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您(nin)現在(zai)的位置(zhi)：首頁 > 技(ji)術(shu)文章(zhang) > 天(tian)津本生闡(chan)述(shu)：甘(gan)油(you)三酯(zhi)(TG)檢測(ce)試劑盒(he)
PS1087 甘(gan)油(you)三酯(zhi)(TG)檢測(ce)試劑盒(he) GPO-PAD單(dan)試劑微(wei)板(ban)法(fa) (psaitong)保存條件(jian)：-20℃ 避光(guang) 6個(ge)月(yue)
產品簡(jian)介(jie)
| 甘(gan)油(you)三酯(zhi)(Triglyceride，TG)又稱三酰(xian)甘(gan)油(you)，是(shi)3分(fen)子(zi)長(chang)鏈脂肪酸和甘(gan)油(you)形(xing)成(cheng)的脂肪分子(zi)，是人(ren)體內(nei)含(han)量(liang)最(zui)多(duo)的脂類，大(da)部(bu)分(fen)組織均可(ke)以(yi)利(li)用甘(gan)油(you)三酯(zhi)分解產物供給(gei)能(neng)量，同時(shi)肝臟、脂肪等(deng)組(zu)織還可(ke)以(yi)進行甘(gan)油(you)三酯(zhi)的合(he)成(cheng)，用酶(mei)學(xue)方法測定(ding) TG 是(shi)生化檢測(ce)中(zhong)的常(chang)用方(fang)法(fa)， 其特(te)點(dian)是：1、靈(ling)敏(min)度(du)、準確(que)度(du)、精密(mi)度(du)均(jun)高；2、使用溫和的反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)；3、操作簡(jian)便(bian)；4、適(shi)用於(yu)自(zi)動分(fen)析儀(yi)。 本公司甘(gan)油(you)三脂(TG)檢測(ce)試劑盒(he)(GPO-PAP 單(dan)試劑微(wei)板(ban)法(fa))又(you)稱磷(lin)酸(suan)甘(gan)油(you)氧化酶法或(huo)磷(lin)酸(suan)甘(gan)油(you)氧化酶-過(guo)氧化物酶(mei)偶聯法等(deng)，其原理是甘(gan)油(you)三脂被(bei) LPL 水(shui)解為(wei)甘(gan)油(you)和脂肪酸，後者經(jing)甘(gan)油(you)激(ji)酶(mei)和 ATP 磷(lin)酸(suan)化，G-3-P 被(bei)磷(lin)酸(suan)甘(gan)油(you)氧化酶(GPO)氧化並(bing)產生(sheng)過(guo)氧化氫，再經過(guo)氧化物酶(mei)(POD)催(cui)化，使 4-氨基(ji)安(an)替比林(lin)與(yu)酚(fen)(三者(zhe)合稱 PAP)反應(ying)，生(sheng)成(cheng)紅色benhun醌(kun)亞胺(Trinder 反(fan)應(ying))，酶(mei)標儀在 500~520nm 處(chu)進行比色測(ce)定(ding)，用於(yu)人(ren)或(huo)動物的血(xue)清(qing)、血(xue)漿、腦(nao)脊(ji)液、細胞、組織等(deng)樣(yang)本中的甘(gan)油(you)三脂含(han)量(liang)定量(liang)測定(ding)。該(gai)試劑盒(he)僅(jin)用於(yu)科(ke)研(yan)領域(yu)，不適(shi)用於(yu)臨(lin)床診斷或(huo)其他(ta)用途(tu)。 |
組(zu)分(fen)：
| 名(ming)稱 | 規格 | 儲(chu)存(cun) | |
| 試劑(A): GPO-PAP工(gong)作液 | Good's Buffer | 30mL | -20℃ 避光(guang) |
| LPL、GK、GPO | |||
| 過(guo)氧化物酶(mei)(POD) | |||
| 4-氨基(ji)安(an)替比林(lin) | |||
| 對(dui)氯(lv)酚(fen) | |||
| 試劑(B): Glycerol 標(biao)準(1.7mmol/L) | 1mL | 4℃ 避光(guang) | |
