活(huo)性(xing)物質(zhi)，或細菌(jun)汙(wu)染(ran)產生(sheng)內源性(xing)HRP‌。

　　高濃度(du)類風(feng)濕(shi)因子(zi)或自身(shen)抗體(ti)幹(gan)擾(rao)(如系統(tong)性(xing)紅(hong)斑(ban)狼(lang)瘡(chuang)患(huan)者(zhe))‌。

　　方法(fa)學(xue)因(yin)素(su)‌

　　鉤狀(zhuang)效應：樣本(ben)中待(dai)測物(wu)濃度(du)過(guo)高導致(zhi)信號抑(yi)制(zhi)‌。

　　試(shi)劑(ji)盒特異(yi)性(xing)不足(如不同廠(chang)家(jia)抗體(ti)交叉(cha)反(fan)應)‌。

　　二(er)、解(jie)決方案(an)與(yu)優(you)化(hua)措施(shi)

　　操(cao)作(zuo)優化(hua)‌

　　加樣規範‌：懸(xuan)垂加樣至孔(kong)底(di)，避免(mian)氣(qi)泡或劃傷孔(kong)壁(bi)‌。

　　洗滌(di)：使用去離(li)子(zi)水配(pei)制洗滌(di)液，每(mei)次浸泡1-2分(fen)鐘(zhong)，拍(pai)幹(gan)力度(du)均勻(yun)‌。

　　試(shi)劑(ji)管理‌：顯色(se)劑(ji)現配(pei)現用，避免(mian)反復凍(dong)融‌。

　　樣本(ben)處(chu)理‌

　　溶血樣本(ben)離(li)心(xin)去除(chu)血紅蛋白(bai)，或使用吸附劑(ji)去除(chu)幹(gan)擾(rao)物質(zhi)‌。

　　高濃度(du)樣本(ben)稀釋後(hou)復測，排(pai)除(chu)鉤(gou)狀(zhuang)效應‌。

　　方(fang)法(fa)改(gai)進‌

　　選擇(ze)高特異(yi)性(xing)試(shi)劑(ji)盒(如阻斷(duan)法(fa)優(you)於(yu)競(jing)爭(zheng)法(fa))‌。

　　增(zeng)設(she)陰性(xing)/空(kong)白(bai)對照(zhao)，校正(zheng)非(fei)特異(yi)性(xing)信(xin)號‌。

　　復(fu)檢(jian)確認‌

　　初篩(shai)陽性(xing)樣本(ben)需(xu)更換方法(fa)(如化學(xue)發光(guang)法(fa)或Western Blot)驗證(zheng)‌。

　　臨(lin)床樣本(ben)結合病史(如疫(yi)苗(miao)接種史、自(zi)身(shen)免(mian)疫(yi)病(bing))綜(zong)合(he)判斷‌。

　　三、擴展(zhan)工具(ju)與(yu)流(liu)程

　　質(zhi)量控制工(gong)具(ju)‌：使(shi)用Curve Expert 1.3優(you)化(hua)標(biao)準曲線擬(ni)合(he)‌。

　　假(jia)陽(yang)性(xing)排(pai)除(chu)流(liu)程‌：

　　重(zhong)復實(shi)驗(yan)確認結果(guo);

　　檢(jian)查(zha)試(shi)劑(ji)有(you)效期(qi)及儲(chu)存條(tiao)件;

　　樣本(ben)預(yu)處(chu)理(如離(li)心(xin)、稀(xi)釋);

　　更換檢測方(fang)法(fa)或試(shi)劑(ji)盒復測‌。

　　四、註(zhu)意事項(xiang)

　　老(lao)年(nian)人(ren)群(qun)或妊娠(shen)期(qi)女(nv)性(xing)假(jia)陽(yang)性(xing)率(lv)較(jiao)高，需(xu)結合臨(lin)床評(ping)估(gu)‌。

　　實(shi)驗(yan)室(shi)需(xu)定期(qi)校準設備(bei)，避免(mian)環境因(yin)素(su)(如溫度(du)波動)影(ying)響結果(guo)‌。

　　註(zhu)：僅供科研(yan)使用，以上資(zi)料供參(can)考(kao)，如需(xu)具(ju)體(ti)產品(pin)說(shuo)明請咨(zi)詢技(ji)術(shu)老(lao)師或品牌(pai)供(gong)應商(shang)。

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