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ELISA原理(li)及壹(yi)步法二步法間接法的區別
ELISA(酶(mei)聯免疫(yi)吸附試驗)是壹(yi)種常(chang)用(yong)的免疫(yi)分析(xi)方(fang)法,用(yong)於檢(jian)測樣(yang)本中的特(te)定蛋白(bai)質(zhi)或其(qi)他(ta)生(sheng)物(wu)分子(zi)。其基(ji)本原(yuan)理(li)是將(jiang)抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)固(gu)定在固(gu)相載(zai)體(ti)上,通過(guo)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)與(yu)待(dai)測樣(yang)本中的相應(ying)分子(zi)結合,然(ran)後通過(guo)酶(mei)的催化(hua)作用(yong)產(chan)生(sheng)有色產(chan)物(wu),通過(guo)測(ce)量(liang)產(chan)物(wu)的量(liang)來(lai)確定樣(yang)本中特(te)定分子(zi)的(de)濃度。ELISA有(you)多種(zhong)類(lei)型(xing),包(bao)括(kuo)直(zhi)接法、間接法、夾心(xin)法和競爭(zheng)法,每種方(fang)法都有(you)其(qi)特(te)定的應(ying)用(yong)場(chang)景(jing)和優缺(que)點(dian)。
直接法是將(jiang)抗(kang)原直(zhi)接固定在固(gu)相載(zai)體(ti)上,然後(hou)與待(dai)測樣(yang)本中的抗(kang)體(ti)反(fan)應(ying),再(zai)加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)體(ti),通過(guo)酶(mei)的催化(hua)作用(yong)產(chan)生(sheng)有色產(chan)物(wu),根據(ju)產(chan)物(wu)的量(liang)來(lai)測(ce)定樣(yang)本中的抗(kang)體(ti)濃(nong)度(du)。這種方(fang)法適用(yong)於檢(jian)測已(yi)知(zhi)抗(kang)原對(dui)應的抗(kang)體(ti)。
間(jian)接法則是將(jiang)已(yi)知(zhi)抗(kang)體(ti)與(yu)固(gu)相載(zai)體(ti)結合,然(ran)後與(yu)待(dai)測樣(yang)本中的抗(kang)原反(fan)應(ying),形成抗(kang)原-抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)。清(qing)洗(xi)後(hou),加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)二抗(kang)(檢(jian)測抗(kang)體(ti)),與(yu)抗(kang)原-抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)反(fan)應(ying),形成酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)抗(kang)原-抗(kang)體(ti)復(fu)合(he)物(wu)。最(zui)後(hou)加入(ru)底(di)物(wu)顯色,根據(ju)顏(yan)色反(fan)應(ying)判(pan)斷(duan)結果。間(jian)接法提高了(le)檢(jian)測的(de)靈敏(min)度,適用(yong)於抗(kang)體(ti)的(de)檢(jian)測。
壹(yi)步法和二步法間接法的區別主要在於操作步驟(zhou)和(he)反(fan)應(ying)體(ti)系的設(she)計(ji)上:
壹(yi)步法中,待(dai)測樣(yang)本和(he)固相酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)同(tong)時加(jia)入(ru)到反(fan)應(ying)體(ti)系中,反(fan)應(ying)完(wan)成後(hou)直(zhi)接進行顯色反(fan)應(ying)。這種方(fang)法操作簡(jian)便快(kuai)捷,但易出(chu)現非(fei)特(te)異(yi)性(xing)幹(gan)擾(rao)。
二步法中,待(dai)測樣(yang)本首(shou)先與固(gu)相酶(mei)標(biao)抗(kang)體(ti)反(fan)應(ying),清(qing)洗(xi)後(hou)再(zai)加(jia)入(ru)底(di)物(wu)進行(xing)顯色反(fan)應(ying)。二步法雖(sui)然(ran)操作相對(dui)繁瑣,但可(ke)以減(jian)少(shao)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)幹(gan)擾(rao),提高實(shi)驗(yan)的(de)準確性(xing)。
綜(zong)上所(suo)述,ELISA方(fang)法的選擇(ze)取決於具體(ti)的(de)實(shi)驗(yan)需(xu)求(qiu)和分析(xi)目(mu)標(biao)。壹(yi)步法和二步法間接法的選擇(ze)則主要基(ji)於對實(shi)驗(yan)靈敏(min)度和操作簡(jian)便性(xing)的權(quan)衡(heng)。
本生(sheng)壹(yi)直視(shi)質(zhi)量(liang)控制(zhi)為(wei)企業(ye)的生(sheng)命,追求(qiu)企業(ye)競爭(zheng)力的不(bu)斷(duan)提升。公司在(zai)經(jing)營(ying)中始終(zhong)秉(bing)承(cheng):遵紀守(shou)法,嚴於律己(ji),寬(kuan)仁以待(dai),敢於承擔(dan)的(de)企業(ye)精(jing)神(shen)作為標(biao)準,以過(guo)硬(ying)的(de)質(zhi)量(liang)和優良(liang)的(de)服務來(lai)維(wei)護和(he)拓(tuo)展市(shi)場(chang),較大限(xian)度的(de)滿足(zu)客(ke)戶的需求(qiu)。與客(ke)戶的共(gong)贏(ying),是我們的發展目(mu)標(biao)。本生(sheng)!您(nin)信任(ren)的(de)合(he)作夥伴(ban)。我們願與(yu)您(nin)真誠合作(zuo),共(gong)創(chuang)美好(hao)的(de)未(wei)來(lai)。
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