| 試劑(C): ddH2O | 1mL | RT | |
自(zi)備(bei)材(cai)料:
| 1、生(sheng)理(li)鹽水(shui)或(huo)PBS。 |
| 2、96 孔(kong)板(ban)或(huo)離心(xin)管、小試管。 |
| 3、水(shui)浴鍋(guo)或(huo)恒(heng)溫箱(xiang)。 |
| 4、酶(mei)標(biao)儀或(huo)分光(guang)光(guang)度(du)計。 |
| 5、全(quan)自(zi)動或(huo)半自(zi)動生(sheng)化分析儀。 |
操作步(bu)驟(僅(jin)供參(can)考(kao))：
| 壹(yi)、樣(yang)本處(chu)理(li) | |||
| 1、血(xue)清(qing)、血(xue)漿、腦(nao)脊(ji)液樣(yang)本：從待(dai)測樣(yang)本中分(fen)離(li)出的血(xue)清(qing)或(huo)血(xue)漿不應(ying)有(you)溶血(xue)，直接檢測(ce)，如(ru)超過(guo)線(xian)性(xing)範圍(wei)，用生(sheng)理(li)鹽水(shui)稀(xi)釋後檢測(ce)。 | |||
| 2、細胞樣(yang)本 | |||
| a:取(qu)適(shi)量(liang)的細胞(壹(yi)般推薦＞106以(yi)上(shang))，1000g離心10min，棄(qi)上(shang)清(qing)，留(liu)取沈澱(dian)。 | |||
| b:.用 PBS 或(huo)生理(li)鹽水(shui)清(qing)洗(xi) 1-2 次，1000g離心10min，棄(qi)上(shang)清(qing)，留(liu)取沈澱(dian)。 | |||
| c:加(jia)入(ru)200-300μl 的PBS或(huo)生理(li)鹽水(shui)勻漿(jiang)，冰(bing)浴條件(jian)下(xia)超聲破(po)碎細胞，功率300W，每(mei)次(ci)3-5s，間隔(ge)30s,重復(fu)3-5次；亦(yi)可(ke)手(shou)動勻(yun)漿，制(zhi)備(bei)好(hao)的勻(yun)漿(jiang)液不可(ke)離(li)心(xin)；亦(yi)可(ke)用1-2% Triton X-100 冰(bing)浴 30-60min，制備(bei)好(hao)的裂(lie)解液不可(ke)離(li)心(xin)。 | |||
| 3、組(zu)織樣(yang)本：準確(que)稱取適(shi)量(liang)組織樣(yang)本，按質(zhi)量(liang)(g)：生理鹽水(shui)或(huo)PBS(mL)=1：9的比(bi)例，加入生理(li)鹽水(shui)或(huo)PBS，冰(bing)浴條件(jian)下(xia)手(shou)動或(huo)機械(xie)勻漿(jiang)，2500-3000g 離心10min，取上(shang)清(qing)待(dai)用。 | |||
| 二(er)、酶標(biao)儀TG測(ce)定操作: | |||
| 1：按(an)下(xia)表依次加(jia)入(ru)試劑： | |||
| 加(jia)入(ru)物(μL) | 空白孔(kong) | 標(biao)準孔(kong) | 待(dai)測孔(kong) |
| ddH2O | 3 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
| 待(dai)測樣(yang)本 | - | - | 3 |
| GPO-PAP 工(gong)作液 | 300 | 300 | 300 |
| 2：充(chong)分(fen)混勻(yun), 37℃水(shui)浴中孵(fu)育(yu)5min。 | |||
| 3：酶(mei)標(biao)儀測定 500-520nm 吸光(guang)度(du)，以(yi)空白孔(kong)調零(ling)，讀取標準孔(kong)和各待(dai)測孔(kong)的吸(xi)光(guang)度(du)。 | |||
| 三、分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(1ml 比(bi)色杯(bei))、半(ban)自(zi)動生(sheng)化分析儀 TG 測定操作： | |||
