BUNSEN酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)工作(zuo)原理及實(shi)驗操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

　　酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)是基於(yu)經(jing)典酶(mei)聯(lian)夾(jia)心(xin)技(ji)術原(yuan)理(li)，能測(ce)量(liang)人促卵泡(pao)素(su)(FSH)，只(zhi)能用(yong)於(yu)研(yan)究用(yong)途(tu)，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)醫(yi)學(xue)診(zhen)斷。

　　酶聯免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)工作(zuo)原理:

　　促(cu)卵泡(pao)素(su)(FSH)是動物(wu)腦(nao)垂(chui)體(ti)分(fen)泌作(zuo)用(yong)於(yu)卵巢(chao)卵泡(pao)生(sheng)長、發育、分(fen)化、成(cheng)熟和排(pai)卵的(de)重(zhong)要繁殖(zhi)激素(su).由(you)於(yu)是生物(wu)大(da)分(fen)子,不能透過(guo)細(xi)胞膜(mo),FSH必(bi)須(xu)與靶(ba)細(xi)胞膜(mo)上(shang)的(de)促(cu)卵泡(pao)素(su)受(shou)體(ti)(FSHR)結(jie)合(he),經(jing)過(guo)受(shou)體(ti)介(jie)導(dao)將(jiang)信息傳(chuan)遞到(dao)靶(ba)細(xi)胞內(nei),才能發揮其生物(wu)學(xue)功能.所提(ti)供(gong)的(de)ELISA Kit是典型的夾心(xin)法酶(mei)聯免(mian)疫(yi)吸(xi)附測(ce)定試(shi)劑盒(he)(ELISA)。預先(xian)包(bao)被(bei)的(de)抗(kang)體(ti)為(wei)多克(ke)隆抗(kang)體(ti)。檢(jian)測(ce)相(xiang)抗(kang)體(ti)也(ye)為(wei)多克(ke)隆抗(kang)體(ti)，經(jing)生物(wu)素(su)(biotin)標記(ji)。樣品(pin)和生物(wu)素(su)標記(ji)抗(kang)體(ti)先(xian)後(hou)加入酶標板(ban)孔(kong)反應(ying)後，PBS或(huo)TBS洗滌。隨後加入過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)標記(ji)的親和素(su)反應(ying);經(jing)過(guo)PBS或(huo)TBS的*洗滌後用(yong)底(di)物(wu)TMB顯(xian)色。TMB在過(guo)氧化(hua)物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍色，並(bing)在酸的作(zuo)用(yong)下(xia)轉(zhuan)化(hua)成(cheng)zui終的(de)黃(huang)色。顏色的深(shen)淺和樣品(pin)中的(de)待(dai)測(ce)因(yin)子呈正(zheng)相(xiang)關(guan)。

　　酶聯(lian)免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)工作(zuo)環(huan)境:

　　1. 37℃恒溫(wen)箱(xiang)。

　　2. 標準(zhun)規(gui)格(ge)酶(mei)標儀(yi)。

　　3. 自動(dong)洗板機(ji)。

　　4. 單(dan)通(tong)道(dao)或(huo)多通(tong)道(dao)可調節(jie)移(yi)液(ye)器以及其吸(xi)頭。

　　5. 蒸(zheng)餾水(shui)，容(rong)量(liang)瓶等(deng)

　　6. 幹(gan)凈(jing)的試(shi)管和Eppendof管

　　BUNSEN酶(mei)聯免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)操作(zuo)步驟(zhou):

　　1. 確(que)定本(ben)次檢測(ce)所需的(de)已(yi)包被(bei)抗(kang)體(ti)的(de)酶(mei)標板(ban)孔(kong)數目(mu)。

　　2. 將(jiang)倍(bei)比稀(xi)釋(shi)的(de)標準(zhun)品各0.1ml依(yi)次(ci)加入壹(yi)排(pai)7孔(kong)中，1孔(kong)只(zhi)加樣品(pin)稀(xi)釋(shi)液(ye)的作(zuo)為(wei)對照(zhao)。處理(li)後的標本(ben)按(an)100ul每孔(kong)加入。

