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如(ru)何選擇(ze)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)進行各(ge)項實(shi)驗條件?
使(shi)用(yong)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)進行試(shi)驗(yan)時,應分(fen)別以(yi)陽(yang)性對照與(yu)陰(yin)性(xing)對照控制(zhi)試驗(yan)條件,待檢樣品應(ying)作(zuo)壹(yi)式二份,以保(bao)證(zheng)實驗(yan)結(jie)果(guo)的(de)準確(que)性(xing)。有(you)時本(ben)底(di)較高,說(shuo)明有(you)非特(te)異(yi)性反(fan)應(ying)。
在ELISA中,進行各(ge)項實(shi)驗條件的(de)選(xuan)擇(ze)是很(hen)重要的(de),其(qi)中包括(kuo):
固相(xiang)載(zai)體(ti)的(de)選(xuan)擇(ze):許(xu)多(duo)物(wu)質(zhi)可(ke)作(zuo)為固相(xiang)載(zai)體(ti),如(ru)聚氯yixi、聚苯yixi、聚丙酰(xian)胺(an)和纖(xian)維素(su)等。其(qi)形(xing)式可以(yi)是凹孔平板、試管(guan)、珠粒(li)等(deng)。目(mu)前(qian)常用(yong)的(de)是40孔(kong)聚苯yixi凹孔板。不管(guan)何種載(zai)體(ti),在使(shi)用(yong)前均(jun)可進行篩(shai)選(xuan):用等量抗原(yuan)包(bao)被,在同壹(yi)實驗條件下(xia)進行反(fan)應(ying),觀察其(qi)顯色(se)反(fan)應(ying)是否(fou)均(jun)壹(yi)性,據此(ci)判明其吸(xi)附性(xing)能(neng)是否(fou)良(liang)好。
包被(bei)抗體(或(huo)抗原(yuan))的(de)選(xuan)擇(ze):將(jiang)抗體(或(huo)抗原(yuan))吸(xi)附在固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表面(mian)時,要求純度要好,吸(xi)附時壹(yi)般(ban)要求PH在9.0~9.6之(zhi)間(jian)。吸(xi)附溫(wen)度,時間及其蛋白(bai)量也(ye)有(you)壹(yi)定影響,壹(yi)般(ban)多(duo)采(cai)用4℃18~24小(xiao)時。蛋白(bai)質(zhi)包(bao)被(bei)的(de)適(shi)濃(nong)度需進行滴(di)定(ding):即用不(bu)同的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)濃(nong)度(0.1、1.0和10μg/ml等(deng))進行包(bao)被(bei)後(hou),在其(qi)它(ta)試驗(yan)條件相(xiang)同時,觀察陽(yang)性標本(ben)的(de)OD值(zhi)。選(xuan)擇(ze)OD值大而蛋(dan)白(bai)量少(shao)的(de)濃(nong)度。對於(yu)多(duo)數(shu)蛋白(bai)質(zhi)來(lai)說(shuo)通常為1~10μg/ml。
本(ben)生(sheng)技(ji)術(shu)提醒:除(chu)此(ci)之外(wai)還要註(zhu)意(yi)以(yi)下(xia)事項:
1.確(que)定(ding)ELISA檢測(ce)試劑盒(he)在有(you)效(xiao)期(qi)內(nei);
2.仔細閱(yue)讀說(shuo)明書;
3.按說(shuo)明書確(que)定(ding)所(suo)有(you)試劑齊(qi)全(數(shu)量、體(ti)積(ji));
4.標本(ben)制(zhi)備要規(gui)範,每(mei)份標本(ben)體積(ji)要按2-3個(ge)復(fu)孔(kong)以(yi)上(shang)的(de)量制(zhi)備,盡量分(fen)裝做(zuo)備(bei)份。短(duan)期(qi)內(nei)無(wu)法實驗(yan)者(zhe),註(zhu)意(yi)低(di)溫(wen)保(bao)存(cun);
5.根據(ju)檢測(ce)標本(ben)數(shu)量確(que)定(ding)所(suo)需試(shi)劑的(de)量;
6.準備好所有(you)實驗額(e)外(wai)所需物(wu)品,如(ru)試管(guan)、吸(xi)頭、移液器(qi)、離(li)心(xin)機等(deng);
7.按說(shuo)明書將所用(yong)試劑平衡(heng)至室(shi)溫(wen),配制(zhi)所需試(shi)劑。
ELISA檢測(ce)試劑盒(he)天(tian)津(jin)本(ben)生(sheng)既能(neng)滿(man)足研(yan)發(fa)類(lei)客戶對產(chan)品種(zhong)類、包裝(zhuang)的(de)特(te)殊要求,也(ye)能(neng)滿(man)足生(sheng)產(chan)型企(qi)業從(cong)小試(shi)、中試到規(gui)模化(hua)生(sheng)產(chan)各(ge)個階(jie)段(duan)的(de)綜(zong)合(he)需求。產(chan)品涵(han)蓋有(you)熒(ying)光(guang)定(ding)量PCR耗(hao)材(cai)(八聯管,單管,96孔板,384孔板,封板膜,輔(fu)助器(qi)等(deng)),ELISA試(shi)劑盒(he),移液器(qi)吸(xi)嘴,離(li)心(xin)管(guan),凍存(cun)管(guan),培(pei)養(yang)皿,培養(yang)板,培養(yang)瓶,吸(xi)頭,儀(yi)器及(ji)手套(tao),培(pei)養基(ji),抗體,血清,色(se)譜(pu)耗(hao)材(cai),針(zhen)頭過(guo)濾(lv)器(qi)及(ji)實(shi)驗(yan)室常(chang)用耗(hao)材(cai)。 品種(zhong)類超過(guo)萬種(zhong),廣泛(fan)應用於(yu)科研(yan)院(yuan)校(xiao)、中心(xin)實(shi)驗室(shi)、分(fen)子生(sheng)物(wu)學(xue)等(deng)科研(yan)域(yu)。
上(shang)壹(yi)篇(pian):本(ben)生(sheng)詳述:比(bi)色(se)皿(min)在使(shi)用(yong)的(de)過(guo)程中需註(zhu)意(yi)事(shi)項
下(xia)壹(yi)篇(pian):本(ben)生(sheng)大鼠II型膠原(yuan)試(shi)劑盒(he)區(qu)分(fen)方(fang)法
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