如(ru)何(he)正(zheng)確(que)使(shi)用(yong)96孔PCR孔板

　　PCR板(ban)有(you)透(tou)明(ming)和乳白色(se)可選(xuan)，其(qi)中(zhong)乳(ru)白色(se)更適(shi)合(he)用於(yu)頂部(bu)采集熒光(guang)信號的新(xin)型(xing)熒光(guang)定量PCR儀(如(ru)伯樂(le)CFX系(xi)列(lie)，ABI 7500fast 以上(shang)型(xing)號， Roche 480系(xi)列(lie))，但如(ru)果(guo)熒光(guang)定量PCR儀是(shi)底部(bu)光(guang)源的(de)，則應選(xuan)擇透(tou)明(ming)的(de)。

　　BUNSEN本生(sheng)PCR板(ban)根(gen)據裙邊(bian)設(she)計(ji)又可分(fen)為無裙邊、半裙邊(bian)和全裙邊(bian)三(san)種設計(ji)模(mo)式(shi)，不(bu)同廠(chang)家(jia)的熒光(guang)定量PCR儀會設計(ji)不(bu)同的切角(jiao)或邊緣(yuan)凸(tu)起，請(qing)選(xuan)擇適(shi)合(he)該PCR儀的板子(zi)。

　　PCR板(ban)又(you)分(fen)100ul體(ti)積(矮(ai)板)和200ul體(ti)積(高板(ban))，根(gen)據機(ji)型(xing)的不(bu)同選(xuan)擇，選(xuan)擇不(bu)同高度(du)孔板(ban)，避免(mian)高度(du)錯(cuo)誤(wu)對機(ji)器(qi)造(zao)成破(po)壞(huai)和加熱(re)不(bu)均導致(zhi)數據失真(zhen)。

　　當使(shi)用(yong)96孔板做(zuo)熒光(guang)定量PCR實驗的(de)時(shi)候，推薦(jian)使(shi)用(yong)光(guang)學膜(mo)代(dai)來(lai)密(mi)封反(fan)應孔。正(zheng)確(que)的封膜(mo)方(fang)法(fa)是(shi)：先沿著(zhe)96孔(kong)板(ban)的縱(zong)向(xiang)壓膜(mo)，然後(hou)橫(heng)向(xiang)，最後(hou)沿著板的邊緣(yuan)按(an)壓使(shi)之(zhi)密(mi)封。具(ju)體(ti)手(shou)法見下面(mian)圖示(shi)：

　　加樣(yang)後(hou)會在管壁(bi)上(shang)飛(fei)濺壹(yi)些(xie)小(xiao)液滴，另外(wai)反(fan)應體(ti)系(xi)內(nei)也(ye)會有壹(yi)些(xie)氣泡，需(xu)要(yao)離(li)心去掉(diao)掛壁(bi)液(ye)滴和氣泡。請(qing)使(shi)用(yong)專用的微孔(kong)板(ban)離(li)心機(ji)解(jie)決上(shang)述(shu)問(wen)題。

　　PCR板屬(shu)於(yu)壹(yi)次(ci)性(xing)消(xiao)耗品(pin)，生(sheng)產壹(yi)次(ci)成型(xing)，不(bu)建議剪開使(shi)用(yong)容(rong)易造(zao)成實驗誤(wu)差增(zeng)加，不(bu)能清洗(xi)或部(bu)分(fen)重(zhong)復(fu)利(li)用。不(bu)要(yao)為(wei)了節省(sheng)壹(yi)點(dian)小(xiao)錢，而(er)給實驗帶(dai)來(lai)後(hou)續分(fen)析上(shang)的(de)困擾(rao)。

　　樣(yang)本量(liang)少(shao)，用8聯管做(zuo)實驗該(gai)註(zhu)意(yi)哪(na)些(xie)?

