“elisa試劑(ji)盒(he)"常見(jian)的(de)問(wen)題(ti)及解(jie)答(da)

　　問(wen)：抗(kang)原檢(jian)測出(chu)的(de)分子(zi)量比(bi)資料(liao)上(shang)的(de)大(da)，是(shi)怎(zen)麽回事?

　　答：a)抗(kang)原形成了二(er)聚(ju)體。增(zeng)多巰基(ji)乙醇(chun)量，煮沸(fei)變性(xing)時(shi)間延長，可(ke)以(yi)打開(kai)二(er)聚(ju)體。b)蛋(dan)白(bai)本身(shen)的(de)修(xiu)飾(shi)如：糖(tang)基(ji)化，磷(lin)酸(suan)化等(deng)。

　　問(wen)：蛋(dan)白(bai)轉(zhuan)移(yi)不到膜(mo)上(shang)，但膠(jiao)上(shang)有，同(tong)時(shi)Marker 轉上(shang)去了，為什(shen)麽?

　　答：可(ke)能(neng)是：a)樣品(pin)濃(nong)度過低;b)轉(zhuan)移(yi)時(shi)間不夠。

　　問(wen)：磷(lin)酸(suan)化抗(kang)體的(de)檢測(ce)樣(yang)本制備(bei)時(shi)是否(fou)壹定要加(jia)NaF等?

　　答：NaF是(shi)壹種廣(guang)譜磷(lin)酸(suan)化酶的(de)抑(yi)制劑，壹般加(jia)。但是不(bu)加也可(ke)以(yi)，大(da)部分時(shi)候是(shi)不(bu)用(yong)加的(de)。

　　問(wen)：要驗(yan)證(zheng)某個細(xi)胞(bao)上(shang)有無該(gai)蛋(dan)白(bai)的(de)存在，需(xu)要做(zuo)免(mian)疫組化(hua)和western blot試(shi)驗(yan)嗎(ma)?做這兩個試(shi)驗(yan)時(shi)的(de)壹抗(kang)和二(er)抗(kang)可(ke)以(yi)共用嗎?

　　答：①免(mian)疫組化(hua)可(ke)以(yi)用來(lai)進行(xing)定位，但是不能(neng)定量，而(er)且(qie)有時(shi)會有(you)假陽(yang)性(xing)，不(bu)易與背(bei)景(jing)區分;Western blot可(ke)以(yi)特異(yi)性(xing)檢(jian)測某個蛋(dan)白(bai)質(zhi)分(fen)子(zi)，進行定量，但是不能(neng)定位。

　　②兩種實(shi)驗(yan)的(de)壹抗(kang)有時(shi)候不(bu)能(neng)通用(yong)，公(gong)司的(de)產(chan)品(pin)說(shuo)明壹般都會說(shuo)明可(ke)以(yi)進行什麽實驗(yan)，在免(mian)疫組化(hua)時(shi)，是否(fou)適(shi)合(he)石(shi)蠟切(qie)片(pian)或者(zhe)冰凍切(qie)片(pian)。

　　問(wen)：做(zuo)Western Blot時(shi)，提取(qu)蛋(dan)白(bai)後(hou)凍存(未(wei)加蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑)，用的(de)博士德(de)的(de)壹抗(kang)，開(kai)始(shi)還有點(dian)痕跡，現(xian)在越(yue)來(lai)越差(cha)，上(shang)樣量已(yi)加到120μg，換了個santa cloz的(de)壹抗(kang)仍不(bu)行。是(shi)什麽原因?蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑單加PMSF行(xing)嗎(ma)?

　　答：懷疑是樣品(pin)問(wen)題(ti)，可(ke)能(neng)是：1，樣品(pin)不(bu)能反復(fu)凍融(rong);2，樣(yang)品(pin)未(wei)加蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑。同(tong)時(shi)，建議檢(jian)查(zha)Western Blot過程，提(ti)高壹抗(kang)濃度(du)。對於(yu)加(jia)蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑來(lai)說，壹般加(jia)PMSF就(jiu)可(ke)以(yi)了，能多加幾(ji)中種蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑。

　　問(wen)：細(xi)胞(bao)水(shui)平(ping)要做(zuo)western blot，多少細胞(bao)提(ti)的(de)蛋(dan)白(bai)夠(gou)做(zuo)western blot?

