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如(ru)何選(xuan)擇(ze)PCR實驗的所需耗(hao)材(cai)?
壹般(ban)想到(dao)的可(ke)能(neng)是(shi)獲(huo)取的DNA/RNA質量、反(fan)轉(zhuan)錄的效率、引物(wu)的特異(yi)性乃(nai)至(zhi)DNA聚(ju)合酶的保(bao)真(zhen)度、擴增長度等(deng)問(wen)題,但很少(shao)有(you)人(ren)會想到(dao)耗材(cai)的(de)選(xuan)擇(ze),可(ke)能(neng)也會影響(xiang)您的(de)實驗結(jie)果。那(na)麽關於PCR實驗耗材(cai)我(wo)們改如何選(xuan)擇(ze)呢(ne)?下(xia)面(mian)BUNSEN本生小編(bian)詳(xiang)解不(bu)放(fang)來(lai)看(kan)下:
需要(yao)明(ming)確(que)的(de)是(shi)我(wo)們做(zuo)的(de)是(shi)哪(na)種(zhong)PCR實驗。根據(ju)檢測(ce)方法的(de)不(bu)同,PCR實驗分(fen)為(wei)普通(tong)PCR法和(he)熒光(guang)定(ding)量PCR法,前(qian)者(zhe)壹般(ban)是(shi)終點(dian)PCR跑膠法測(ce)定(ding),所以在選(xuan)擇(ze)耗(hao)材(cai)時需要(yao)關註(zhu)的(de)主(zhu)要(yao)是(shi)耗(hao)材本身(shen)的(de)導熱性和(he)密(mi)封性(xing);而(er)後者(zhe)是(shi)實時(shi)檢測(ce)熒光(guang)信號,除(chu)了導熱性和(he)密(mi)封性(xing)外,對透光(guang)性(xing)和(he)避(bi)光(guang)性(xing)也(ye)有(you)所要(yao)求(qiu)。換(huan)句(ju)話(hua)而(er)言(yan),可以(yi)做熒光(guang)定(ding)量PCR的(de)耗(hao)材壹定(ding)可(ke)以(yi)來(lai)做(zuo)普通PCR,反(fan)之,效果卻會差(cha)很多(duo)!
確(que)定(ding)好(hao)了實驗類型(xing),我(wo)們就(jiu)可以(yi)選(xuan)擇(ze)耗(hao)材(cai)了,如(ru)前(qian)面(mian)所述,我(wo)們知道(dao)了密(mi)封性(xing)、導熱性、透(tou)光(guang)性(xing)、避(bi)光(guang)性(xing)等(deng)因(yin)素(su)是(shi)我(wo)們需要(yao)關註(zhu)的(de),那(na)為(wei)什麽要(yao)關註(zhu)這(zhe)些(xie)呢?
壹、密(mi)封性(xing)
密(mi)封性(xing)越(yue)好,產物(wu)的揮(hui)發(fa)越少(shao),得(de)到(dao)的產物(wu)就(jiu)越多(duo)同時氣(qi)溶膠的產生也(ye)越少(shao),對於下壹輪(lun)實驗的汙(wu)染(ran)也就(jiu)越少(shao),也就(jiu)意味(wei)著(zhe)假陽性的(de)產生率(lv)越低(di)。
二、導熱性
導熱性越(yue)好(hao)越(yue)均(jun)壹,PCR的(de)速度就(jiu)越快(kuai),準確度也(ye)越(yue)高(gao)。
三、透(tou)光(guang)性(xing)
這(zhe)主要(yao)是(shi)對(dui)於熒光(guang)定(ding)量而(er)言(yan),我(wo)們知道(dao)它是(shi)壹種(zhong)實時(shi)定(ding)量的(de)方(fang)式(shi),那(na)麽耗材本身(shen)的(de)透(tou)光(guang)性(xing)就(jiu)直接(jie)關(guan)系(xi)到(dao)我(wo)們檢(jian)測(ce)到(dao)的熒光(guang)信號多(duo)少(shao),如果(guo)選(xuan)擇(ze)耗(hao)材(cai)透光(guang)性(xing)不(bu)足,本該(gai)檢(jian)測(ce)到(dao)的信號檢(jian)測(ce)不到(dao),那(na)就(jiu)會造(zao)成我(wo)們對(dui)結(jie)果的(de)誤判。
