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天(tian)津本(ben)生-全黑全白96孔(kong)板鋪(pu)板技(ji)巧
剛開(kai)始用(yong)96孔(kong)板種(zhong)細胞 時細胞總是(shi)分布不均勻(yun),第(di)二天(tian)就會發(fa)現有(you)些地(di)方出(chu)現堆積性(xing)生(sheng)長(chang),而還(hai)有不少地(di)方細(xi)胞則很稀疏,細(xi)胞(bao)密(mi)集(ji)的(de)地(di)方因(yin)細胞(bao)與(yu)細(xi)胞(bao)之(zhi)間(jian)的(de)接觸(chu)抑(yi)制影響(xiang)細(xi)胞的生(sheng)長(chang),這樣就(jiu)很(hen)難評價幹(gan)預(yu)因(yin)素對(dui)細胞(bao)的(de)作用,因(yin)此(ci)將(jiang)96孔(kong)板種(zhong)均勻(yun)也是(shi)進行後續(xu)實驗時候,現將(jiang)天(tian)津本(ben)生小編以用(yong)的(de)舊(jiu)法(fa)和(he)用(yong)的(de)新法比較(jiao)壹下,以讓(rang)大家看看各(ge)自優缺。
1、舊(jiu)法(fa):種(zhong)過(guo)板子後,用手將96孔(kong)板平(ping)拿(na)起,左(zuo)右晃動(dong)幾下,然(ran)後再後晃動(dong)幾下,不過這種方法(fa)5個(ge)復(fu)孔(kong)中(zhong)總有2-3個(ge)孔(kong)中(zhong)細胞(bao)分布不均勻(yun),多數(shu)情(qing)況下是(shi)孔(kong)的(de)中間(jian)出(chu)現成(cheng)堆分布,為(wei)此(ci)苦(ku)惱(nao)了壹陣子。還又(you)壹次(ci)見(jian)壹師(shi)姐將種(zhong)好的(de)板子放在(zai)搖(yao)床(chuang)上(shang)搖(yao)了幾(ji)分鐘(zhong),結果(guo)更慘了(le),細胞(bao)全(quan)部(bu)跑到中間(jian)了(le)。

壹般(ban)96孔(kong)板我(wo)每孔(kong)是(shi)加100微(wei)升(sheng)細(xi)胞懸(xuan)液(ye),從(cong)孔(kong)的(de)左邊(bian)靠近底部(bu)加(jia)入,加完半邊板後,將未(wei)加的(de)細(xi)胞(bao)懸液混(hun)壹下再(zai),繼(ji)續(xu)加剩余(yu)的(de)半邊板子,都加完後蓋上(shang)蓋(gai)子,左手輕輕扶(fu)住(zhu)板的(de)左邊,右手輕輕敲(qiao)擊(ji)板的(de)右邊緣(yuan),註意(yi)把(ba)握(wo)力度(我(wo)壹般(ban)輕(qing)巧敲(qiao)三下),太強(qiang)或(huo)次數(shu)太多會導致(zhi)細(xi)胞集(ji)中成堆,將(jiang)板順(shun)時針旋(xuan)轉(逆(ni)時針效果(guo)不好),依(yi)次敲(qiao)擊(ji)剩余(yu)三個(ge)邊(bian),靜(jing)置(zhi)約5分鐘(zhong),放(fang)入37度培養 箱。
2、新(xin)法(fa):這種方法(fa)簡(jian)直是(shi)太好(hao)了(le),種的(de)很均勻(yun)。先(xian)用(yong)移液(ye)槍(qiang)將(jiang)吹打均勻(yun)的(de)細(xi)胞吸(xi)起來,讓後將槍(qiang)頭(tou)緊(jin)貼(tie)著(zhe)孔(kong)的(de)壹側(ce)壁(bi)(註意(yi)槍(qiang)頭(tou)的尖不要(yao)接觸(chu)孔(kong)底),然(ran)後將槍(qiang)頭(tou)中的(de)細(xi)胞緩緩(huan)的打下去(qu),種好(hao)之(zhi)後千萬(wan)不要(yao)搖(yao)晃板子,直接放到顯微(wei)鏡(jing) 下看就可以了(le),此(ci)方法(fa)可以說(shuo)是(shi)100%的有效吧。 希(xi)望(wang)對(dui)大家有(you)幫(bang)助(zhu)。
補(bu)充(chong):從(cong)6孔(kong)板到96空板要(yao)細胞分散均勻(yun),先(xian)用(yong)培養基(ji)把(ba)細(xi)胞稀釋好(hao),再(zai)把(ba)培養板放(fang)在(zai)適當(dang)的位置(zhi),加入細胞時和加入細(xi)胞(bao)後不移動(dong)培養板;如果(guo)空中(zhong)有的(de)地(di)方沒(mei)有(you)培養基(ji)可吹打,但(dan)不要(yao)移動(dong)培養板,加(jia)入細胞後靜置(zhi)20-30分鐘(zhong)再(zai)移入培養箱。這樣細(xi)胞(bao)壹般(ban)都能(neng)長(chang)的很(hen)均勻(yun)。當(dang)然(ran),提(ti)是(shi)細胞消(xiao)化的很(hen)好。
天(tian)津本(ben)生-全黑全白96孔(kong)板鋪(pu)板技(ji)巧,我(wo)司由(you)具有(you)行業(ye)背(bei)景和豐(feng)富(fu)市場(chang)經(jing)驗(yan)的業人士(shi)組(zu)成,於(yu)為(wei)生(sheng)命科學(xue)研究(jiu)域(yu)提(ti)供(gong)產品,為(wei)廣(guang)大科研(yan)工(gong)作者提(ti)供(gong)服(fu)務(wu)。 既能(neng)滿(man)足(zu)研(yan)發(fa)類(lei)客戶(hu)對(dui)產品種(zhong)類(lei)、包裝的(de)特(te)殊(shu)要(yao)求,也能(neng)滿(man)足(zu)生(sheng)產型企(qi)業從小試、中試到規(gui)模化生產各(ge)個(ge)階段(duan)的綜(zong)合需求。本生(sheng)!您信任(ren)的(de)合作夥(huo)伴。我(wo)們願(yuan)與(yu)您真誠(cheng)合(he)作,共創(chuang)美好(hao)的(de)未(wei)來。
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