　　8聯管也(ye)分(fen)乳白和透(tou)明(ming)兩(liang)種(zhong)，選(xuan)擇方(fang)式(shi)和孔板壹(yi)樣(yang)，根(gen)據PCR儀的熒光(guang)信號采集方(fang)式(shi)決定。

　　BUNSEN本生(sheng)8聯管同(tong)樣也有0.1ml(矮(ai)管)和0.2ml(高管(guan))，根(gen)據PCR儀的加熱(re)模(mo)塊體(ti)積確定。

　　8聯管的(de)蓋子(zi)壹(yi)般(ban)有(you)光(guang)學平(ping)蓋和凸(tu)型(xing)圓蓋(gai)之分(fen)，光(guang)學平(ping)蓋適(shi)用於(yu)熒光(guang)定量PCR，圓蓋(gai)適用(yong)於(yu)普(pu)通(tong)PCR。

　　使(shi)用(yong)單管(guan)或8聯管做(zuo)實驗，並且樣本數(shu)量(liang)不(bu)多(duo)的(de)時候，建議在樣品加熱(re)塊(TRAY)上(shang)對(dui)稱地(di)安放(fang)樣品，好是(shi)縱(zong)向(xiang)放(fang)置，並且優先(xian)放在(zai)第(di)6列(lie)或第7列(lie)，然後(hou)逐(zhu)漸向(xiang)兩(liang)邊(bian)放(fang)置(zhi)。這(zhe)樣做(zuo)的好處是(shi)熱(re)蓋壓下來的(de)時候不(bu)至(zhi)於(yu)發(fa)生(sheng)傾斜(xie)，各個反(fan)應管的(de)受力和受熱(re)都比較(jiao)均勻(yun)，提(ti)高孔(kong)與孔之(zhi)間(jian)的數(shu)據精密(mi)性(xing)。也(ye)可以在(zai)加熱(re)模(mo)塊四(si)角(jiao)的位置(zhi)，放(fang)置4個單管(guan)平(ping)衡熱(re)蓋壓力，避免(mian)擴(kuo)增(zeng)少(shao)量樣(yang)本時(shi)出(chu)現管(guan)子(zi)變(bian)形的(de)情(qing)況。

　　管蓋(gai)沒有蓋好造(zao)成PCR反(fan)應液熱(re)蒸(zheng)發(fa)，影(ying)響反(fan)應溫(wen)度(du)的準(zhun)確(que)控(kong)制(zhi)及反(fan)應也各(ge)成份(fen)的濃度(du)，同時(shi)也成為(wei)壹(yi)個汙(wu)染(ran)源。不(bu)但會因壓蓋時由於(yu)粗心(xin)或者(zhe)用(yong)力不(bu)均致(zhi)使(shi)部(bu)分(fen)蓋子(zi)變(bian)形，而(er)且還會(hui)造(zao)成樣(yang)品(pin)的交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)，所以(yi)我們推薦(jian)用獨(du)立管(guan)蓋(gai)的8聯管，每(mei)管(guan)蓋壹(yi)體(ti)，確(que)保樣(yang)本獨(du)立反(fan)應，避免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。

　　如(ru)何(he)正(zheng)確(que)使(shi)用(yong)96孔PCR孔板! 本生(sheng)壹(yi)直視質量控(kong)制(zhi)為(wei)企(qi)業的生(sheng)命，追(zhui)求(qiu)企(qi)業競(jing)爭(zheng)力的不(bu)斷(duan)提(ti)升。公(gong)司在經(jing)營中始終(zhong)秉承(cheng)：遵(zun)紀(ji)守(shou)法，嚴於(yu)律(lv)己(ji)，寬(kuan)仁(ren)以(yi)待(dai)，敢於(yu)承(cheng)擔的企(qi)業精神作(zuo)為(wei)標準(zhun)，以(yi)過硬的(de)質量和優良(liang)的服(fu)務來維護和拓展(zhan)市(shi)場(chang)，較(jiao)大限度(du)的滿足(zu)客戶(hu)的(de)需(xu)求。與客戶(hu)的(de)共贏，是(shi)我們的(de)發展(zhan)目(mu)標。本生(sheng)!您(nin)信任的合(he)作夥伴。我們願與您真(zhen)誠合(he)作，共創(chuang)美好的未(wei)來(lai)。