四、避(bi)光(guang)性(xing)
這(zhe)也是(shi)針(zhen)對熒光(guang)定(ding)量而(er)言(yan)的,同上(shang)面(mian)的(de)因(yin)素(su),如果(guo)我(wo)們在整(zheng)個(ge)實驗過(guo)程中沒(mei)註(zhu)意避(bi)光(guang),帶(dai)有(you)熒光(guang)的(de)試(shi)劑(ji)過(guo)度被消耗,那(na)*直接就(jiu)會影響(xiang)我(wo)們實驗的擴增效率,導致(zhi)不準確的結(jie)果產生。
采用(yong)的(de)壹次註(zhu)塑成型技術,超(chao)薄設計(ji),熱傳導快,視(shi)窗比(bi)平(ping)面(mian)低(di),不易被劃(hua)擦(ca),管子(zi)密(mi)封性(xing)更(geng)好,近乎零(ling)蒸(zheng)發(fa),減少(shao)了氣(qi)溶膠的汙(wu)染(ran),*大程度避(bi)免(mian)了假(jia)陽性的(de)產生。熒光(guang)系(xi)列,蓋(gai)子(zi)高(gao)度透(tou)光(guang),可(ke)適(shi)用(yong)於頂讀與(yu)低(di)讀。
八(ba)聯管(適(shi)用(yong)普(pu)通(tong)PCR)
低於平面(mian)的(de)高透(tou)視(shi)窗設計(ji),可以*大程度避(bi)免(mian)被劃(hua)擦(ca)。進口的原(yuan)材料(liao)的使(shi)用(yong)使(shi)得(de)管壁(bi)具(ju)有(you)均壹的(de)平整和(he)穩(wen)定(ding)的(de)不(bu)黏壁(bi)性,確(que)保(bao)了樣品(pin)處理(li)和(he)吸(xi)取(qu)時(shi)的精(jing)準度。
不同於市面(mian)上(shang)其他廠家(jia)底(di)部註塑的(de)方(fang)式(shi),BUNSEN本生註(zhu)塑點(dian)是(shi)在板面(mian)上(shang)的孔(kong)與(yu)孔(kong)的交叉處,這樣使(shi)得(de)PCR板的管底(di)與(yu)PCR儀(yi)的接(jie)觸(chu)更(geng)好,同時采(cai)用(yong)純(chun)度高(gao)達(da)99.9%的(de)聚(ju)丙烯(xi),超(chao)薄設計(ji)、壁(bi)厚壹致(zhi)均勻(yun)的工(gong)藝使(shi)得(de)熱傳導精(jing)確、控溫(wen)準確、有(you)效減少(shao)了實驗循環時(shi)間(jian)。
如(ru)何選(xuan)擇(ze)PCR實驗的所需耗(hao)材(cai)? 既(ji)能滿(man)足研(yan)發(fa)類客戶(hu)對(dui)產品種(zhong)類、包(bao)裝(zhuang)的特殊(shu)要(yao)求(qiu),也(ye)能(neng)滿(man)足生產型企業從(cong)小試(shi)、中試(shi)到(dao)規模(mo)化(hua)生產各(ge)個(ge)階(jie)段的綜合需求(qiu)。產品涵蓋(gai)有(you)熒光(guang)定(ding)量PCR耗(hao)材(cai)(八(ba)聯管,單管,96孔板,384孔板,封板膜(mo),輔(fu)助器等),ELISA試(shi)劑(ji)盒,移液器吸(xi)嘴,離心管,凍(dong)存管,培養皿(min),培養板,培養瓶,吸(xi)頭(tou),儀(yi)器及(ji)手套,培(pei)養基(ji),抗體(ti),血(xue)清(qing),色譜耗材(cai),針(zhen)頭(tou)過(guo)濾(lv)器(qi)及(ji)實驗室(shi)常用(yong)耗(hao)材(cai)。
上(shang)壹篇(pian):什麽是(shi)微(wei)量離心管,與(yu)EP管有(you)什麽區別?
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