ELISA實(shi)驗要點(dian)：ELISA加樣(yang)操(cao)作(zuo)您了解多少(shao)?
 

　　那在(zai)ELISA實驗中，加(jia)樣 壹(yi)定是(shi)繞不開(kai)的(de)壹環(huan)!ELISA測(ce)定操(cao)作(zuo)非(fei)常(chang)簡(jian)單，壹般涉及(ji)到(dao)樣本(ben)的(de)收集(ji)保(bao)存、試(shi)劑(ji)準備、加(jia)樣、溫(wen)育、洗(xi)板、顯色、結果(guo)判斷(duan)和結果(guo)報告及(ji)解釋等(deng)方(fang)面，其(qi)中任壹(yi)步驟(zhou)的(de)不當(dang)都會(hui)影響(xiang)測定結果(guo)，且尤(you)以(yi)加樣(yang)、溫育和(he)洗(xi)板等步驟(zhou)為甚(shen)。

　　ELISA實驗中壹(yi)般需要 4 次加(jia)樣，即加樣本(ben)、加(jia)檢測抗(kang)體、加(jia)底(di)物(wu)和加(jia)終止(zhi)液。

　　● 實驗室使(shi)用的(de)微量(liang)加(jia)樣(yang)器應註(zhu)意保養(yang)並定期(qi)校正(zheng)。ELISA比(bi)較(jiao)敏(min)感，每孔(kong)加(jia)入(ru)液體量(liang)誤差會(hui)導致最(zui)後(hou)讀(du)數差別(bie)，因此避(bi)免(mian)儀(yi)器(qi)帶(dai)來(lai)誤差。

　　● 加(jia)樣前，溶(rong)液充(chong)分混(hun)勻(yun)，加樣時不可(ke)90度向孔(kong)中(zhong)滴(di)加(jia)液體，否(fou)則(ze)會(hui)導致液體殘留在(zai)吸(xi)頭(tou)上，加樣(yang)不準(zhun)確(que)。正確(que)加樣方(fang)法(fa)應為(wei)45度，吸(xi)頭(tou)貼著孔壁(bi)和液面的(de)交界(jie)處(chu)加(jia)入。

　　● 加樣(yang)品時(shi)，單孔用量要求(qiu)：≥50ul/指(zhi)標，如(ru)需要做(zuo)復孔(kong)則(ze)所(suo)需樣(yang)本(ben)量(liang)≥100ul/指(zhi)標。如(ru)果(guo)樣本(ben)量(liang)不充(chong)足，具(ju)體用量可(ke)咨(zi)詢(xun)您的(de)專(zhuan)屬(shu)銷售(shou)。

　　● 加樣時速(su)度不可(ke)過(guo)快(kuai)，否(fou)則(ze)無(wu)法(fa)保證微量加樣的(de)準確(que)性(xing)和(he)均(jun)壹(yi)性(xing)。

　　● 加(jia)樣(yang)時避(bi)免(mian)液體濺出，如有(you)樣(yang)本(ben)濺出，應用吸(xi)水(shui)紙輕(qing)輕(qing)拭(shi)幹(gan)，並做相應記(ji)錄。

　　● 每次加(jia)樣順(shun)序(xu)壹致，尤(you)其(qi)底(di)物(wu)、終止(zhi)液順(shun)序(xu)壹致，保(bao)證每個(ge)孔顯色時間相同(tong)。

　　● 加(jia)完(wan)顯色液後(hou)，放(fang)入(ru)壹個(ge)可(ke)推(tui)拉的(de)抽屜內(nei)，就可(ke)以(yi)避(bi)光振(zhen)蕩(dang)了(le)。

　　加樣防(fang)錯小竅門(men)

　　(以(yi)下問(wen)題可(ke)能(neng)因多(duo)種原因引(yin)起，本(ben)文(wen)僅(jin)討論加(jia)樣的(de)解決方(fang)法(fa))

　　Q： 同壹個(ge)樣本(ben)間(jian)的(de)各(ge)個(ge)復孔(kong)的(de)讀數有(you)顯著(zhu)性差異?

　　A： 加樣(yang)量多(duo)少(shao)不壹(yi)，操(cao)作(zuo)時間長短(duan)不壹(yi)。重(zhong)復同(tong)壹(yi)樣本(ben)時(shi)，加(jia)樣量(liang)與加樣(yang)時(shi)間(jian)理應相同(tong)，同(tong)時(shi)也應註(zhu)意移液器的(de)校準(zhun)。加(jia)樣(yang)後(hou)可(ke)輕(qing)微(wei)晃(huang)動(dong)酶(mei)標板使(shi)反應液充(chong)分混(hun)合(he)。

　　Q： 陽性對照(zhao)讀(du)數不正(zheng)常(chang)?

