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Elisa實(shi)驗:ELISA標(biao)準曲(qu)線制(zhi)作(zuo)流程(cheng)
壹(yi)、數(shu)據(ju)準備(bei)
輸(shu)入(ru)濃(nong)度與OD值
在(zai)Excel表(biao)格(ge)中錄(lu)入(ru)標(biao)準品(pin)的(de)濃(nong)度(X軸(zhou))和(he)對應的OD值(Y軸(zhou)),雙(shuang)抗體(ti)夾(jia)心法(fa)需(xu)計(ji)算OD值減去(qu)空白(bai)對照(OD-blank)。
數(shu)據(ju)預處(chu)理
競(jing)爭(zheng)法(fa)建(jian)議(yi)使用(yong)Logit-log或(huo)四參數(shu)擬(ni)合(he),雙(shuang)抗夾(jia)心法(fa)可(ke)選直(zhi)線、二次(ci)曲(qu)線或(huo)四參數(shu)擬(ni)合(he)。
二、曲(qu)線擬(ni)合(he)
選擇(ze)擬(ni)合(he)模(mo)型(xing)
常(chang)用(yong)模(mo)型(xing):直線回(hui)歸(gui)(R²≥0.99)、四參數(shu)Logistic(適(shi)用(yong)於寬濃度範圍(wei))、二次(ci)曲(qu)線(OD值>2.0時更(geng)優(you))。
通過軟(ruan)件(如(ru)Curve Expert 1.3或(huo)ELISA Calc)自動(dong)擬(ni)合(he),優(you)先(xian)選擇(ze)R²值天津1的(de)方程(cheng)。
驗證(zheng)擬(ni)合(he)效(xiao)果
檢查回(hui)歸(gui)方程(cheng)系數(shu)(如(ru)四(si)參數(shu)方程(cheng)中的(de)a、b、c、d值)及R²值,確保曲線平滑無(wu)異常(chang)點。

三(san)、計(ji)算樣(yang)本(ben)濃(nong)度
反向(xiang)推算
將(jiang)待測(ce)樣(yang)本(ben)的(de)OD值代入(ru)擬(ni)合(he)方程(cheng),計算濃(nong)度值(需乘(cheng)以(yi)稀(xi)釋(shi)倍數(shu)N)。
二次(ci)曲(qu)線可能產(chan)生(sheng)雙(shuang)解(jie),需(xu)舍棄(qi)偏離度大的(de)結(jie)果。
結(jie)果輸出
復制(zhi)擬(ni)合(he)方程(cheng)和(he)計(ji)算數(shu)據(ju)至(zhi)報(bao)告,標(biao)註(zhu)R²值及擬(ni)合(he)方式(shi)。
四、註(zhu)意(yi)事(shi)項
扣本(ben)底(di)處(chu)理:若試劑(ji)盒要求,需先(xian)扣除(chu)空白(bai)孔OD值再擬(ni)合(he)。
重(zhong)復實驗:標(biao)準曲(qu)線需每次(ci)實(shi)驗獨立制(zhi)作(zuo),避免批次差異影(ying)響(xiang)準確性。
五、擴展工具(ju)推薦(jian)
軟(ruan)件工(gong)具(ju):Curve Expert 1.3(支(zhi)持多(duo)項式(shi)擬(ni)合(he))、ELISA Calc(支(zhi)持多(duo)種(zhong)回(hui)歸(gui)模(mo)型(xing))。
註(zhu):僅供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong),以(yi)上資(zi)料(liao)供(gong)參考,如需(xu)具(ju)體(ti)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)請咨(zi)詢技(ji)術(shu)老(lao)師(shi)或(huo)品(pin)牌(pai)供(gong)應(ying)商。
天津本(ben)生(sheng)壹(yi)直視(shi)質量控制(zhi)為企業(ye)的生(sheng)命,追(zhui)求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭(zheng)力的不(bu)斷提(ti)升。公司(si)在(zai)經營(ying)中始(shi)終秉(bing)承(cheng):遵紀(ji)守(shou)法(fa),嚴於(yu)律(lv)己(ji),寬(kuan)仁以(yi)待,敢於(yu)承(cheng)擔(dan)的企(qi)業精(jing)神(shen)作為標(biao)準,以(yi)過硬的質量(liang)和(he)優(you)良的服(fu)務來維護(hu)和(he)拓(tuo)展市場(chang),較大限(xian)度的滿(man)足客(ke)戶的(de)需(xu)求。與客戶的(de)共(gong)贏(ying),是(shi)我們的(de)發(fa)展目標(biao)。本(ben)生(sheng)!您信(xin)任(ren)的合(he)作(zuo)夥伴。我們願與您真誠合(he)作,共創美好的未(wei)來(lai)。本(ben)生(sheng)試劑(ji)盒
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