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BUNSEN本(ben)生:ELISA試(shi)劑實(shi)驗細(xi)節盤點(dian)
ELISA試劑盒(he)細節盤點(dian)
1. 樣(yang)本(ben)收(shou)集(ji)
每個標本量收(shou)集(ji)體(ti)積=100ulx檢測指(zhi)標,如要做復(fu)孔(kong),標本量收(shou)集(ji)體(ti)積=10Oul×檢測指(zhi)標×2。對收(shou)集(ji)後(hou)當(dang)天(tian)進(jin)行檢測(ce)的(de)標本,儲(chu)存在4℃備(bei)用,如有特(te)殊(shu)原因需(xu)要周期收(shou)集(ji)標本,將標本及(ji)時(shi)分(fen)裝(zhuang)後(hou)放在-20°℃或(huo)-70°℃條件(jian)下保存(cun),避免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融。標本2-8℃可(ke)保存(cun)48小(xiao)時(shi),-20°℃可(ke)保存(cun)1個月(yue)。-70度可(ke)保存(cun)6個月(yue)。部分(fen)激(ji)素(su)類標本需(xu)添加(jia)抑(yi)肽(tai)酶(mei)。如(ru)需(xu)離心的(de)樣(yang)本(ben),離心轉速不宜過(guo)高(2000~3000)
2. ELISA加(jia)樣(yang)
加(jia)樣(yang)品(pin)時(shi),單孔(kong)用量要求(qiu): ≥50ul/指(zhi)標,如需(xu)要做2個復(fu)孔(kong)則(ze)血量≥100ul/指(zhi)標。如果樣(yang)本(ben)量不充(chong)足(zu),具體(ti)用量可(ke)咨(zi)詢(xun)您(nin)的(de)專(zhuan)屬銷售。
3. 樣(yang)品(pin)捕(bu)獲抗體(ti)孵(fu)育
37C恒(heng)溫孵育,避免(mian)溫度(du)變化過(guo)大

4. 洗滌
機洗: 將25x×洗滌緩沖(chong)液(ye)稀釋成1×,1×洗滌緩沖(chong)液(ye)洗三(san)次(ci),每次(ci)加(jia)300uL浸(jin)泡60s手(shou)洗:手洗次(ci)數(shu)應比機洗次(ci)數(shu)多,浸(jin)泡時(shi)間也(ye)應適當(dang)延長
手洗容易(yi)導致吸附(fu)在(zai)酶(mei)標板底(di)部(bu)的(de)試(shi)劑脫落,從(cong)而導致結果(guo)偏小(xiao),手(shou)洗次(ci)數(shu)過(guo)多也(ye)會(hui)影響(xiang)實驗結(jie)果(guo),建議(yi)機洗
5. 底(di)物(wu)顯(xian)色(se)(TMB顯(xian)色(se)) 孵(fu)育
TMB在使(shi)用前(qian)應(ying)放置室(shi)溫平衡(heng)30分(fen)鐘(zhong),加(jia)的(de)量為A、B各(ge)50uL
6. ELISA終止(zhi)液終(zhong)止(zhi)反(fan)應
加(jia)完(wan)TMB終(zhong)止液應讓其混勻(yun)再在(zai)酶(mei)標儀上(shang)讀(du)數(shu)
7. 酶(mei)標儀讀數(shu)
在(zai)450nm波(bo)長處(chu)測(ce)定O.D值(zhi)
8. 根(gen)據O.D值(zhi)計(ji)算(suan)樣(yang)本(ben)濃(nong)度
使用軟件(jian)擬合(he)標準曲線(xian),根(gen)據標準曲線(xian)的(de)擬(ni)合(he)度(r或R2)以及(ji)殘(can)差平方和(he)(s)選擇(ze)合適的(de)曲線(xian)。
ELISA試(shi)劑盒(he)本生(sheng)壹(yi)直視質(zhi)量控制(zhi)為(wei)企業的(de)生(sheng)命,追求企業(ye)競(jing)爭(zheng)力的(de)不斷提升。公司(si)在(zai)經營中始終(zhong)秉承:遵紀(ji)守(shou)法(fa),嚴於律己,寬(kuan)仁(ren)以待(dai),敢於承擔(dan)的(de)企(qi)業(ye)精(jing)神作(zuo)為標準,以過(guo)硬的(de)質(zhi)量和(he)優良(liang)的(de)服(fu)務來維護和(he)拓展市(shi)場(chang),較大限度的(de)滿(man)足(zu)客(ke)戶的(de)需(xu)求。與客(ke)戶的(de)共(gong)贏(ying),是(shi)我(wo)們(men)的(de)發(fa)展目(mu)標。本生!您信(xin)任的(de)合(he)作(zuo)夥(huo)伴。我(wo)們(men)願與您(nin)真誠(cheng)合作(zuo),共創美好(hao)的(de)未(wei)來。
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