　　A： 加(jia)樣量(liang)不正(zheng)確(que)。應保(bao)持每次加(jia)樣的(de)步驟(zhou)不要有(you)太(tai)大(da)的(de)差異，有(you)條件(jian)的(de)應該考慮(lv)使(shi)用排(pai)槍(qiang)。

　　Q： 血(xue)清本(ben)底(di)高(gao)?

　　A： 加(jia)樣時(shi)使(shi)用同壹槍(qiang)頭、交(jiao)叉汙染。每次吸(xi)樣(yang)註意更換(huan)吸(xi)頭(tou)，做到壹樣(yang)壹(yi)吸(xi)頭(tou)，避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染。

　　Q： 實驗的(de)標準(zhun)曲(qu)線(xian)和(he)測定的(de)重復性(xing)差?

　　A： 1. 可(ke)能(neng)原因：加(jia)樣本(ben)及(ji)試(shi)劑量不準(zhun);孔(kong)間不壹(yi)致;校正(zheng)移液器，吸(xi)嘴要配(pei)套(tao)，裝吸(xi)嘴時要緊密(mi);重復某(mou)壹樣(yang)品時，加樣時間(jian)盡(jin)可(ke)能(neng)與第(di)壹(yi)次接(jie)近(jin);重(zhong)復測(ce)定標本(ben)，操(cao)作(zuo)條件(jian)、人員等應盡(jin)可(ke)能(neng)與上次保(bao)持壹致，以(yi)排(pai)除(chu)這(zhe)些因(yin)素造(zao)成的(de)不壹(yi)致的(de)可(ke)能(neng)性;樣(yang)品(pin)稀(xi)釋前(qian)應充(chong)分混(hun)勻(yun)。

　　2. 可(ke)能(neng)原因：加(jia)樣過(guo)快(kuai)，孔(kong)間(jian)發生(sheng)汙染;重(zhong)復測(ce)定標本(ben)，操(cao)作(zuo)條件(jian)、人員等應盡(jin)可(ke)能(neng)與上次保(bao)持壹致，以(yi)排(pai)除(chu)這(zhe)些因(yin)素造(zao)成的(de)不壹(yi)致的(de)可(ke)能(neng)性;加(jia)樣(yang)不要過(guo)快(kuai)。

　　3. 可(ke)能(neng)原因：加(jia)錯樣本(ben);檢查記錄(lu)和試(shi)劑(ji)，是(shi)否(fou)加錯樣本(ben)。

　　4. 可(ke)能(neng)原因：加(jia)樣本(ben)及(ji)試(shi)劑時，加在(zai)孔壁(bi)上部(bu)非(fei)包(bao)被區;加(jia)樣(yang)槍(qiang)頭不要貼壁(bi)。

　　● 用壹張寫滿(man)字(zi)的(de)紙，字越(yue)多越(yue)好(hao)，比(bi)如(ru)報紙，墊在(zai)下面，這(zhe)樣(yang)，加(jia)過(guo)標本(ben)的(de)小孔(kong)看(kan)過(guo)去(qu)下面的(de)字會(hui)變小(xiao)，沒加(jia)的(de)字正(zheng)常(chang)，非(fei)常(chang)容(rong)易區分。

　　● 可(ke)以(yi)利(li)用液面反光與沒(mei)有(you)加(jia)的(de)孔加(jia)以(yi)區別(bie)。

　　ELISA本(ben)生(sheng)壹(yi)直(zhi)視(shi)質量(liang)控(kong)制(zhi)為(wei)企業(ye)的(de)生命(ming)，追(zhui)求企業(ye)競(jing)爭力的(de)不斷(duan)提升(sheng)。公(gong)司在(zai)經營(ying)中(zhong)始(shi)終秉(bing)承(cheng)：遵紀守法，嚴於(yu)律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待，敢於(yu)承(cheng)擔的(de)企業(ye)精神作(zuo)為(wei)標準(zhun)，以(yi)過硬(ying)的(de)質量(liang)和(he)優(you)良的(de)服務(wu)來(lai)維護和(he)拓(tuo)展(zhan)市場(chang)，較(jiao)大(da)限度的(de)滿(man)足(zu)客(ke)戶(hu)的(de)需求(qiu)。與(yu)客戶(hu)的(de)共(gong)贏，是我(wo)們(men)的(de)發展(zhan)目(mu)標。本(ben)生(sheng)!您(nin)信任的(de)合作(zuo)夥伴。我(wo)們(men)願(yuan)與(yu)您(nin)真(zhen)誠合(he)作，共(gong)創美好(hao)的(de)未(wei)來(lai)。