瓊脂糖電泳(yong)常見(jian)問題及解決(jue)方(fang)案

　　以(yi)下(xia)是瓊脂糖電泳(yong)常見(jian)問題及解決(jue)方(fang)案的(de)總(zong)結：

　　壹(yi)、‌條帶(dai)異(yi)常問(wen)題‌

　　條帶模糊(hu)/拖尾(wei)‌

　　原(yuan)因(yin)‌：DNA降(jiang)解、緩沖液(ye)陳(chen)舊或上(shang)樣過量

　　解決(jue)‌：

　　使(shi)用(yong)新(xin)鮮緩沖液(ye)(TAE/TBE)，避(bi)免(mian)反復使(shi)用(yong);

　　減(jian)少(shao)上(shang)樣量(每(mei)孔(kong)≤10μL)，避免(mian)超(chao)載;

　　檢查(zha)核(he)酸酶(mei)汙(wu)染(ran)，確保(bao)樣品(pin)純(chun)度。

　　條帶扭曲(qu)或(huo)"笑(xiao)臉型"‌

　　原(yuan)因(yin)‌：電(dian)場(chang)不均(jun)、梳(shu)子拔出(chu)不當(dang)或(huo)膠(jiao)體凝固不均(jun)

　　解(jie)決(jue)‌：

　　預(yu)電泳(yong)5分鐘(zhong)(低(di)電壓(ya))平衡電場(chang);

　　垂直(zhi)緩慢拔梳(shu)子，避(bi)免(mian)孔(kong)變形。

　　Marker條帶不清(qing)晰‌

　　原(yuan)因(yin)‌：膠(jiao)濃(nong)度不合(he)適或(huo)染(ran)料分(fen)布不均(jun)

　　解(jie)決(jue)‌：

　　調(tiao)整膠(jiao)濃(nong)度(0.8%-2%按(an)片段大小選(xuan)擇);

　　改(gai)用(yong)泡(pao)染(ran)法(fa)(如(ru)GelRed後染(ran)色)。

　　二(er)、‌電泳(yong)過程(cheng)問(wen)題‌

　　DNA遷移(yi)異(yi)常‌

　　電(dian)壓(ya)過高(gao)‌：>10V/cm易(yi)致條帶(dai)擴(kuo)散(san)，建(jian)議(yi)5-8V/cm;

　　緩沖液(ye)錯(cuo)誤(wu)‌：避免(mian)用(yong)自(zi)來(lai)水(shui)或(huo)高(gao)濃(nong)度母液，需1×TAE/TBE。

　　凝膠(jiao)漂(piao)浮或緩沖液(ye)不流動‌

　　原(yuan)因(yin)‌：冷(leng)卻(que)泵(beng)故(gu)障(zhang)或(huo)密(mi)封不良(liang)

　　解(jie)決(jue)‌：檢查(zha)設備(bei)密(mi)封性(xing)，調(tiao)整(zheng)蠕動泵(beng)速度。

　　三(san)、‌其(qi)他關(guan)鍵問(wen)題‌

　　無條帶(dai)顯示(shi)‌

　　原(yuan)因(yin)‌：電(dian)極(ji)接觸不良(liang)、DNA未染(ran)色或(huo)樣品(pin)降(jiang)解

　　解(jie)決(jue)‌：檢查(zha)電(dian)極(ji)連接，確認(ren)染(ran)料活(huo)性(xing)。

　　背(bei)景(jing)熒光(guang)高(gao)‌

　　原(yuan)因(yin)‌：膠(jiao)體雜(za)質(zhi)或紫外(wai)曝(pu)光(guang)過久

　　解決(jue)‌：過(guo)濾瓊脂糖溶(rong)液，縮短紫外(wai)觀(guan)察(cha)時間。

　　拖(tuo)尾(wei)現(xian)象‌

　　原(yuan)因(yin)‌：DNA結合蛋(dan)白或(huo)鹽(yan)分汙(wu)染(ran)

　　解決(jue)‌：酚(fen)/氯仿(fang)純(chun)化(hua)樣品(pin)，乙(yi)醇沈(chen)澱(dian)去(qu)鹽(yan)。

　　四(si)、‌預(yu)防(fang)性(xing)建(jian)議(yi)‌

　　制膠(jiao)‌：微波加(jia)熱瓊脂糖至透明，冷卻(que)至60℃再加(jia)染(ran)料;

　　維護‌：每(mei)次(ci)使(shi)用(yong)後(hou)蒸(zheng)餾水(shui)沖洗電極(ji)，避(bi)免(mian)鹽(yan)結晶腐(fu)蝕(shi);

　　保(bao)存‌：Marker需-20℃避光(guang)保存，避免(mian)反復凍融(rong)。

　　通(tong)過(guo)規(gui)範操作與(yu)針(zhen)對(dui)性(xing)調(tiao)整(zheng)，可顯著(zhu)提(ti)升(sheng)電(dian)泳(yong)結果質(zhi)量。

　　BS-300   基礎性(xing)電(dian)泳(yong)儀電(dian)源

　　BS-600C  通用(yong)型電(dian)泳(yong)儀電(dian)源

　　BS-mini01  垂直(zhi)電(dian)泳(yong)槽(雙板)

　　BS-mini04  垂直(zhi)電(dian)泳(yong)槽(四(si)板)

　　BS-ZY03   轉印(yin)電(dian)泳(yong)槽(WB雙板和(he)鉑樂(le)通(tong)用(yong))

　　BS-ZY04   轉印(yin)電(dian)泳(yong)槽 (WB四(si)板)

　　BS-sub02  瓊脂糖電泳(yong)槽

　　註：以(yi)上(shang)資料僅(jin)供參(can)考(kao)，具體請咨(zi)詢(xun)技術(shu)老(lao)師(shi)。

　　瓊脂糖電泳(yong) 天津(jin)本生(sheng)壹(yi)直(zhi)視(shi)質(zhi)量控制為企業的(de)生命(ming)，追(zhui)求企業競(jing)爭力的(de)不斷提(ti)升(sheng)。公(gong)司(si)在(zai)經(jing)營(ying)中始(shi)終秉承：遵(zun)紀守法(fa)，嚴於(yu)律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁以(yi)待，敢於(yu)承(cheng)擔的(de)企業精神(shen)作為標準，以(yi)過(guo)硬的(de)質(zhi)量和(he)優良(liang)的(de)服務(wu)來(lai)維護和(he)拓展(zhan)市(shi)場(chang)，較大限(xian)度的(de)滿(man)足客戶(hu)的(de)需求。與(yu)客戶(hu)的(de)共贏，是(shi)我(wo)們的(de)發(fa)展目標。本生(sheng)!您信任的(de)合作(zuo)夥(huo)伴(ban)。我(wo)們願與(yu)您(nin)真(zhen)誠合(he)作，共創美好的(de)未來(lai)。