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酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附(fu)測定(ding)(ELISA)原(yuan)理
酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附(fu)測定(ding)(ELISA)是(shi)壹種(zhong)基於抗原(yuan)-抗(kang)體特異性(xing)結(jie)合與(yu)酶(mei)催(cui)化(hua)顯色(se)的免疫檢(jian)測技術(shu),其核(he)心(xin)原理(li)可分(fen)為(wei)以下關鍵步(bu)驟(zhou):
壹、固(gu)相載(zai)體包被(bei)
抗(kang)原(yuan)/抗(kang)體固(gu)定(ding)化(hua)
將(jiang)已知(zhi)抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體吸(xi)附(fu)於固(gu)相載(zai)體(通常(chang)為(wei)聚苯(ben)乙烯微(wei)孔板(ban))表(biao)面(mian),並保(bao)持其免(mian)疫活性
封閉處(chu)理(li)
使用(yong)無關蛋白(如(ru)BSA)封閉未(wei)結(jie)合位(wei)點(dian),減(jian)少非特異性(xing)結(jie)合

二(er)、特(te)異性(xing)結(jie)合反(fan)應(ying)
樣本(ben)孵育(yu)
加(jia)入待測樣本(ben),目標(biao)分(fen)子(zi)(抗原(yuan)或(huo)抗(kang)體)與(yu)固(gu)相載(zai)體上(shang)的對應(ying)結(jie)合物(wu)形成(cheng)免(mian)疫復(fu)合物(wu)
洗(xi)滌分(fen)離(li)
通(tong)過(guo)多(duo)次洗(xi)滌去(qu)除(chu)未(wei)結(jie)合的遊(you)離成(cheng)分(fen),確(que)保(bao)反應(ying)特異性(xing)
三(san)、酶(mei)標(biao)記(ji)與(yu)信(xin)號放大(da)
酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang)/抗(kang)原
加(jia)入酶(mei)標(biao)記(ji)的抗體或抗(kang)原(yuan)(如HRP標(biao)記(ji)),與(yu)目標(biao)分(fen)子(zi)特異性(xing)結(jie)合
催(cui)化(hua)顯色(se)
加(jia)入底物(如TMB)後(hou),酶(mei)催(cui)化(hua)底(di)物產生有色產物,顏色(se)深淺與(yu)目標(biao)物(wu)濃度成(cheng)正(zheng)比
四、檢(jian)測與(yu)定(ding)量(liang)
光學測量
使用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)測定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)(OD值),通(tong)過(guo)標(biao)準曲(qu)線計(ji)算(suan)目標(biao)物(wu)濃度
靈(ling)敏(min)度優勢(shi)
酶(mei)的高效(xiao)催(cui)化(hua)作用(yong)可(ke)放大(da)信(xin)號,檢(jian)測限可達(da)皮(pi)摩(mo)爾(er)級別
常(chang)見(jian)方(fang)法(fa)類(lei)型
類(lei)型 特(te)點 適用(yong)場(chang)景(jing)
直接(jie)法(fa) 酶(mei)標(biao)壹(yi)抗直接(jie)結(jie)合抗(kang)原(yuan),步(bu)驟(zhou)簡單但(dan)靈(ling)敏(min)度較(jiao)低 單(dan)壹(yi)抗原(yuan)檢(jian)測
間接(jie)法(fa) 使用(yong)酶(mei)標(biao)二(er)抗(kang)放大(da)信(xin)號,提(ti)高靈(ling)敏(min)度 抗體檢(jian)測(如血清學)
夾心(xin)法(fa) 需兩種(zhong)特異性(xing)抗(kang)體分(fen)別捕(bu)獲和(he)檢(jian)測抗原,特(te)異性(xing)最(zui)高 復(fu)雜樣本(ben)中的微量(liang)抗原(yuan)
註:以(yi)上(shang)資料(liao)僅(jin)供(gong)參考,具(ju)體請咨詢技術(shu)老師或(huo)供(gong)應商(shang)。
註:實(shi)際(ji)應用(yong)中(zhong)需根(gen)據(ju)檢(jian)測目標(biao)選(xuan)擇方法(fa)類(lei)型,並優(you)化(hua)包(bao)被(bei)濃度、封(feng)閉條(tiao)件(jian)等參(can)數(shu)。以上(shang)資料(liao)僅(jin)供(gong)參考具(ju)體請咨詢技術(shu)老師或(huo)供(gong)應商(shang)。
天(tian)津(jin)本(ben)生壹直視(shi)質(zhi)量(liang)控(kong)制為(wei)企業(ye)的生命,追(zhui)求(qiu)企業(ye)競(jing)爭(zheng)力(li)的不(bu)斷(duan)提(ti)升(sheng)。公(gong)司在(zai)經(jing)營中始(shi)終(zhong)秉(bing)承(cheng):遵(zun)紀(ji)守法(fa),嚴於律(lv)己,寬仁(ren)以待,敢(gan)於承(cheng)擔(dan)的企業(ye)精神作為(wei)標(biao)準,以(yi)過硬的質量(liang)和優(you)良(liang)的服務(wu)來(lai)維護和拓展(zhan)市場(chang),較(jiao)大限(xian)度(du)的滿足客(ke)戶(hu)的需求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的共贏,是(shi)我們(men)的發展(zhan)目標(biao)。本(ben)生!您(nin)信(xin)任(ren)的合作夥(huo)伴。我們願與(yu)您(nin)真誠合作,共創美(mei)好(hao)的未(wei)來(lai)。天(tian)津(jin)本(ben)生試劑盒
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