| 1、按(an)下(xia)表依次加(jia)入(ru)試劑： | |||
| 加(jia)入(ru)物(mL) | 空白管 | 標(biao)準管 | 待(dai)測管 |
| ddH2O | 0.01 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(1.7mmol/L) | - | 0.01 | - |
| 待(dai)測樣(yang)本 | - | - | 0.01 |
| GPO-PAP 工(gong)作液 | 1 | 1 | 1 |
| 2、充(chong)分(fen)混勻(yun), 37℃水(shui)浴中孵(fu)育(yu)5min。 | |||
| 3、分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計測(ce)定500-520nm吸(xi)光(guang)度(du)，空白管調零(ling)，讀取標準管和各待(dai)測管的吸(xi)光(guang)度(du)。 | |||
| 四(si)、普通(tong)分光(guang)光(guang)度(du)計(2mL比(bi)色杯(bei))TG 測(ce)定(ding)操作: | |||
| 1、按(an)下(xia)表依次加(jia)入(ru)試劑： | |||
| 加(jia)入(ru)物(mL) | 空白管 | 標(biao)準管 | 待(dai)測管 |
| ddH2O | 0.02 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(1.7mmol/L) | - | 0.02 | - |
| 待(dai)測樣(yang)本 | - | - | 0.02 |
| GPO-PAP 工(gong)作液 | 2 | 2 | 2 |
| 2、充(chong)分(fen)混勻(yun), 37℃水(shui)浴中孵(fu)育(yu)5min。 | |||
| 3、分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計測(ce)定500-520nm吸(xi)光(guang)度(du)，空白管調零(ling)，讀取標準管和各待(dai)測管的吸(xi)光(guang)度(du)。 | |||
| 五(wu)、全(quan)自動生(sheng)化分析儀 TG 測定操作: | |||
| 1、按(an)下(xia)表依次加(jia)入(ru)試劑： | |||
| 加(jia)入(ru)物((μL) | 空白管 | 標(biao)準管 | 待(dai)測管 |
| ddH2O | 3 | - | - |
| Glycerol 標(biao)準(1.7mmol/L) | - | 3 | - |
| 待(dai)測樣(yang)本 | - | - | 3 |
| GPO-PAP 工(gong)作液 | 300 | 300 | 300 |
| 2、充(chong)分(fen)混勻(yun), 37℃水(shui)浴中孵(fu)育(yu)5min。 | |||
| 3、全(quan)自(zi)動生(sheng)化分析儀測定 500-520nm 波(bo)長(chang)處(chu)吸(xi)光(guang)度(du)，以(yi)空白管調零(ling)，讀取標準管和各待(dai)測管的吸(xi)光(guang)度(du)。 | |||
機(ji)器參(can)數：
| 主(zhu)波(bo)長(chang)/次波(bo)長(chang) | 500/600nm |
| 反(fan)應(ying)類型(xing) | 終(zhong)點(dian)法 |
| 反(fan)應(ying)方(fang)向 | 升(sheng)反(fan)應(ying)(+) |
計算公式：
| 血(xue)清(qing)、血(xue)漿等(deng)液體(ti)樣(yang)本(空白調零(ling))： |
| TG(mmol/L)=｛(待(dai)測管吸光(guang)度(du)-空白吸(xi)光(guang)度(du))/(標(biao)準管吸光(guang)度(du)-空白吸(xi)光(guang)度(du))｝×1.7mmol/L |
| 血(xue)清(qing)、血(xue)漿等(deng)液體(ti)樣(yang)本(全自(zi)動生(sheng)化分析儀)： |
