實(shi)驗(yan)幹(gan)貨——PCR試劑盒(he)註(zhu)意(yi)事項(xiang)與(yu)原則(ze)

　　PCR試劑盒(he)註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

　　①加(jia)入(ru)試劑的(de)順(shun)序，以(yi)保證(zheng)所有(you)反(fan)應(ying)板孔溫育的時間壹(yi)樣(yang)。

　　②使用幹凈的塑料(liao)容(rong)器(qi)配(pei)置洗(xi)滌液。

　　③按(an)照雞血紅(hong)蛋白(bai)(HB)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)說明(ming)書中(zhong)標(biao)明(ming)的時間、加液的量(liang)及(ji)順(shun)序進行溫育操(cao)作。

　　④底物A應(ying)揮(hui)發(fa)，避免長(chang)時間打(da)開蓋子。底(di)物(wu)B對(dui)光(guang)敏感，避免長(chang)時間暴(bao)露(lu)於光(guang)下(xia)。避免用手(shou)接觸(chu)，有(you)毒(du)。實(shi)驗(yan)完(wan)成後(hou)應(ying)立(li)即(ji)讀(du)取OD值(zhi)。

　　⑤洗(xi)滌酶標(biao)板時應(ying)充分拍幹，不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水(shui)紙(zhi)直(zhi)接放入(ru)酶標(biao)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水(shui)。

　　⑥使用壹(yi)次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭(tou)以免交(jiao)叉汙(wu)染，吸(xi)取(qu)終止液和(he)底(di)物A、B液時，避免使用帶金(jin)屬(shu)部(bu)分(fen)的(de)加(jia)樣(yang)器(qi) 。

　　⑦實(shi)驗(yan)中(zhong)不(bu)用的板條應(ying)立(li)即(ji)放回(hui)包裝袋(dai)中(zhong)，密(mi)封(feng)保存(cun)，以免變質(zhi)。

　　⑧試劑應(ying)按(an)標(biao)簽(qian)說明(ming)書儲存(cun)，使用前恢復(fu)到室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過後(hou)的標(biao)準品(pin)應(ying)丟(diu)棄(qi)，不(bu)可(ke)保存(cun)。

　　⑨不用的其它試劑應(ying)包(bao)裝好或(huo)蓋好。不(bu)同(tong)批(pi)號的試劑不(bu)要(yao)混用。保質(zhi)前使用。

　　PCR試劑盒(he)原則(ze)：

　　①引物長(chang)度： 15-30bp，常(chang)用為20bp左(zuo)右(you)。

　　②引物擴(kuo)增跨度： 以(yi)200-500bp為宜，特(te)定(ding)條(tiao)件下(xia)可(ke)擴(kuo)增長(chang)至(zhi)10kb的(de)片(pian)段(duan)。

　　③引物堿(jian)基(ji)：G+C含量(liang)以(yi)40-60%為宜，G+C太(tai)少(shao)擴(kuo)增效果(guo)不(bu)佳(jia)，G+C過(guo)多(duo)易(yi)出(chu)現(xian)非(fei)特(te)異條帶。ATGC機(ji)分(fen)布，避免5個以(yi)上的嘌呤或(huo)嘧(mi)啶(ding)核苷酸的(de)成串排(pai)列。

　　④避免引物內(nei)部(bu)出(chu)現(xian)二(er)級結構(gou)，避免兩(liang)條引物間互補，特(te)別是3'端(duan)的互補，否則(ze)會(hui)形(xing)成引物二(er)聚(ju)體，產(chan)生非(fei)特(te)異的擴(kuo)增條帶。

　　⑤引物3'端(duan)的堿(jian)基(ji)，特(te)別是末及(ji)倒(dao)數(shu)第(di)二(er)個(ge)堿(jian)基(ji)，應(ying)嚴(yan)格(ge)要(yao)求配(pei)對，以(yi)避免因末端(duan)堿基(ji)不配(pei)對而(er)導致PCR失(shi)敗(bai)。

　　⑥引物中(zhong)有(you)或(huo)能加(jia)上(shang)合(he)適(shi)的酶(mei)切(qie)位點(dian)， 被擴(kuo)增的靶序列有(you)適(shi)宜的(de)酶(mei)切(qie)位點， 這對酶(mei)切分析或(huo)分子(zi)克(ke)隆很有(you)好處。

　　⑦引物的(de)特(te)異性：引物應(ying)與(yu)核酸序(xu)列(lie)數(shu)據(ju)庫的(de)其它序(xu)列(lie)無(wu)明(ming)顯同(tong)源性(xing)。

　　ELISA試劑盒(he) 本(ben)生(天(tian)津(jin))健(jian)康科(ke)技有(you)限(xian)公司產品(pin)涵蓋有(you)熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR耗(hao)材(八聯管(guan),單(dan)管(guan),96孔(kong)板,384孔板,封板膜(mo),輔(fu)助器(qi)等)，ELISA試劑盒(he)，移(yi)液(ye)器(qi)吸(xi)嘴(zui)，離心管(guan)，凍(dong)存(cun)管(guan)，培(pei)養(yang)皿，培養(yang)板，培養(yang)瓶，吸(xi)頭(tou)，儀器(qi)及(ji)手(shou)套(tao)，培養(yang)基(ji)，抗體(ti)，血(xue)清，色(se)譜耗(hao)材，針(zhen)頭過(guo)濾(lv)器(qi)及(ji)實(shi)驗(yan)室(shi)常(chang)用耗材(cai)。 品(pin)種類(lei)超(chao)過(guo)萬種，廣泛(fan)應(ying)用於科(ke)研院(yuan)校、中(zhong)心(xin)實(shi)驗(yan)室(shi)、分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)等科(ke)研領域。

　　PCR試劑盒(he) 本(ben)生壹(yi)直(zhi)視(shi)質(zhi)量(liang)控(kong)制為企業的(de)生命(ming)，追求企(qi)業競爭力(li)的(de)不(bu)斷(duan)提(ti)升。公司在經(jing)營中(zhong)始(shi)終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀(ji)守(shou)法，嚴於律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁以(yi)待，敢(gan)於承擔(dan)的(de)企業精神(shen)作為標(biao)準，以(yi)過(guo)硬(ying)的(de)質(zhi)量(liang)和(he)優(you)良的服務(wu)來維護和(he)拓展市(shi)場(chang)，較(jiao)大(da)限度(du)的滿(man)足(zu)客(ke)戶(hu)的(de)需(xu)求(qiu)。與(yu)客(ke)戶(hu)的(de)共(gong)贏，是我們(men)的(de)發(fa)展目(mu)標(biao)。本(ben)生!您信(xin)任的(de)合作夥伴(ban)。我(wo)們願與(yu)您真誠(cheng)合(he)作，共創美(mei)好的(de)未(wei)來(lai)。