　　答：壹般5×10^6就(jiu)足(zu)夠(gou)了

　　問(wen)：同(tong)壹樣(yang)品(pin)能(neng)同(tong)時(shi)提RNA又(you)提(ti)蛋(dan)白(bai)麽?這樣對(dui)western blot有無影(ying)響(xiang)?

　　答(da)：能，沒有問(wen)題(ti)。

　　問(wen)：同(tong)壹蛋(dan)白(bai)樣(yang)品(pin)能(neng)同(tong)時(shi)進行(xing)兩種因(yin)子(zi)的(de)Western Blot檢測(ce)嗎(ma)?

　　答：當(dang)然(ran)可(ke)以(yi)，有的(de)甚至可(ke)以(yi)同(tong)時(shi)測幾(ji)十種樣(yang)品(pin)。

　　問(wen)：如果(guo)目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)是(shi)膜(mo)蛋(dan)白(bai)或是胞漿(jiang)蛋(dan)白(bai)，操(cao)作(zuo)需(xu)要註意(yi)什(shen)麽?

　　答：如果(guo)是(shi)膜(mo)蛋(dan)白(bai)和(he)胞(bao)漿(jiang)蛋(dan)白(bai)，所(suo)用(yong)的(de)去垢劑要溫(wen)和(he)得多，這時(shi)加上(shang)NaF去抑(yi)制磷(lin)酸(suan)化酶的(de)活性(xing)。

　　問(wen)：我的(de)樣品(pin)的(de)蛋(dan)白(bai)含(han)量(liang)很低，每(mei)微(wei)升不(bu)到1微(wei)克，但(dan)是在轉(zhuan)膜(mo)時(shi)經常會(hui)發現只(zhi)有壹部分蛋(dan)白(bai)轉(zhuan)到了膜(mo)上(shang)，就(jiu)是(shi)在轉(zhuan)膜(mo)後(hou)染膠(jiao)發現有(you)的(de)孔(kong)所(suo)有的(de)蛋(dan)白(bai)條帶(dai)都在，只(zhi)是顏色(se)變淡了，有什(shen)麽辦法可(ke)以(yi)解決(jue)?

　　答(da)：妳可(ke)以(yi)加大(da)上(shang)樣量，沒有問(wen)題(ti)，還(hai)有(you)轉移(yi)時(shi)妳可(ke)以(yi)用減少電(dian)流(liu)延長時(shi)間，加20%甲(jia)醇(chun)。

　　ELISA試劑盒(he) 本生壹直視(shi)質(zhi)量控(kong)制為企業的(de)生命(ming)，追(zhui)求企業競(jing)爭(zheng)力的(de)不斷(duan)提(ti)升。公司在經(jing)營(ying)中始(shi)終(zhong)秉(bing)承：遵(zun)紀(ji)守(shou)法，嚴於(yu)律(lv)己，寬仁以(yi)待(dai)，敢於(yu)承擔(dan)的(de)企業精(jing)神作(zuo)為(wei)標(biao)準(zhun)，以(yi)過硬(ying)的(de)質量(liang)和(he)優良的(de)服務(wu)來(lai)維護和(he)拓展市(shi)場，較(jiao)大(da)限(xian)度(du)的(de)滿足(zu)客(ke)戶的(de)需(xu)求。與客(ke)戶的(de)共贏，是我們(men)的(de)發展目(mu)標(biao)。本生!您(nin)信(xin)任的(de)合(he)作(zuo)夥(huo)伴(ban)。我們(men)願與您(nin)真誠(cheng)合(he)作(zuo)，共創美(mei)好(hao)的(de)未(wei)來(lai)。