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實驗幹貨(huo):ELISA洗(xi)板操作要點
準(zhun)確(que)儀(yi)器(qi)和(he)準(zhun)確(que)的操(cao)作是(shi)保(bao)證(zheng)ELISA結果準(zhun)確(que)關鍵,怎(zen)樣(yang)的加樣(yang)方式(shi)才(cai)是(shi)正(zheng)確呢?ELISA實(shi)驗中壹般有5次加樣(yang),即加標本、加檢測抗(kang)體(ti)、加酶(mei)結合物和(he)加顯(xian)色(se)底物及(ji)終(zhong)止(zhi)液。下(xia)面(mian)BUNSEN本生(sheng)小(xiao)編詳(xiang)解(jie)如(ru)下(xia):
1、實驗(yan)室使用(yong)的微(wei)量(liang)加樣(yang)器(qi)應註(zhu)意保(bao)養(yang)並定(ding)期校(xiao)正(zheng)。ELISA比(bi)較(jiao)敏(min)感(gan),每(mei)孔(kong)加入(ru)液(ye)體量(liang)誤差(cha)會(hui)導(dao)致最後(hou)讀數差(cha)別(bie),因此(ci)避(bi)免儀(yi)器(qi)帶(dai)來(lai)誤(wu)差(cha)。
2、加樣(yang)前,溶液(ye)充(chong)分(fen)混(hun)勻,垂直(zhi)懸(xuan)空(kong)加入(ru)液(ye)體,避(bi)免加在孔(kong)壁上,不(bu)可產(chan)生(sheng)氣泡。
3、加樣(yang)時避(bi)免(mian)液體濺出,如(ru)有樣(yang)本濺(jian)出(chu),應用(yong)吸(xi)水紙輕輕拭幹,並做相(xiang)應記(ji)錄(lu)。
4、如果加樣(yang)槍漏氣以至(zhi)於加樣(yang)的量(liang)不夠,不能用(yong)槍吸(xi)出再加,做(zuo)相(xiang)應記(ji)錄(lu)實驗(yan)。
5、每(mei)次(ci)加樣(yang)順序(xu)壹致,尤(you)其底物、終(zhong)止(zhi)液順序(xu)壹致,保證(zheng)每(mei)個孔(kong)顯(xian)色(se)時間相(xiang)同。

ELISA實驗(yan)通過(guo)洗(xi)滌以清(qing)除殘留(liu)在板孔(kong)中沒能與固(gu)相(xiang)抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體結合的物質,以及(ji)在反(fan)應過(guo)程中非特異性(xing)地(di)吸(xi)附(fu)於固(gu)相(xiang)載體(ti)幹擾(rao)物質。因此(ci),不(bu)嚴格(ge)的洗(xi)滌容(rong)易(yi)出(chu)現交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)或(huo)洗(xi)不幹凈背(bei)景(jing)高。 洗(xi)滌是(shi)ELISA實(shi)驗操作(zuo)最多壹個步(bu)驟(zhou),如何(he)洗(xi)板呢?
