什(shen)麽是(shi)ELISA，ELISA目的及(ji)實驗(yan)方法(fa)有(you)哪些(xie)?

　　ELISA即(ji)酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)測定，指(zhi)將(jiang)可溶性的抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)結合到聚(ju)苯(ben)乙(yi)x等(deng)固相(xiang)載體(ti)上，利(li)用抗原(yuan)抗體(ti)結合專壹性進行(xing)免(mian)疫(yi)反應的定性和定(ding)量(liang)檢測方法(fa)。

　　ELISA應用的範(fan)圍(wei)很廣，而(er)且正在不斷(duan)地(di)擴(kuo)大(da)，原(yuan)則上ELISA可用於(yu)檢(jian)測壹切抗原(yuan)、抗(kang)體(ti)及(ji)半(ban)抗原(yuan)，可以直(zhi)接定量測定體(ti)液中(zhong)的可溶性抗原(yuan)。

　　擴(kuo)展資料 ：

　　ELISA操(cao)作(zuo)步(bu)驟復雜(za)，影(ying)響反(fan)應因(yin)素較多，特別(bie)是(shi)固相(xiang)載體(ti)的包被(bei)難達到各(ge)個體(ti)之(zhi)間(jian)的壹致(zhi)，因(yin)此在(zai)定量測定中，每(mei)批(pi)測試(shi)均須用壹系列(lie)不同濃(nong)度的參考(kao)標(biao)準(zhun)品在相(xiang)同的條件下制作(zuo)標(biao)準(zhun)曲(qu)線。

　　測定大分子量(liang)物(wu)質的夾(jia)心法(fa)ELISA，標(biao)準(zhun)曲(qu)線的範(fan)圍(wei)壹(yi)般(ban)較寬(kuan)，曲線最(zui)高點的吸光(guang)度可接近2.0，繪制(zhi)時(shi)常(chang)用半(ban)對(dui)數(shu)值(zhi)，以檢(jian)測物(wu)的濃度為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao)，以吸(xi)光(guang)度為(wei)縱坐(zuo)標(biao)，將(jiang)各濃度的值(zhi)逐點連接，所得曲(qu)線壹(yi)般呈(cheng)S形(xing)，其(qi)頭(tou)、尾(wei)部(bu)曲(qu)線趨於(yu)平(ping)坦，中央(yang)較呈(cheng)直(zhi)線的部分是的檢測區(qu)域。

　　ELISA也(ye)可應用於(yu)病(bing)毒抗(kang)體(ti)檢測：流感(gan)病(bing)毒、腮(sai)腺炎病毒、麻(ma)診、風疹(zhen)、輪狀病(bing)毒、皰(pao)疹(zhen)病毒、巨細(xi)胞(bao)病毒、EB病(bing)毒、腺病毒、腸道病(bing)毒、腦炎(yan)病毒、黃熱(re)病毒、狂犬(quan)病(bing)毒和(he)脊(ji)髓(sui)灰(hui)質(zhi)炎病(bing)毒等(deng)，其(qi)敏(min)感(gan)性都超(chao)過目(mu)前(qian)常(chang)用的檢測方法(fa)。此(ci)外(wai)，還(hai)可用於(yu)鑒(jian)定(ding)病毒型(xing)別(bie)，例(li)如皰疹(zhen)病毒。

　　ELISA目(mu)的是檢(jian)測血(xue)清(qing)中特定的抗原(yuan)，以達到定(ding)性判斷(duan)的目的。

　　酶(mei)聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附(fu)測定enzyme linked immunosorbent assay(簡寫(xie)ELISA)指(zhi)將(jiang)可溶性的抗原(yuan)或(huo)抗體(ti)結合到聚(ju)苯(ben)乙(yi)x等(deng)固相(xiang)載體(ti)上，利(li)用抗原(yuan)抗體(ti)結合專壹性進行(xing)免(mian)疫(yi)反應的定性和定(ding)量(liang)檢測方法(fa)。

　　ELISA分類方(fang)法(fa)：

　　1、夾(jia)心法(fa)

　　夾(jia)心法(fa)常(chang)用於(yu)檢(jian)測大分子抗(kang)原(yuan)。

　　2、間(jian)接法(fa)

　　間(jian)接法(fa)常(chang)用於(yu)檢(jian)測抗體(ti)。

　　3、競爭法(fa)

　　競爭法(fa)是(shi)壹(yi)種(zhong)較少(shao)用到的ELISA檢測機制(zhi)，壹(yi)般用於(yu)檢(jian)測小分子抗(kang)原(yuan)。

　　ELISA實驗(yan)所有方(fang)法(fa)的缺點很明顯：

　　1、重(zhong)復性不好;

　　2、收(shou)自(zi)身抗體(ti)、嗜異性抗體(ti)等(deng)幹(gan)擾，易(yi)出現(xian)假陽(yang)性;

　　3、不論儀(yi)器和(he)手(shou)工(gong)操作(zuo)，幹(gan)擾因(yin)素較多。影(ying)響最(zui)大的是溫(wen)度和(he)時(shi)間(jian)。

　　1、直(zhi)接法(fa)(directELISA)

　　將(jiang)抗原直(zhi)接固定在固相(xiang)載體(ti)上，參(can)加(jia)酶(mei)符號的壹級(ji)抗(kang)體(ti)，即可測定抗原總(zong)量，此(ci)壹(yi)級(ji)抗(kang)體(ti)的特異性非(fei)常(chang)重(zhong)要(yao)。