　　3. 酶標板(ban)加上(shang)蓋(gai)，37℃反應(ying)90分(fen)鐘。

　　4. 反應(ying)後用(yong)自動(dong)洗板機(ji)吸(xi)去(qu)酶(mei)標板(ban)內(nei)的(de)液(ye)體(ti);或(huo)甩去酶(mei)標板(ban)內(nei)液(ye)體(ti)，再對(dui)著吸(xi)水(shui)紙拍(pai)幾(ji)下(xia)。洗(xi)滌2次。

　　5. 將(jiang)準(zhun)備好的(de)生(sheng)物(wu)素(su)抗(kang)體(ti)工(gong)作(zuo)液(ye)按(an)每孔(kong)0.1ml依次(ci)加入。37℃反應(ying)60分(fen)鐘。

　　6. 0.01M TBS或(huo)0.01M PBS洗滌3次，每次浸(jin)泡(pao)1分(fen)鐘左(zuo)右。

　　7. 將(jiang)準(zhun)備好的(de)ABC工(gong)作液(ye)按(an)每孔(kong)0.1ml依次(ci)加入。37℃反應(ying)30分(fen)鐘。

　　8. 0.01M TBS或(huo)0.01M PBS洗滌5次，每次浸(jin)泡(pao)1-2分(fen)鐘左(zuo)右。

　　9. 按(an)每孔(kong)0.1ml依次(ci)加入TMB顯(xian)色工作(zuo)液(ye)，37℃避光反應(ying)，反應(ying)過(guo)程(cheng)中，要經(jing)常的(de)觀察(cha)，當肉(rou)眼可見標準(zhun)品的3-4孔(kong)有(you) 明顯(xian)的梯(ti)度藍色，後3-4孔(kong)差別不明(ming)顯(xian)時，即(ji)可加入TMB終止(zhi)液(ye)0.1ml/孔(kong)。(顯(xian)色反應(ying)zui長不要超(chao)過(guo)30分(fen)鐘)。

　　10. 用(yong)酶(mei)標儀(yi)在450nm測(ce)定O.D.值。

　　11. 根(gen)據(ju)樣品(pin)的(de)吸(xi)光值(zhi)在(zai)坐標上(shang)找出對應(ying)的濃度(du)。用(yong)戶(hu)也(ye)可以使(shi)用(yong)各種應(ying)用(yong)軟(ruan)件來計(ji)算(suan)。應(ying)記住由(you)於(yu)樣品(pin)稀(xi)釋(shi)了(le)N倍(bei)，其實際濃度(du)應(ying)該(gai)×N。

　　酶聯免(mian)疫(yi)試(shi)劑盒(he)本(ben)生壹(yi)直(zhi)視質(zhi)量(liang)控制(zhi)為(wei)企(qi)業(ye)的(de)生(sheng)命，追(zhui)求(qiu)企(qi)業(ye)競爭力的(de)不斷提(ti)升(sheng)。公(gong)司(si)在(zai)經(jing)營中始(shi)終(zhong)秉承：遵(zun)紀守(shou)法，嚴(yan)於律(lv)己，寬仁以待(dai)，敢於承擔的(de)企(qi)業(ye)精(jing)神作(zuo)為(wei)標準(zhun)，以過(guo)硬的(de)質量(liang)和優(you)良的服(fu)務(wu)來維護和拓展市(shi)場，較大限度(du)的(de)滿(man)足(zu)客戶(hu)的需求(qiu)。與客戶(hu)的共贏(ying)，是我(wo)們的發展目(mu)標。本(ben)生!您信任的(de)合(he)作(zuo)夥伴(ban)。我(wo)們願(yuan)與您(nin)真誠合(he)作(zuo)，共創美(mei)好的(de)未(wei)來(lai)。本(ben)生實驗耗(hao)材(cai)