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實驗方法(fa):實驗中緩沖液配制(zhi)操(cao)作簡要(yao)流程(cheng)
定義(yi):
緩沖(chong)溶(rong)液(ye)指(zhi)的(de)是由弱(ruo)酸(suan)及其(qi)鹽(yan)、弱堿(jian)及其(qi)鹽(yan)組成(cheng)的(de)混合(he)溶(rong)液(ye),能(neng)在(zai)壹定程(cheng)度(du)上抵消(xiao)、減輕外(wai)加(jia)強(qiang)酸(suan)或強(qiang)堿(jian)對溶(rong)液(ye)酸(suan)堿(jian)度(du)的(de)影響(xiang),從(cong)而(er)保持溶(rong)液(ye)的(de)pH值相(xiang)對穩定。
以(yi)常(chang)用(yong)的(de)PBS磷酸(suan)緩沖(chong)溶(rong)液(ye)(不(bu)含鈣(gai)、鎂離子)為(wei)例(li),簡述(shu)配制(zhi)流程(cheng)。
實驗材(cai)料:
NaCl
Na2HPO4
KCl
KH2PO4
Mili-Q水(shui)
HCl
電(dian)子天平
高溫(wen)高壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)滅菌鍋
PH計
巴氏(shi)吸(xi)管[NEST]
PETG方(fang)形試劑瓶(ping)[NEST]
試劑配方:
NaCl 8.00g + Na2HPO4 1.15g + KH2PO4 0.20g + KCl 0.20g + 1L Mili-Q水(shui)= 1 × PBS
實驗中緩沖液實驗流程(cheng):
根據配制(zhi)需求計算需(xu)要使用(yong)的(de)試劑量,用(yong)電(dian)子天平分(fen)別(bie)稱取(qu)對應(ying)重(zhong)量(liang)的(de)試劑,在(zai)燒杯中混合,加(jia)入800 mL Mili-Q水(shui),用(yong)玻璃棒(bang)或(huo)磁(ci)力攪(jiao)拌(ban)器(qi)充(chong)分(fen)溶(rong)解(jie)。
待(dai)溶(rong)液(ye)澄澈透(tou)明無(wu)雜(za)質(zhi),再加(jia)入200 mL Mili-Q水(shui)定(ding)容至1 L,用(yong)巴氏(shi)吸(xi)管吸(xi)取(qu)HCl調節(jie)緩(huan)沖液PH值在(zai)標準範圍內。
將(jiang)配制(zhi)完成(cheng)的(de)PBS緩沖(chong)溶(rong)液(ye)移入高溫(wen)高壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)滅菌鍋內,121℃滅菌30min。
滅菌完成(cheng)後(hou),在(zai)超凈(jing)工作臺按需求分(fen)裝(zhuang)入PETG方形試劑瓶(ping)內,4℃條(tiao)件下保(bao)存備用(yong)。
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