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ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)靈敏度(du)該如(ru)何(he)判(pan)定(ding)?
ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)靈敏度(du)判定(ding)需結(jie)合(he)以下(xia)關(guan)鍵(jian)指(zhi)標和(he)方法綜(zong)合(he)評估:
壹、靈敏度(du)的(de)定(ding)義與(yu)核(he)心(xin)指(zhi)標
檢(jian)測限(LOD)
指(zhi)能(neng)可(ke)靠檢測到(dao)目(mu)標物(wu)的(de)低濃(nong)度(du),計算(suan)公式為:
LOD = 空白信號均值(zhi)(Sb) + 3 × 空白信號標準差(cha)(σ) 。
實際(ji)應用(yong)中(zhong),試(shi)劑(ji)盒(he)說明書常標註“靈敏度(du)"即對(dui)應LOD(如(ru)10pg/mL)。
定(ding)量限(LOQ)
可(ke)準確定(ding)量的(de)低濃(nong)度(du),計算(suan)公式為:
LOQ = Sb + 10 × σ 。
通(tong)常要(yao)求信號變異系(xi)數(shu)(CV)≤20%,確保結(jie)果可(ke)重(zhong)復。
二(er)、判(pan)定(ding)方法
標準曲線驗(yan)證(zheng)
選(xuan)擇(ze)低(di)濃(nong)度(du)標準品(pin)(如LOD附(fu)近濃(nong)度(du)),重(zhong)復檢(jian)測3次(ci),計算(suan)信號強度(du)與(yu)背景(jing)噪(zao)聲的(de)比(bi)值(zhi)(S/N≥3為(wei)合(he)格)。
加(jia)標回(hui)收(shou)率測試(shi)
在樣(yang)本(ben)中添(tian)加(jia)已知濃(nong)度(du)的(de)目標物(wu),檢(jian)測回(hui)收(shou)率應在80%-120%範圍內。
示(shi)例(li):若(ruo)添加(jia)50pg/mL標準品(pin),測得濃(nong)度(du)為45-55pg/mL則(ze)符合(he)要(yao)求。
稀釋(shi)線性實驗(yan)
對(dui)樣(yang)本(ben)進行(xing)梯(ti)度(du)稀釋(shi),檢(jian)測信(xin)號值與(yu)理(li)論值(zhi)的(de)偏(pian)差(cha)應≤20%。
三、實驗(yan)優(you)化(hua)建議(yi)
樣(yang)本(ben)處理(li):避免(mian)反復凍(dong)融(rong),離心(xin)去除(chu)幹(gan)擾(rao)物(wu)。
對(dui)照(zhao)設(she)置(zhi):同(tong)步檢測空白對(dui)照(zhao)(僅(jin)緩(huan)沖(chong)液)和陰(yin)性樣(yang)本(ben),確認(ren)無(wu)交叉(cha)反應。
數(shu)據分(fen)析:優先(xian)選(xuan)擇(ze)線性範圍內(R²≥0.99)的(de)數據點計(ji)算濃(nong)度(du)。
四、常見誤區
混(hun)淆(xiao)“靈敏度(du)"與(yu)“檢測範圍":靈敏度(du)是LOD,而(er)檢(jian)測範圍是標準曲線的(de)線性區間(jian)(如(ru)30-900pg/mL)。
忽略批(pi)間差(cha)異:板(ban)內(nei)變(bian)異系(xi)數(shu)應<5%,板(ban)間(jian)變(bian)異系(xi)數(shu)應<15%。
通(tong)過上(shang)述方法可(ke)系統(tong)評(ping)估試劑(ji)盒(he)靈敏度(du),確保實驗(yan)數(shu)據的(de)可靠性。
註:以(yi)上(shang)資料(liao)僅(jin)供參考(kao),如需進壹步了解產(chan)品詳(xiang)情,可(ke)參(can)考(kao)品牌(pai)供應商或(huo)技術老(lao)師。
天(tian)津本(ben)生(sheng)壹直視(shi)質(zhi)量(liang)控(kong)制(zhi)為企業的(de)生(sheng)命,追求企業競(jing)爭(zheng)力(li)的(de)不(bu)斷(duan)提升(sheng)。公司(si)在經營中(zhong)始終(zhong)秉(bing)承(cheng):遵紀(ji)守(shou)法,嚴(yan)於(yu)律(lv)己(ji),寬(kuan)仁(ren)以待(dai),敢於(yu)承(cheng)擔的(de)企業精神(shen)作為標準,以(yi)過硬(ying)的(de)質(zhi)量(liang)和(he)優(you)良(liang)的(de)服務來維(wei)護(hu)和(he)拓展市(shi)場,較大限度(du)的(de)滿足(zu)客戶的(de)需求。與(yu)客戶的(de)共贏,是我(wo)們(men)的(de)發(fa)展(zhan)目標。本(ben)生(sheng)!您信(xin)任(ren)的(de)合(he)作夥伴(ban)。我們(men)願(yuan)與(yu)您真誠(cheng)合(he)作,共創(chuang)美好的(de)未(wei)來。本(ben)生(sheng)ELISA試劑(ji)盒(he) 本(ben)生(sheng)移液(ye)器吸頭 本(ben)生(sheng)實驗(yan)耗(hao)材(cai)
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