| TGmmol/L)=(待(dai)測管吸光(guang)度(du)/(標(biao)準管吸光(guang)度(du))×1.7mmol/L |
| 細胞、組織等(deng)樣(yang)本(空白調零(ling))： |
| TG(mmol/L)=｛ ( 待(dai) 測 管 吸 光(guang) 度(du) - 空 白 吸(xi) 光(guang) 度(du) )/( 標(biao) 準 管 吸 光(guang) 度(du) -空 白 吸(xi) 光(guang) 度(du) ) ｝×1.7mmol/L÷待(dai)測樣(yang)本濃度(mg/mL) |
| 細胞、組織等(deng)樣(yang)本(全自(zi)動生(sheng)化分析儀)： |
| TG(mmol/L)=(待(dai)測管吸光(guang)度(du)/(標(biao)準管吸光(guang)度(du))×1.7mmol/L÷待(dai)測樣(yang)本濃度(mg/mL) |
參(can)考(kao)區(qu)間(jian)：
| 健(jian)康成(cheng)年人(ren)： |
| 理(li)想(xiang)範(fan)圍(wei)：＜1.7mmol/L(＜150mg/dl) |
| 邊(bian)緣升(sheng)高：＜1.7-2.25mmol/L(150-199mg/dl) |
| 升(sheng)高：＜2.26-5.64mmol/L(200-499mg/dl) |
| 很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl) |
性(xing)能(neng)指標：
| 外(wai)觀 | 無色至(zhi)淡黃色澄清(qing)液體(ti) |
| 線(xian)性(xing)範圍(wei) | 0.05-9.0mmol/L(4~790mg/dl)，R2>0.98 |
| 靈(ling)敏(min)度(du) | 檢測(ce)下(xia)限 0.05mmol/L(4mg/dl) |
| 變(bian)異(yi)系(xi)數 | 批(pi)內(nei)<5%，批(pi)間(jian)<8%，總誤差(cha)<10% |
| 空白吸(xi)光(guang)值(zhi) | <0.2(1cm 光(guang)徑(jing)) |
| 幹擾因素(su) | 膽(dan)紅素(su)<205μmol/L；血(xue)紅蛋白<6g/L；EDTA、肝素(su)抗(kang)凝(ning)時(shi)，對結(jie)果(guo)無明(ming)顯影(ying)響(xiang)。 |
| 穩(wen)定(ding)性(xing) | 密(mi)閉，6個月(yue) |
註(zhu)意(yi)事項：
| 1、上(shang)述(shu)低(di)溫試劑避免反復(fu)凍融(rong)，以免失效或(huo)效率下(xia)降。 |
| 2、本法可(ke)直接用於(yu)檢測(ce)腦(nao)脊(ji)液中(zhong)的TG含(han)量(liang)，但(dan)不能(neng)直接檢測(ce)尿(niao)液中(zhong)的TG含(han)量(liang)，因為(wei)未(wei)經(jing)處(chu)理(li)的尿(niao)液中(zhong)含(han)有(you)還原(yuan)性(xing)物質(zhi)，影(ying)響(xiang)過(guo)氧化物酶(mei)反(fan)應(ying)。 |
| 3、待(dai)測樣(yang)本如(ru)不能(neng)及時(shi)測(ce)定，應(ying)置(zhi)於2-8℃保存，3天(tian)內(nei)穩(wen)定(ding)。 |
| 4、本法線(xian)性(xing)範圍(wei)可(ke)達(da)9.0mmol/L，如(ru)果樣(yang)本TG濃度過(guo)高，結果(guo)可(ke)能(neng)呈假性(xing)降低(di)，應(ying)用生(sheng)理(li)鹽水(shui)稀(xi)釋後重測(ce)，結(jie)果乘(cheng)以稀(xi)釋倍(bei)數。 |
| 有(you)效期(qi)： | -20℃ 避光(guang)， 6個(ge)月(yue)有(you)效。 |
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