1、BUNSEN本生(sheng)ELISA 洗(xi)液需(xu)要(yao)20倍稀釋,配(pei)置時用(yong)新鮮(xian)無汙染的蒸(zheng)餾水(shui)或(huo)去(qu)離子水現配(pei)現用(yong)。洗(xi)液如(ru)果結晶(jing)應待其(qi)融(rong)解(jie)後(hou)配(pei)制。
2、垂直(zhi)倒(dao)液(ye),迅(xun)速(su)、幹脆(cui),重(zhong)復(fu)2-3次(ci),不(bu)要手腕左(zuo)右(you)搖(yao)擺(bai)、旋(xuan)轉(zhuan)來(lai)倒(dao)液(ye)體(ti)。
3、倒(dao)液(ye)後(hou)將酶(mei)標板放(fang)在吸(xi)水紙拍幹。用(yong)幹凈的濾(lv)紙,不要用(yong)衛生(sheng)紙,因為細(xi)小粉(fen)塵(chen)或(huo)者(zhe)碎屑(xie)容(rong)易(yi)吸(xi)附(fu)到(dao)孔(kong)底,導致洗(xi)板不幹凈,結(jie)果偏(pian)高(gao)或(huo)偏(pian)低,重(zhong)復(fu)孔(kong)的數值(zhi)也會相(xiang)差(cha)很大(da)。
4、每(mei)孔(kong)加300uL洗(xi)液,太(tai)多將溢(yi)出孔(kong)外(wai)汙(wu)染(ran)相(xiang)鄰的孔(kong)。特別(bie)是(shi)每(mei)次(ci)洗(xi)板的前兩(liang)遍,若(ruo)高濃度(du)孔(kong)流(liu)串(chuan)到(dao)低濃度(du)孔(kong)或(huo)空(kong)白孔(kong),其造(zao)成(cheng)的交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)將無法洗(xi)掉,背(bei)景(jing)增(zeng)高(gao)。
5、加入(ru)洗(xi)液浸(jin)泡30s。洗(xi)板時間太(tai)短,洗(xi)滌效果不佳(jia)。延長(chang)洗(xi)板時間和(he)增(zeng)加洗(xi)板次數可(ke)以使(shi)背(bei)景(jing)更(geng)幹凈。
6、每(mei)次(ci)拍板不要重(zhong)復(fu)在壹個地(di)方拍,特別(bie)是(shi)洗(xi)去酶(mei)的步(bu)驟(zhou);拍板不宜過輕(qing),否(fou)則拍不(bu)幹凈,拍(pai)板不要太(tai)重(zhong),以至(zhi)把(ba)板條給(gei)拍(pai)斷。每(mei)次(ci)洗(xi)板後(hou)輕(qing)叩幾下(xia),最後(hou)壹次壹定(ding)要(yao)扣(kou)幹凈。
7、不(bu)管(guan)用(yong)多道(dao)加樣(yang)器(qi)、洗(xi)瓶、吸(xi)管,還(hai)是(shi)洗(xi)板機,嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明書操(cao)作(zuo)不要減少(shao)洗(xi)滌體(ti)積(ji)、洗(xi)滌時(shi)間(jian)和(he)次(ci)數。
8、扣(kou)幹後(hou)的酶(mei)標板立即加液(ye),不(bu)能幹板太(tai)久(jiu)。
註(zhu):以上資(zi)料(liao)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao),具體產(chan)品(pin)信息(xi)請(qing)咨詢技術(shu)老(lao)師(shi)或(huo)品(pin)牌供(gong)應商(shang)。
ELISA試(shi)劑盒本生(sheng)壹直(zhi)視質(zhi)量控制為(wei)企(qi)業(ye)的生(sheng)命,追求(qiu)企(qi)業(ye)競(jing)爭(zheng)力(li)的不(bu)斷提(ti)升。公(gong)司在經營中始終(zhong)秉承:遵(zun)紀(ji)守法,嚴於律己(ji),寬(kuan)仁以待,敢(gan)於承擔(dan)的企(qi)業(ye)精(jing)神(shen)作(zuo)為標準(zhun),以過(guo)硬(ying)的質(zhi)量和(he)優(you)良(liang)的服(fu)務來(lai)維(wei)護和(he)拓(tuo)展(zhan)市場,較(jiao)大(da)限(xian)度(du)的滿(man)足客(ke)戶(hu)的需(xu)求(qiu)。與客(ke)戶(hu)的共(gong)贏,是(shi)我們的發展(zhan)目(mu)標。本生(sheng)!您信任(ren)的合(he)作夥(huo)伴。我們願與您真(zhen)誠合作,共(gong)創(chuang)美(mei)好的未(wei)來(lai)。本生(sheng)試(shi)劑盒 Elisa試(shi)劑盒 ELISA實驗(yan)
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