　　優(you)勢：操作(zuo)手(shou)續(xu)簡略，因(yin)無須(xu)運用二(er)抗可防止交(jiao)互(hu)反響。

　　缺(que)陷：實驗(yan)中的壹抗(kang)都得用酶(mei)符號，但不(bu)是(shi)每(mei)種(zhong)抗體(ti)都適(shi)合做(zuo)符號，費(fei)用相(xiang)對(dui)進步(bu)。

　　2.間(jian)接法(fa)(indirectELISA)

　　此(ci)測定辦(ban)法(fa)與(yu)直(zhi)接法(fa)相(xiang)似(si)，不壹(yi)樣在於(yu)壹(yi)級(ji)抗(kang)體(ti)沒(mei)有酶(mei)符號，改用酶(mei)符號的二(er)級(ji)抗(kang)體(ti)去(qu)辨(bian)識(shi)壹級(ji)抗(kang)體(ti)來(lai)測定抗原量(liang)。

　　優(you)勢(shi)：二(er)抗能(neng)夠(gou)加(jia)強(qiang)信(xin)號，並(bing)且有多種(zhong)挑(tiao)選(xuan)能(neng)做(zuo)不壹(yi)樣的測定剖(pou)析。不(bu)加(jia)酶(mei)符號的壹級(ji)抗(kang)體(ti)則能(neng)保存(cun)它(ta)最(zui)多的免(mian)疫(yi)反響性。

　　缺陷：交(jiao)互(hu)反響發(fa)作(zuo)的機率(lv)較高(gao)。

　　3.雙(shuang)抗體(ti)夾(jia)心法(fa)(sandwichELISA)

　　被(bei)檢(jian)測的抗原(yuan)包被在(zai)兩(liang)個抗(kang)體(ti)之(zhi)間(jian)，其(qi)間(jian)壹(yi)個抗(kang)體(ti)將(jiang)抗原固定於(yu)固相(xiang)載體(ti)上，即(ji)捕(bu)捉抗(kang)體(ti)。另壹(yi)個則(ze)是(shi)檢測抗體(ti)，此抗(kang)體(ti)可用酶(mei)符號後(hou)直(zhi)接測定抗原的量;或(huo)不符號，再(zai)透(tou)過酶(mei)符號的二(er)級(ji)抗(kang)體(ti)來(lai)測定抗原的量。這(zhe)兩(liang)種(zhong)抗體(ti)有必要(yao)當(dang)心選擇，才可防止交(jiao)互(hu)反響或(huo)競爭壹(yi)樣的抗原(yuan)聯系部(bu)位(wei)。

　　優勢(shi)：高(gao)活絡、高專(zhuan)壹性，抗原(yuan)無(wu)須事前(qian)純化。

　　缺(que)陷：抗(kang)原(yuan)必定得(de)具(ju)有兩(liang)個以上(shang)的抗體(ti)聯系部(bu)位(wei)。

　　4.競爭法(fa)(competitiveELISA)

　　樣(yang)本(ben)裏(li)的抗原(yuan)(自在抗(kang)原(yuan))和(he)純化並(bing)固定在固相(xiang)載體(ti)上的抗原(yuan)(固定抗原(yuan))壹同競爭壹(yi)樣的抗體(ti)，當(dang)樣品裏(li)的自在(zai)抗原越多，就(jiu)能(neng)夠(gou)聯(lian)系越多的抗體(ti)，而(er)固定抗原(yuan)就只(zhi)能(neng)聯(lian)系到較(jiao)少(shao)的抗體(ti)，反之(zhi)亦然(ran)。經(jing)清(qing)潔過程(cheng)，洗去(qu)自(zi)在抗原和(he)抗(kang)體(ti)的復合物(wu)，只留下固定抗原(yuan)和抗(kang)體(ti)的復合物(wu)，拿(na)來(lai)與(yu)只要(yao)固定抗原(yuan)的對(dui)照組(zu)成果相(xiang)比(bi)擬，依(yi)據(ju)呈色(se)區(qu)別(bie)就(jiu)可計算(suan)出(chu)樣(yang)品裏(li)的抗原(yuan)含(han)量(liang)。

　　優(you)勢(shi)：可適(shi)用比(bi)擬不(bu)純的樣本(ben)，並(bing)且數(shu)據再(zai)現(xian)性很高。

　　缺陷：全(quan)體(ti)的敏(min)感(gan)性和專(zhuan)壹(yi)性都較(jiao)差(cha)。

　　Elisa試(shi)劑盒 本生壹(yi)直(zhi)視質(zhi)量(liang)控制(zhi)為(wei)企(qi)業的生命，追(zhui)求(qiu)企業競爭力的不斷(duan)提(ti)升(sheng)。公(gong)司在經(jing)營中始終(zhong)秉承：遵(zun)紀(ji)守法(fa)，嚴於(yu)律(lv)己(ji)，寬仁以待(dai)，敢(gan)於(yu)承(cheng)擔的企業(ye)精神作(zuo)為(wei)標(biao)準(zhun)，以過(guo)硬的質量(liang)和優良的服(fu)務(wu)來(lai)維(wei)護和拓展(zhan)市(shi)場(chang)，較大(da)限(xian)度的滿足(zu)客(ke)戶(hu)的需求(qiu)。與客戶(hu)的共贏(ying)，是我們的發展(zhan)目標(biao)。本生!您信任(ren)的合作(zuo)夥伴。我們願與(yu)您真誠合作(zuo)，共創(chuang)美好的未(wei)來(lai)。